| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| ·透明质酸酶概述 | 第9-10页 |
| ·透明质酸酶简介 | 第9-10页 |
| ·透明质酸酶的生物学功能 | 第10页 |
| ·水蛭透明质酸酶的研究概况 | 第10页 |
| ·毕赤酵母表达体系 | 第10-13页 |
| ·毕赤酵母表达体系简介 | 第10-11页 |
| ·毕赤酵母表达体系的特征 | 第11-12页 |
| ·影响透明质酸酶在毕赤酵母中表达的关键因素 | 第12-13页 |
| ·立题意义 | 第13-14页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-24页 |
| ·DNA基本操作 | 第18-19页 |
| ·信号肽基因克隆 | 第19-20页 |
| ·HAase基因LHyal的N端融合双亲短肽 | 第20-21页 |
| ·培养方法 | 第21页 |
| ·相关参数测定方法 | 第21-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-40页 |
| ·最适信合肽的选择 | 第24-29页 |
| ·信号肽HKR1，YTP1，SCS3，nsB基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·含不同信号肽表达质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·含不同信号肽重组质粒的整合表达及酶活分析 | 第26-27页 |
| ·重组菌株GS115-nsB-LHyal的补料分批发酵培养 | 第27-28页 |
| ·重组菌株GS115-nsB-LHyal的SDS-PAGE电泳分析 | 第28-29页 |
| ·N端融合双亲短肽提高透明质酸酶的分泌表达 | 第29-33页 |
| ·LHyal的N端融合双亲短肽 | 第29页 |
| ·含不同双亲短肽重组质粒的构建 | 第29-30页 |
| ·含不同双亲短肽重组质粒的整合表达及酶活分析 | 第30-31页 |
| ·重组菌株GS115-nsB-AP2-LHyal的SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白AP2-HAase的酶学性质分析 | 第32-33页 |
| ·融合短肽AP2 对透明质酸酶酶动力学参数的影响 | 第33页 |
| ·阶段控温策略提高透明质酸酶的产量 | 第33-40页 |
| ·诱导温度对菌体生长和透明质酸酶表达的影响 | 第34-37页 |
| ·诱导温度对细胞活力的影响 | 第37-38页 |
| ·诱导温度对醇氧化酶AOX酶活力影响 | 第38-39页 |
| ·阶段控温策略表达透明质酸酶 | 第39-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
