| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| ·1,3-丙二醇的理化性质和主要用途 | 第10-11页 |
| ·1,3-丙二醇的生产概况 | 第11-12页 |
| ·1,3-丙二醇的生产方法 | 第12-13页 |
| ·化学合成法 | 第12-13页 |
| ·微生物发酵法 | 第13页 |
| ·微生物法产1,3-丙二醇代谢途径研究及改造 | 第13-18页 |
| ·微生物法产1,3-丙二醇的生产菌种 | 第13-14页 |
| ·微生物法产1,3-丙二醇的合成途径 | 第14-15页 |
| ·微生物法产1,3-丙二醇基因工程菌的构建 | 第15-18页 |
| ·论文研究意义与内容 | 第18-20页 |
| 第2章 克雷伯氏菌乳酸脱氢酶基因缺失菌株的构建 | 第20-46页 |
| ·引言 | 第20页 |
| ·克雷伯氏菌ldhA基因敲除意义 | 第20页 |
| ·λRed重组系统概述 | 第20页 |
| ·实验材料与仪器 | 第20-22页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·菌株、质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| ·克雷伯氏菌乳酸脱氢酶基因的克隆 | 第22-28页 |
| ·氯霉素抗性基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·同源重组线性片段ldhA1-Cm~r-ldhA2的制备 | 第30-31页 |
| ·ldhA基因的敲除 | 第31-33页 |
| ·阳性菌株的鉴定 | 第33页 |
| ·实验结果与讨论 | 第33-45页 |
| ·ldhA基因的克隆 | 第33-35页 |
| ·ldhA基因片段与pMD19-T载体连接、转化与筛选 | 第35-37页 |
| ·Cm~r氯霉素抗性基因的克隆与纯化 | 第37-39页 |
| ·Cm~r基因片段与pMD19-T载体连接、转化与筛选 | 第39-40页 |
| ·同源重组片段ldhA1-Cm~r-ldhA2的制备 | 第40-41页 |
| ·K. pneumonia2-1△ldhA菌的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·7 K. pneumonia2-1△ldhA菌的构建与鉴定 | 第42-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第3章 克雷伯氏菌乙醛脱氢酶基因缺失菌的构建 | 第46-62页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| ·生化试剂 | 第46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46-47页 |
| ·常用培养基及配制方法 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-52页 |
| ·克雷伯氏菌乙醛脱氢酶基因的克隆 | 第47-50页 |
| ·同源重组片段aldH1-Cm~r-aldH2的制备 | 第50-51页 |
| ·aldH基因的敲除 | 第51-52页 |
| ·实验结果与讨论 | 第52-59页 |
| ·克雷伯氏菌乙醛脱氢酶基因的克隆与纯化 | 第52-53页 |
| ·aldH基因与T载体连接、转化和重组子的筛选、鉴定 | 第53-56页 |
| ·同源重组片段aldH1-Cm~r-aldH2的制备 | 第56-57页 |
| ·K. pneumonia2-1△aldH菌株的构建与鉴定 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第59-62页 |
| 第4章 克雷伯氏菌重组菌发酵特性的初步研究 | 第62-74页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·实验材料与仪器 | 第62-64页 |
| ·实验仪器 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62-63页 |
| ·菌株 | 第63页 |
| ·培养基 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64页 |
| ·种子培养方法 | 第64页 |
| ·发酵方法 | 第64页 |
| ·分析方法 | 第64-67页 |
| ·生物量测定方法 | 第64页 |
| ·1,3-丙二醇和乙醇测定方法 | 第64-66页 |
| ·乳酸的测定方法 | 第66页 |
| ·甘油测定方法 | 第66-67页 |
| ·计算方法 | 第67页 |
| ·实验结果与讨论 | 第67-71页 |
| ·K. pneumonia2-1△ldhA菌株的生长特性 | 第67页 |
| ·ldhA基因的敲除对1,3-PD的影响 | 第67-68页 |
| ·ldhA基因的敲除对乳酸产量的影响 | 第68-69页 |
| ·K. pneumonia2-1△aldH菌株的生长特性 | 第69-70页 |
| ·aldH基因的敲除对1,3-PD的影响 | 第70页 |
| ·aldH基因的敲除对乳酸产量的影响 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-74页 |
| 第5章 结论与展望 | 第74-76页 |
| ·结论 | 第74页 |
| ·展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 硕士期间发表论文 | 第84页 |
