| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-26页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第12-14页 |
| ·杀虫晶体蛋白的分类及杀虫机理 | 第12-14页 |
| ·杀虫晶体蛋白的保护 | 第14页 |
| ·肽聚糖水解酶概述 | 第14-22页 |
| ·肽聚糖水解酶的分类 | 第15-16页 |
| ·肽聚糖水解酶的功能 | 第16-22页 |
| ·M23/37家族蛋白酶概述 | 第22-24页 |
| ·催化位点及结构特点 | 第22-23页 |
| ·活性形式 | 第23-24页 |
| ·酶的成熟机制及底物 | 第24页 |
| ·立题依据与目的意义 | 第24-26页 |
| ·立题依据 | 第24-25页 |
| ·目的意义 | 第25-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-48页 |
| ·实验材料 | 第26-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基和抗生素 | 第27页 |
| ·酶、柱子与生化试剂 | 第27-28页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第28-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·软件及数据库 | 第31页 |
| ·实验研究方法 | 第31-48页 |
| ·重组质粒的构建及转化 | 第31-37页 |
| ·蛋白的诱导表达与粗提取 | 第37-38页 |
| ·蛋白纯化 | 第38-40页 |
| ·生物素标记 | 第40-42页 |
| ·目标蛋白与细胞壁结合实验 | 第42-44页 |
| ·目的蛋白消化细胞壁实验 | 第44页 |
| ·目的蛋白消化Cry1Ac晶体及BSA实验 | 第44页 |
| ·HD73_1661蛋白定位实验 | 第44-45页 |
| ·HD( 1661)突变株的构建与筛选 | 第45-47页 |
| ·HD( 1661)突变株性状分析 | 第47-48页 |
| 第3章 结果与分析 | 第48-78页 |
| ·HD73_0859基因及蛋白的生物信息学分析 | 第48-51页 |
| ·HD73_0859蛋白信号肽分析 | 第48页 |
| ·HD73_0859蛋白结构域分析 | 第48-49页 |
| ·HD73_0859蛋白二级结构分析 | 第49-50页 |
| ·HD73_0859蛋白三级结构及催化位点分析 | 第50-51页 |
| ·HD73_0859系列基因及蛋白基本信息分析 | 第51页 |
| ·HD73_1661基因和蛋白的生物信息学分析 | 第51-55页 |
| ·HD73_1661蛋白信号肽分析 | 第51-52页 |
| ·HD73_1661蛋白结构域分析 | 第52-53页 |
| ·HD73_1661蛋白二级结构分析 | 第53-54页 |
| ·HD73_1661蛋白三级结构及催化位点分析 | 第54页 |
| ·HD73_1661系列基因及蛋白基本信息分析 | 第54-55页 |
| ·HD73_0859、HD73_1661蛋白序列与M23家族其它蛋白序列比对 | 第55-56页 |
| ·HD73_0859系列基因的克隆及重组质粒的构建 | 第56-57页 |
| ·PCR扩增重组基因片段 | 第56-57页 |
| ·重组表达质粒的构建和检测 | 第57页 |
| ·HD73_0859系列蛋白的表达与纯化 | 第57-60页 |
| ·HD73_0859系列蛋白的诱导表达 | 第57-58页 |
| ·HD73_0859系列蛋白的纯化 | 第58-60页 |
| ·HD73_0859蛋白与HD73细胞壁结合印迹分析 | 第60-62页 |
| ·生物素标记 | 第60-61页 |
| ·细胞壁结合实验 | 第61-62页 |
| ·HD73_0859蛋白生物学功能验证 | 第62-64页 |
| ·HD73_0859蛋白消化细胞壁实验 | 第62-63页 |
| ·HD73_0859蛋白水解BSA及Cry1Ac晶体实验 | 第63-64页 |
| ·HD73_1661系列基因的克隆及重组质粒的构建 | 第64-65页 |
| ·PCR扩增重组基因片段 | 第64-65页 |
| ·重组表达质粒的构建和检测 | 第65页 |
| ·HD73_1661系列蛋白的表达与纯化 | 第65-67页 |
| ·HD73_1661系列蛋白的诱导表达 | 第65-66页 |
| ·HD73_1661系列蛋白的纯化 | 第66-67页 |
| ·HD73_1661蛋白与HD73细胞壁结合印迹分析 | 第67-68页 |
| ·生物素标记 | 第67页 |
| ·细胞壁结合实验 | 第67-68页 |
| ·HD73_1661蛋白生物学功能验证 | 第68-71页 |
| ·HD73_1661蛋白消化细胞壁实验 | 第68-69页 |
| ·HD73_1661蛋白消化BSA及Cry1Ac晶体实验 | 第69-71页 |
| ·HD73_1661蛋白定位实验 | 第71-74页 |
| ·重叠PCR扩增HD73-P-1661-gfp重组基因 | 第71-72页 |
| ·重组质粒pHT-1661-gfp的构建与鉴定 | 第72页 |
| ·HD73_1661蛋白在Bt_HD73中的定位 | 第72-74页 |
| ·HD( 1661)突变株的获得 | 第74-76页 |
| ·插入突变盒的构建 | 第74-75页 |
| ·插入突变株的筛选和鉴定 | 第75-76页 |
| ·HD( 1661)突变株特性分析 | 第76-78页 |
| 第4章 讨论 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 附录 | 第87-98页 |
| 附录A HD73_0859系列基因及蛋白氨基酸序列 | 第87-92页 |
| 附录B HD73_1661系列基因及蛋白氨基酸序列 | 第92-98页 |
| 论文发表及获奖情况 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
