| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-29页 |
| ·植物胁迫响应 | 第19-20页 |
| ·植物MAPK | 第20-22页 |
| ·MAPK级联途径组成及其特点 | 第20-22页 |
| ·植物MAPK级联途径作用机理 | 第22页 |
| ·植物MAPK功能 | 第22-26页 |
| ·植物MAPK与非生物胁迫 | 第23-26页 |
| ·植物MAPK与生物胁迫 | 第26页 |
| ·植物MAPK与植物激素信号转导,胁迫响应 | 第26-28页 |
| ·桑树MAPK的相关研究进展 | 第28-29页 |
| 第二章 引言 | 第29-33页 |
| ·研究背景及意义 | 第29-30页 |
| ·研究主要内容 | 第30-31页 |
| ·技术路线 | 第31-33页 |
| 第三章 MnMAPK5基因的生物信息学分析及启动子分析 | 第33-53页 |
| ·实验材料和试剂 | 第33-38页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·数据库和实用软件 | 第33页 |
| ·实验试剂及溶液配制方法 | 第33-34页 |
| ·溶液配制方法 | 第34-37页 |
| ·实验仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-45页 |
| ·MnMAPK5基因的进化分析和保守结构分析 | 第38页 |
| ·植物基因组的提取 | 第38页 |
| ·MnMAPK5上游启动子载体的构建 | 第38-42页 |
| ·农杆菌的制备、转化及检测 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第43-44页 |
| ·阳性拟南芥植株的筛选与检测 | 第44页 |
| ·MnMAPK5启动子转基因拟南芥表达模式分析 | 第44-45页 |
| ·结果和分析 | 第45-50页 |
| ·MnMAPK5基因生物信息学分析 | 第45页 |
| ·MnAMPK5启动子元件预测 | 第45-48页 |
| ·MnMAPK5启动子载体构建和转基因拟南芥的阳性筛选 | 第48-49页 |
| ·MnMAPK5启动子实验分析 | 第49-50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-53页 |
| 第四章 桑树MAPK5基因的亚细胞定位和表达谱分析 | 第53-65页 |
| ·实验材料和试剂 | 第53-54页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验实用软件 | 第53页 |
| ·实验试剂 | 第53-54页 |
| ·实验溶液配制方法 | 第54页 |
| ·实验器材 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-59页 |
| ·亚细胞定位载体的构建 | 第54-56页 |
| ·洋葱表皮细胞定位的瞬时转化 | 第56页 |
| ·桑树种子消毒和培养 | 第56-57页 |
| ·粤桑幼苗的胁迫诱导处理和取材 | 第57页 |
| ·桑树mRNA的提取 | 第57页 |
| ·第一链cDNA的合成与检测 | 第57-58页 |
| ·荧光定量PCR(qRT-PCR)检测桑树基因的表达量 | 第58-59页 |
| ·结果和分析 | 第59-60页 |
| ·MnMAPK5融合蛋白和EGFP蛋白的亚细胞定位 | 第59-60页 |
| ·桑树MAPK5表达谱分析 | 第60页 |
| ·小结与讨论 | 第60-65页 |
| 第五章 MnMAPK5转基因拟南芥在不同胁迫下的功能研究 | 第65-95页 |
| ·实验材料和试剂 | 第65-66页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·实验试剂 | 第65页 |
| ·溶液配方 | 第65-66页 |
| ·实验器材 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-72页 |
| ·MnMAPK5过表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·农杆菌的制备、转化及阳性检测 | 第67页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化和阳性筛选 | 第67页 |
| ·qRT-PCR检测转基因拟南芥中基因表达量 | 第67-68页 |
| ·转基因拟南芥的胁迫及生理指标的测定 | 第68-72页 |
| ·结果和分析 | 第72-90页 |
| ·MnMAPK5载体构建和过表达拟南芥的阳性筛选 | 第72-73页 |
| ·MnMAPK5在盐胁迫条件下的研究 | 第73-77页 |
| ·MnMAPK5在干旱胁迫条件下的研究 | 第77-80页 |
| ·MnMAPK5在冷胁迫条件下的影响研究 | 第80-81页 |
| ·MnMAPK5过表达拟南芥在热胁迫条件下的研究 | 第81页 |
| ·MnMAPK5过表达拟南芥在H2O2胁迫条件下的研究 | 第81-87页 |
| ·MnMAPK5过表达拟南芥在ABA诱导下的研究 | 第87-88页 |
| ·MnMAPK5过表达拟南芥在MeJA诱导下的研究 | 第88-90页 |
| ·MnMAPK5过表达拟南芥在SA诱导下的研究 | 第90页 |
| ·小结与讨论 | 第90-95页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第95-99页 |
| 参考文献 | 第99-107页 |
| 附录 | 第107-109页 |
| 在读期间发表论文及参加课题 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |