摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 绪论 | 第10-13页 |
·我国贝类养殖现状和存在问题 | 第10页 |
·热休克蛋白的分类及生物学功能 | 第10-11页 |
·研究进展 | 第11-12页 |
·研究目的及意义 | 第12-13页 |
第二章 菲律宾蛤仔HSP60基因的克隆及表达分析 | 第13-38页 |
·实验材料 | 第13-14页 |
·实验动物 | 第13页 |
·实验试剂 | 第13页 |
·实验仪器 | 第13-14页 |
·实验方法 | 第14-19页 |
·蛤仔总RNA的提取 | 第14-15页 |
·HSP60基因c DNA序列全长获得 | 第15-17页 |
·凝胶回收、连接和转化 | 第17-18页 |
·蛤仔HSP60 c DNA序列的生物信息学分析 | 第18-19页 |
·实验结果 | 第19-27页 |
·RNA质量检测 | 第19页 |
·5’-和 3’-RACE产物检测 | 第19-20页 |
·蛤仔HSP60基因的生物信息学分析结果 | 第20-27页 |
·蛤仔HSP60表达分析 | 第27-31页 |
·实验材料 | 第28页 |
·样品处理及组织样提取 | 第28-29页 |
·RNA提取 | 第29页 |
·反转录 | 第29页 |
·引物设计 | 第29页 |
·荧光实时定量PCR条件的优化 | 第29-30页 |
·数据处理方法 | 第30-31页 |
·实验结果 | 第31-37页 |
·总RNA提取结果 | 第31页 |
·标准曲线的建立 | 第31-33页 |
·蛤仔HSP60基因组织特异性表达结果 | 第33-34页 |
·野生蛤仔HSP60基因低盐胁迫后的表达规律分析 | 第34-35页 |
·野生蛤仔HSP60基因高温胁迫后的表达规律分析 | 第35-36页 |
·野生蛤仔HSP60基因低温胁迫后的表达规律分析 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第三章 HSPS家族(40、60、90)基因启动子的克隆及初步分析 | 第38-47页 |
·材料与方法 | 第38-41页 |
·蛤仔总DNA的提取 | 第38页 |
·酶切基因组DNA | 第38-39页 |
·酶切后DNA的纯化 | 第39页 |
·染色体步移接头制备 | 第39页 |
·连接染色体步移接头 | 第39-40页 |
·启动子区引物设计 | 第40页 |
·启动子区扩增 | 第40-41页 |
·启动子序列分析 | 第41页 |
·结果 | 第41-46页 |
·DNA样品检测 | 第41页 |
·酶切基因组DNA检测 | 第41-42页 |
·启动子序列分析 | 第42-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第四章 蛤仔不同壳色品系在低盐胁迫下HSPS家族(40、60、90)基因表达分析 | 第47-59页 |
·材料与方法 | 第47-48页 |
·低盐胁迫处理及取样 | 第47页 |
·实验试剂 | 第47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-48页 |
·荧光定量引物设计 | 第48页 |
·结果 | 第48-57页 |
·HSPs组织特异性表达 | 第48-51页 |
·低盐胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析 | 第51-54页 |
·低盐胁迫下不同壳色蛤仔中HSPs的表达规律分析 | 第54-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
第五章 蛤仔不同壳色品系在温度胁迫下HSPS家族(40、60、90)基因表达分析 | 第59-74页 |
·材料与方法 | 第59-61页 |
·高温胁迫处理及取样 | 第59-60页 |
·低温胁迫处理及取样 | 第60页 |
·实验试剂 | 第60页 |
·实验仪器 | 第60页 |
·实验方法 | 第60页 |
·荧光定量引物设计 | 第60-61页 |
·结果 | 第61-72页 |
·高温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析 | 第61-64页 |
·高温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析 | 第64-66页 |
·低温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析 | 第66-69页 |
·低温胁迫下不同壳色蛤仔中HSPs的表达规律分析 | 第69-72页 |
·讨论 | 第72-74页 |
结论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第81-84页 |
致谢 | 第84页 |