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α-鹅膏毒肽相应核酸适配体的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
英文缩写词表第14-16页
第一章 绪论第16-38页
   ·核酸适配体简介第16-29页
     ·核酸适配体的理论基础(SELEX技术)第16-21页
     ·核酸适配体的应用第21-29页
       ·适配体在检测肿瘤细胞的媒介作用第21-22页
       ·核酸适配体亲和色谱第22-24页
       ·核酸适配体微阵列晶片第24-25页
       ·适配体在蛋白质功能研究中的应用第25-26页
       ·核酸适配体作为药理探针用于靶标的确认第26-27页
       ·核酸适配体应用于医学领域的优势第27-29页
     ·核酸适配体的研究展望第29页
   ·α-鹅膏毒肽的研究概况第29-35页
     ·α-鹅膏毒肽的简介第30-31页
     ·鹅膏肽类毒素的检测方法第31-35页
       ·纸层层析法、薄层层析法第31-32页
       ·高效液相色谱法第32页
       ·毛细管区带电泳法第32页
       ·鹅膏毒肽的RNA聚合酶Ⅱ抑制检测法第32-33页
       ·液相色谱-质谱联用法第33页
       ·紫外吸收光谱检测技术第33页
       ·荧光检测技术第33-34页
       ·放射性免疫测定法第34-35页
   ·课题的意义与主要内容第35-38页
     ·课题的背景与意义第35-36页
     ·课题的主要内容第36页
     ·课题的技术路线第36-38页
第二章 SELEX技术筛选α-鹅膏毒肽相应核酸适配体第38-57页
   ·实验材料与仪器第39-42页
     ·主要试剂第39-40页
     ·相关溶液的配制第40-41页
     ·主要仪器第41-42页
   ·实验方法第42-48页
     ·SELEX筛选总流程图第42页
     ·构建寡核苷酸文库和引物第42-43页
     ·SELEX筛选步骤第43-46页
       ·配基(α-鹅膏毒肽)与基质(Sepharose 6B)的偶联第43页
       ·核酸适配体文库(ssDNA)的预处理第43-44页
       ·α-鹅膏毒肽-Sepharose6B与ssDNA随机库的结合第44-45页
       ·PCR优化和大量扩增核酸适配体第45-46页
     ·核酸适配体的克隆和测序以及二级结构的预测第46-48页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第46页
       ·连接及连接产物的转化第46-47页
       ·核酸适配体的克隆筛选和测序以及单链DNA二级结构预测第47页
       ·圆二色谱法(CD)对K~+浓度与α-鹅膏毒肽相应核酸适配体结构关系的探究第47-48页
   ·结果与分析第48-56页
     ·SELEX筛选得到的核酸适配体的克隆和测序结果第48-50页
     ·对与α-鹅膏毒肽相应核酸适配体的二级结构的预测第50-53页
     ·圆二色谱法(CD)对α-鹅膏毒肽相应核酸适配体二级结构的探究第53-56页
   ·本章小结第56-57页
第三章 α-鹅膏毒肽相应核酸适配体的特异性和亲和力的鉴定第57-69页
   ·实验材料与仪器第58-59页
     ·主要试剂第58页
     ·相关主要溶液的配制第58-59页
     ·主要仪器第59页
   ·实验方法第59-64页
     ·α-鹅膏毒肽相应的核酸适配体特异性的检测第60-62页
       ·酶联寡核苷酸法(ELONA法)第60-61页
       ·Dot Blot法第61-62页
     ·α-鹅膏毒肽相应核酸适配体E06和H06最佳浓度的检测第62-63页
     ·α-鹅膏毒肽相应核酸适配体灵敏度的检测第63-64页
       ·ELONA法第63-64页
       ·高效液相色谱法(HPLC)第64页
   ·结果与分析第64-68页
     ·α-鹅膏毒肽相应的核酸适配体特异性的检测结果第64-66页
     ·α-鹅膏毒肽相应的核酸适配体E06和H06最适浓度的检测结果第66页
     ·不同方法对α-鹅膏毒肽灵敏度的检测结果第66-68页
   ·本章小结第68-69页
第四章 结论第69-71页
第五章 展望第71-72页
致谢第72-73页
参考文献第73-83页
攻读硕士期间发表的论文和发明专利第83-84页

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