| 摘要 | 第1-7页 |
| Summary | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·传染性造血器官坏死病概况 | 第9-14页 |
| ·IHNV 的发现、分布及危害 | 第9页 |
| ·IHNV 的病原学特征 | 第9-11页 |
| ·IHNV 基因组特征 | 第11页 |
| ·IHNV 疾病表现 | 第11-12页 |
| ·鱼弹状病毒的先天免疫反应 | 第12-13页 |
| ·鱼弹状病毒体液免疫反应 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒表达系统研究进展 | 第14-17页 |
| ·杆状病毒表达系统简介 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒表达系统特点 | 第15-16页 |
| ·宿主昆虫细胞培养条件 | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达影响因素 | 第17页 |
| ·目的意义和研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 IHNV 的纯化及抗血清制备 | 第19-27页 |
| 1 材料与方法 | 第19-23页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第19页 |
| ·试剂与培养液 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-23页 |
| ·细胞和病毒的体外培养 | 第20页 |
| ·RT-PCR 及扩增产物检测 | 第20-21页 |
| ·病毒滴度(TCID50)测定 | 第21-22页 |
| ·病毒生长曲线的测定 | 第22页 |
| ·病毒的超离和纯化 | 第22页 |
| ·抗 IHNV 鼠血清的制备 | 第22页 |
| ·抗 IHNV 病毒血清效价的测定 | 第22-23页 |
| 2 结果 | 第23-25页 |
| ·IHNV 的增殖及纯化 | 第23页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第23-24页 |
| ·病毒生长曲线测定 | 第24页 |
| ·小鼠抗 IHNV 血清效价的测定 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-26页 |
| 4 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 IHNV 核蛋白(N)表达、纯化和抗体制备 | 第27-48页 |
| 1 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·材料 | 第27-31页 |
| ·载体与菌株 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·Sf9 细胞培养相关试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂 | 第29页 |
| ·免疫荧光检测(IFA)试剂 | 第29页 |
| ·免疫印迹试验(Western-blot)试剂 | 第29-30页 |
| ·蛋白纯化试验试剂 | 第30页 |
| ·主要器材 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-41页 |
| ·pMD-N 质粒构建 | 第31-34页 |
| ·杆状病毒表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·pFB-N-BAC 的构建 | 第36-38页 |
| ·重组病毒的获得 | 第38-39页 |
| ·蛋白的表达纯化与检测 | 第39-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·引物扩增结果 | 第41页 |
| ·pFB-N-BAC 阳性克隆鉴定 | 第41-42页 |
| ·IFA 鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·Western-blot 鉴定结果 | 第43页 |
| ·N 蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第44页 |
| ·IHNV N 蛋白抗血清与全病毒反应 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| ·成功构建 N 蛋白杆状病毒表达载体 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第46-47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 第四章 IHNV G 基因杆状病毒表达系统载体的构建及表达鉴定 | 第48-65页 |
| 1 材料与方法 | 第48-58页 |
| ·材料 | 第48-51页 |
| ·载体与菌株 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·Sf9 细胞培养相关试剂 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49-50页 |
| ·免疫荧光检测(IFA)试剂 | 第50页 |
| ·免疫印迹试验(Western-blot)试剂 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-58页 |
| ·IHNV G 基因克隆 | 第51-53页 |
| ·杆状病毒表达载体的构建 | 第53-55页 |
| ·pFB-G-BAC 的构建 | 第55-57页 |
| ·重组病毒的获得 | 第57页 |
| ·蛋白的表达与检测 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| ·引物扩增结果 | 第58-59页 |
| ·pFB-G -BAC 阳性克隆鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白的生物学鉴定 | 第60-62页 |
| ·IFA 鉴定结果 | 第60-61页 |
| ·Western-blot 鉴定结果 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| ·Sf9 细胞的转染 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第63-64页 |
| 4 小结 | 第64-65页 |
| 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简介 | 第73-74页 |
| 导师简介 | 第74-75页 |