| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-21页 |
| ·有机磷农药 | 第13-15页 |
| ·有机磷农药的发展概况 | 第13页 |
| ·有机磷农药作用机理 | 第13-14页 |
| ·有机磷农药的污染及危害 | 第14-15页 |
| ·有机磷农药的微生物降解 | 第15-17页 |
| ·有机磷农药降解方法 | 第15-16页 |
| ·有机磷农药降解菌 | 第16页 |
| ·有机磷农药降解酶 | 第16-17页 |
| ·细菌分泌系统 | 第17-20页 |
| ·常见的分泌途径 | 第17-18页 |
| ·双精氨酸蛋白转运途径 | 第18-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 施氏假单胞菌YC-YH1降解酶基因克隆表达 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·主要试剂耗材、菌株及载体 | 第21页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·菌株基因组DNA提取 | 第22页 |
| ·降解酶基因的获得 | 第22-24页 |
| ·载体构建 | 第24-26页 |
| ·mpd和ophc2基因的诱导表达及蛋白纯化 | 第26-28页 |
| ·MPH和OPHC2的比较分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-33页 |
| ·基因组DNA提取 | 第28页 |
| ·克隆得到mpd和ophc2基因 | 第28-29页 |
| ·构建得到pET-mpd和pET-ophc2 | 第29-30页 |
| ·蛋白质表达纯化 | 第30-31页 |
| ·MPH和OPHC2的比较分析 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 菌株YC-YH1降解酶的酶活性质分析 | 第34-40页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·试剂与材料 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·蛋白质定量 | 第34页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线的制作 | 第34页 |
| ·酶的活性测定 | 第34页 |
| ·酶学性质的测定 | 第34-35页 |
| ·降解甲基对硫磷的动力学分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·蛋白质定量 | 第35-36页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线 | 第36页 |
| ·酶学性质的研究 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 菌株YC-YH1利用Tat系统分泌MPH载体构建 | 第40-49页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·主要试剂及菌株、载体 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·MPH的定位 | 第40-41页 |
| ·菌株基因组DNA提取 | 第41-42页 |
| ·重组质粒构建 | 第42-44页 |
| ·菌株YC-YH1生长曲线测定 | 第44-45页 |
| ·YC-YH1菌株感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·重组质粒转化进入菌株YC-YH1 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·MPH的定位 | 第45-46页 |
| ·菌株YC-YH1生长曲线 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的获得 | 第47-48页 |
| ·转化菌株的获得 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第五章 菌株YC-YH1利用Tat系统分泌MPH能力测定 | 第49-55页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·试剂与材料 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·菌株YC-YH1(sTorA-mpd)生长曲线测定 | 第49页 |
| ·毒死蜱标准曲线的制作 | 第49-50页 |
| ·降解毒死蜱能力测定 | 第50页 |
| ·酶活力测定 | 第50页 |
| ·蛋白含量测定 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·菌株YC-YH1(sTorA-mpd)生长曲线 | 第50-51页 |
| ·毒死蜱标准曲线 | 第51-52页 |
| ·解毒死蜱能力测定 | 第52-53页 |
| ·酶活力测定 | 第53页 |
| ·蛋白含量测定 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第六章 结论 | 第55-56页 |
| ·研究结果 | 第55页 |
| ·创新点 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
