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介导沉默INHA表达的转基因载体构建及阳性细胞的筛选鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词第11-13页
第一部分 文献综述第13-32页
 1 转座子的研究进展第13-25页
   ·SB转座子第15-17页
     ·SB转座子重建第15-16页
     ·SB转座子的结构及转座机制第16-17页
     ·SB转座子在哺乳动物中的研究第17页
   ·Tol2转座子第17-18页
   ·P因子第18页
   ·Mos1转座子第18-19页
   ·PB转座子第19-25页
     ·PB转座子的结构第19-20页
     ·PB转座子的转座特点第20页
     ·PB转座子的转座机制第20-21页
     ·报告基因在PB转座子系统中的应用第21-22页
     ·PB转座子在哺乳动物中的研究第22-25页
 2 RNA干扰第25-29页
   ·RNAi的作用机制第25-27页
   ·RNAi的应用第27页
   ·Ago蛋白质第27-29页
 3 Cre/LoxP系统第29页
 4 水牛的研究进展第29-30页
 5 抑制素的功能及研究进展第30-31页
 6 本研究的目的和意义第31-32页
第二部分 介导沉默INHA表达的转基因载体构建及阳性细胞的筛选鉴定第32-57页
 1 前言第32-33页
 2 材料与方法第33-42页
   ·材料第33-36页
     ·质粒和感受态细胞第33-34页
     ·主要试剂第34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·主要溶液及相关缓冲液第35-36页
   ·方法第36-42页
     ·片段设计第36页
     ·沉默INHA的载体构建第36-38页
     ·转化到DH5α感受态细胞第38页
     ·水牛颗粒细胞的分离与培养第38-39页
     ·水牛胎儿成纤维细胞的培养第39页
     ·脂质体转染第39页
     ·GFP的检测第39页
     ·INHA的mRNA水平检测第39-40页
     ·水牛颗粒细胞内INHA相对表达量分析第40-41页
     ·水牛颗粒细胞中孕酮分泌量放免测定第41页
     ·转基因阳性细胞的筛选鉴定第41页
     ·统计分析第41-42页
 3 结果与分析第42-53页
   ·沉默INHA的瞬时表达载体的构建第42页
   ·沉默INHA的转基因载体的构建第42-44页
   ·载体转染效率分析第44-46页
     ·沉默INHA的瞬时载体转染颗粒细胞第44-45页
     ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞第45-46页
   ·siRNA片段的生物学效应的分析第46-49页
     ·沉默INHA的瞬时载体转染颗粒细胞后INHA表达量的检测第46页
     ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞后1NHA表达量的探讨第46-47页
     ·沉默1NHA的瞬时载体转染颗粒细胞后孕酮分泌量的分析第47-48页
     ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞后孕酮分泌量的探讨第48-49页
   ·转基因阳性细胞的筛选与初步鉴定第49-53页
     ·利用pHi5构建的转基因载体的阳性水牛颗粒细胞的筛选第49页
     ·利用pHi5构建的转基因载体的转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的筛选第49-51页
     ·利用pH1构建的转基因载体的转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的筛选第51-52页
     ·转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的初步鉴定第52-53页
 4 讨论第53-55页
   ·PB转座子应用于水牛转基因研究的优势第53-54页
   ·转基因阳性细胞的筛选与鉴定第54-55页
   ·siRNA片段干扰效果的讨论第55页
 5 进一步研究的内容第55-56页
 6. 小论第56-57页
参考文献第57-64页
硕士期间发表的文章或申请专利第64-65页
致谢第65页

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