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温度和盐度对菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)热休克蛋白家族基因表达的影响

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 绪论第10-13页
   ·我国贝类养殖现状和存在问题第10页
   ·热休克蛋白的分类及生物学功能第10-11页
   ·研究进展第11-12页
   ·研究目的及意义第12-13页
第二章 菲律宾蛤仔HSP60基因的克隆及表达分析第13-38页
   ·实验材料第13-14页
     ·实验动物第13页
     ·实验试剂第13页
     ·实验仪器第13-14页
   ·实验方法第14-19页
     ·蛤仔总RNA的提取第14-15页
     ·HSP60基因c DNA序列全长获得第15-17页
     ·凝胶回收、连接和转化第17-18页
     ·蛤仔HSP60 c DNA序列的生物信息学分析第18-19页
   ·实验结果第19-27页
     ·RNA质量检测第19页
     ·5’-和 3’-RACE产物检测第19-20页
     ·蛤仔HSP60基因的生物信息学分析结果第20-27页
   ·蛤仔HSP60表达分析第27-31页
     ·实验材料第28页
     ·样品处理及组织样提取第28-29页
     ·RNA提取第29页
     ·反转录第29页
     ·引物设计第29页
     ·荧光实时定量PCR条件的优化第29-30页
     ·数据处理方法第30-31页
   ·实验结果第31-37页
     ·总RNA提取结果第31页
     ·标准曲线的建立第31-33页
     ·蛤仔HSP60基因组织特异性表达结果第33-34页
     ·野生蛤仔HSP60基因低盐胁迫后的表达规律分析第34-35页
     ·野生蛤仔HSP60基因高温胁迫后的表达规律分析第35-36页
     ·野生蛤仔HSP60基因低温胁迫后的表达规律分析第36-37页
   ·讨论第37-38页
第三章 HSPS家族(40、60、90)基因启动子的克隆及初步分析第38-47页
   ·材料与方法第38-41页
     ·蛤仔总DNA的提取第38页
     ·酶切基因组DNA第38-39页
       ·酶切后DNA的纯化第39页
     ·染色体步移接头制备第39页
     ·连接染色体步移接头第39-40页
     ·启动子区引物设计第40页
     ·启动子区扩增第40-41页
     ·启动子序列分析第41页
   ·结果第41-46页
     ·DNA样品检测第41页
     ·酶切基因组DNA检测第41-42页
     ·启动子序列分析第42-46页
   ·讨论第46-47页
第四章 蛤仔不同壳色品系在低盐胁迫下HSPS家族(40、60、90)基因表达分析第47-59页
   ·材料与方法第47-48页
     ·低盐胁迫处理及取样第47页
     ·实验试剂第47页
     ·实验仪器第47页
     ·实验方法第47-48页
     ·荧光定量引物设计第48页
   ·结果第48-57页
     ·HSPs组织特异性表达第48-51页
     ·低盐胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析第51-54页
     ·低盐胁迫下不同壳色蛤仔中HSPs的表达规律分析第54-57页
   ·讨论第57-59页
第五章 蛤仔不同壳色品系在温度胁迫下HSPS家族(40、60、90)基因表达分析第59-74页
   ·材料与方法第59-61页
     ·高温胁迫处理及取样第59-60页
     ·低温胁迫处理及取样第60页
     ·实验试剂第60页
     ·实验仪器第60页
     ·实验方法第60页
     ·荧光定量引物设计第60-61页
   ·结果第61-72页
     ·高温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析第61-64页
     ·高温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析第64-66页
     ·低温胁迫下HSPs在不同壳色蛤仔中的表达规律分析第66-69页
     ·低温胁迫下不同壳色蛤仔中HSPs的表达规律分析第69-72页
   ·讨论第72-74页
结论第74-76页
参考文献第76-81页
攻读硕士期间发表的学术论文第81-84页
致谢第84页

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