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Zymomonas mobilis硫酸盐还原途径突变菌株的构建及其产H2S与产醇评价

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 文献综述第10-33页
   ·微生物 H_2S 代谢研究第10-15页
     ·微生物硫代谢的重要性第10页
     ·微生物产 H_2S 的研究第10-15页
   ·Z. mobilis 同化硫酸盐还原途径产 H_2S 研究第15-19页
     ·Z. mobilis 生物特性简介第15页
     ·Z. mobilis 同化硫酸盐还原途径产 H_2S 的研究第15-19页
   ·Z. mobilis 中的基因操作研究第19-26页
     ·电转化方法研究第19-20页
     ·基因重组方法研究第20-26页
   ·Z. mobilis 的产醇研究第26-31页
     ·葡萄糖为碳源的产醇研究第26-28页
     ·果糖为碳源的产醇研究第28-29页
     ·蔗糖为碳源的产醇研究第29-30页
     ·甜高粱为原料的产醇研究第30-31页
   ·本课题的研究目的、内容和技术路线第31-33页
     ·研究目的第31页
     ·研究内容第31-32页
     ·技术路线第32-33页
第二章 实验材料与方法第33-46页
   ·实验材料第33-37页
     ·菌株与质粒第33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·培养基的配制第35页
     ·溶液的配制第35-37页
     ·PCR 反应引物第37页
   ·实验方法第37-46页
     ·菌株的培养第37-38页
     ·E. coli 中质粒的小量提取(SDS-碱裂解法)第38-39页
     ·Z. mobilis 基因组的快速提取第39页
     ·PCR 反应第39-40页
     ·末端处理产生 A/T 端第40页
     ·酶切反应第40页
     ·电泳分析第40页
     ·目的条带的回收第40-41页
     ·平末端片段的脱磷处理第41页
     ·连接反应第41页
     ·感受态细胞的制备与转化第41-43页
     ·Z. mobilis 转化子的鉴定第43页
     ·Z. mobilis ZM4 突变菌株的生长曲线测定第43页
     ·Z. mobilis ZM4 突变菌株的乙醇发酵评价第43-44页
     ·Z. mobilis ZM4 突变菌株乙醇发酵过程中产 H_2S 分析第44-45页
     ·Z. mobilis ZM4 突变菌株乙醇发酵过程中的 HPLC 分析第45-46页
第三章 实验结果与讨论第46-73页
   ·基因敲除整合质粒的构建第46-49页
     ·质粒 pBR328-cysND-cat 的构建第46-48页
     ·质粒 pBR328-cysIJ-cat 的构建第48-49页
   ·Z. mobilis 的电转化及突变菌株的构建与筛选第49-58页
     ·突变菌株 ZM4(cysND::FRT-cat-FRT)及 ZM4(cysND::FRT)的构建第50-54页
     ·突变菌株 ZM4(cysIJ::FRT-cat-FRT)及 ZM4(cysIJ::FRT)的构建与筛选第54-55页
     ·突变菌株 ZM4(cysND::FRT)(cysIJ::FRT-cat-FRT)及 ZM4(cysND::FRT-cat-FRT)(cysIJ::FRT)的构建与筛选第55-58页
   ·突变菌株在含 2%葡萄糖 RM 培养基上的生长初步评价第58-59页
   ·突变菌株在不同碳源培养基上产 H_2S 的初步检测第59-60页
   ·甜高粱汁培养基中的产 H_2S 及发酵产醇评价第60-68页
     ·10%甜高粱汁培养基中的产 H_2S 及发酵产醇情况第60-63页
     ·10%甜高粱汁中添加 SO_3~(2-)时的 H_2S 产生情况第63-64页
     ·发酵罐中甜高粱汁发酵时产生的挥发性硫化物及产醇分析第64-68页
   ·含葡萄糖的 RM 培养基中产 H_2S、生长及发酵产醇评价第68-70页
     ·含 10%葡萄糖的 RM 培养基中的 H_2S 产生情况第68-69页
     ·含 10%葡萄糖的 RM 培养基中的生长考察第69页
     ·含 10%葡萄糖的 RM 培养基中的发酵产醇情况第69-70页
   ·含蔗糖的 RM 培养基中的产 H_2S、生长及发酵产醇评价第70-73页
     ·含 15%蔗糖的 RM 培养基中的 H_2S 产生情况第70-71页
     ·含 15%蔗糖的 RM 培养基中的生长考察第71-72页
     ·含 15%蔗糖的 RM 培养基中的发酵产醇情况第72-73页
第四章 结论与展望第73-75页
   ·结论与主要创新点第73-74页
   ·展望第74-75页
参考文献第75-83页
发表论文与科研情况说明第83-84页
附录 本实验构建并用到的质粒图谱第84-87页
致谢第87页

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