摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-15页 |
·植物转基因技术研究概述 | 第8-10页 |
·物理方法 | 第8页 |
·化学方法 | 第8-9页 |
·生物学方法 | 第9-10页 |
·柑橘遗传转化研究概况 | 第10-11页 |
·植物蜡质相关基因遗传转化研究进展 | 第11-12页 |
·蜡质运输相关基因 | 第11页 |
·编码代谢酶基因和调控基因 | 第11-12页 |
·植物蜡质基因CUT1和FATB研究简介 | 第12-14页 |
·植物FATB基因研究进展 | 第12-13页 |
·植物CUT1基因研究进展 | 第13-14页 |
·本研究的目的意义 | 第14-15页 |
第二章 CsCUT1超表达载体构建及根癌农杆菌介导拟南芥遗传转化 | 第15-32页 |
·材料 | 第15页 |
·实验材料及菌株质粒载体 | 第15页 |
·酶与试剂盒 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-23页 |
·脐橙叶片RNA的提取 | 第15-16页 |
·第一链cDNA合成 | 第16页 |
·CsCUT1序列PCR扩增 | 第16-17页 |
·PCR产物的回收、纯化 | 第17页 |
·目的片段与载体的连接 | 第17页 |
·CaCl_2大肠杆菌感受态的制备 | 第17页 |
·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选 | 第17-18页 |
·质粒DNA的提取 | 第18-19页 |
·酶切、连接 | 第19-20页 |
·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选 | 第20页 |
·CaCl_2法制备根癌农杆菌感受态 | 第20-21页 |
·工程菌的制备 | 第21页 |
·农杆菌浸花法转化拟南芥 | 第21-22页 |
·拟南芥转化植株的鉴定与分析 | 第22-23页 |
·结果与分析 | 第23-29页 |
·引入酶切位点的变异和母本CsCUT1基因片段的克隆 | 第23页 |
·两种CsCUT1超表达载体构建 | 第23-24页 |
·CsCUT1工程菌获得 | 第24-25页 |
·T1代转基因拟南芥目的基因PCR检测 | 第25-26页 |
·T2代转基因拟南芥表型分析 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-32页 |
·拟南芥的栽培种植 | 第29页 |
·CsCUT1超表达载体构建 | 第29页 |
·CsCUT1转化拟南芥 | 第29-32页 |
第三章 CsFATB超表达载体构建及根癌农杆菌介导拟南芥遗传转化 | 第32-41页 |
·材料 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-35页 |
·脐橙叶片RNA的提取 | 第32页 |
·第一链cDNA合成 | 第32页 |
·CsFATB序列PCR扩增 | 第32页 |
·PCR产物的回收、纯化 | 第32页 |
·目的片段与载体的连接 | 第32-33页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第33页 |
·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选 | 第33页 |
·质粒DNA的提取 | 第33页 |
·酶切、连接 | 第33-34页 |
·连接产物的转化及重组质粒的蓝白斑筛选 | 第34页 |
·根癌农杆菌感受态的制备 | 第34页 |
·工程菌的制备 | 第34页 |
·农杆菌浸花法转化拟南芥 | 第34-35页 |
·拟南芥转化植株的鉴定与分析 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·CsFATB超表达载体构建及工程菌的获得 | 第35-37页 |
·T1代转基因拟南芥目的基因PCR检测 | 第37页 |
·T2代转基因拟南芥表型分析 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第四章 展望 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
在读期间发表的论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |