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脐橙光泽型突变体蜡质合成相关基因CsCUT1和CsFATB转化拟南芥的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
缩略词表第7-8页
第一章 文献综述第8-15页
     ·植物转基因技术研究概述第8-10页
     ·物理方法第8页
     ·化学方法第8-9页
     ·生物学方法第9-10页
     ·柑橘遗传转化研究概况第10-11页
     ·植物蜡质相关基因遗传转化研究进展第11-12页
     ·蜡质运输相关基因第11页
     ·编码代谢酶基因和调控基因第11-12页
     ·植物蜡质基因CUT1和FATB研究简介第12-14页
     ·植物FATB基因研究进展第12-13页
     ·植物CUT1基因研究进展第13-14页
   ·本研究的目的意义第14-15页
第二章 CsCUT1超表达载体构建及根癌农杆菌介导拟南芥遗传转化第15-32页
   ·材料第15页
     ·实验材料及菌株质粒载体第15页
     ·酶与试剂盒第15页
   ·实验方法第15-23页
       ·脐橙叶片RNA的提取第15-16页
     ·第一链cDNA合成第16页
     ·CsCUT1序列PCR扩增第16-17页
     ·PCR产物的回收、纯化第17页
     ·目的片段与载体的连接第17页
     ·CaCl_2大肠杆菌感受态的制备第17页
     ·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选第17-18页
     ·质粒DNA的提取第18-19页
     ·酶切、连接第19-20页
     ·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选第20页
     ·CaCl_2法制备根癌农杆菌感受态第20-21页
     ·工程菌的制备第21页
     ·农杆菌浸花法转化拟南芥第21-22页
     ·拟南芥转化植株的鉴定与分析第22-23页
   ·结果与分析第23-29页
     ·引入酶切位点的变异和母本CsCUT1基因片段的克隆第23页
     ·两种CsCUT1超表达载体构建第23-24页
     ·CsCUT1工程菌获得第24-25页
     ·T1代转基因拟南芥目的基因PCR检测第25-26页
     ·T2代转基因拟南芥表型分析第26-29页
   ·讨论第29-32页
     ·拟南芥的栽培种植第29页
     ·CsCUT1超表达载体构建第29页
     ·CsCUT1转化拟南芥第29-32页
第三章 CsFATB超表达载体构建及根癌农杆菌介导拟南芥遗传转化第32-41页
   ·材料第32页
   ·实验方法第32-35页
     ·脐橙叶片RNA的提取第32页
     ·第一链cDNA合成第32页
     ·CsFATB序列PCR扩增第32页
     ·PCR产物的回收、纯化第32页
     ·目的片段与载体的连接第32-33页
     ·大肠杆菌感受态的制备第33页
     ·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选第33页
     ·质粒DNA的提取第33页
     ·酶切、连接第33-34页
     ·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选第34页
     ·根癌农杆菌感受态的制备第34页
     ·工程菌的制备第34页
     ·农杆菌浸花法转化拟南芥第34-35页
     ·拟南芥转化植株的鉴定与分析第35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·CsFATB超表达载体构建及工程菌的获得第35-37页
     ·T1代转基因拟南芥目的基因PCR检测第37页
     ·T2代转基因拟南芥表型分析第37-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 展望第41-42页
参考文献第42-49页
在读期间发表的论文第49-50页
致谢第50页

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