| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-32页 |
| 1 转座子的研究进展 | 第13-25页 |
| ·SB转座子 | 第15-17页 |
| ·SB转座子重建 | 第15-16页 |
| ·SB转座子的结构及转座机制 | 第16-17页 |
| ·SB转座子在哺乳动物中的研究 | 第17页 |
| ·Tol2转座子 | 第17-18页 |
| ·P因子 | 第18页 |
| ·Mos1转座子 | 第18-19页 |
| ·PB转座子 | 第19-25页 |
| ·PB转座子的结构 | 第19-20页 |
| ·PB转座子的转座特点 | 第20页 |
| ·PB转座子的转座机制 | 第20-21页 |
| ·报告基因在PB转座子系统中的应用 | 第21-22页 |
| ·PB转座子在哺乳动物中的研究 | 第22-25页 |
| 2 RNA干扰 | 第25-29页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第25-27页 |
| ·RNAi的应用 | 第27页 |
| ·Ago蛋白质 | 第27-29页 |
| 3 Cre/LoxP系统 | 第29页 |
| 4 水牛的研究进展 | 第29-30页 |
| 5 抑制素的功能及研究进展 | 第30-31页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二部分 介导沉默INHA表达的转基因载体构建及阳性细胞的筛选鉴定 | 第32-57页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-42页 |
| ·材料 | 第33-36页 |
| ·质粒和感受态细胞 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·主要溶液及相关缓冲液 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| ·片段设计 | 第36页 |
| ·沉默INHA的载体构建 | 第36-38页 |
| ·转化到DH5α感受态细胞 | 第38页 |
| ·水牛颗粒细胞的分离与培养 | 第38-39页 |
| ·水牛胎儿成纤维细胞的培养 | 第39页 |
| ·脂质体转染 | 第39页 |
| ·GFP的检测 | 第39页 |
| ·INHA的mRNA水平检测 | 第39-40页 |
| ·水牛颗粒细胞内INHA相对表达量分析 | 第40-41页 |
| ·水牛颗粒细胞中孕酮分泌量放免测定 | 第41页 |
| ·转基因阳性细胞的筛选鉴定 | 第41页 |
| ·统计分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-53页 |
| ·沉默INHA的瞬时表达载体的构建 | 第42页 |
| ·沉默INHA的转基因载体的构建 | 第42-44页 |
| ·载体转染效率分析 | 第44-46页 |
| ·沉默INHA的瞬时载体转染颗粒细胞 | 第44-45页 |
| ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞 | 第45-46页 |
| ·siRNA片段的生物学效应的分析 | 第46-49页 |
| ·沉默INHA的瞬时载体转染颗粒细胞后INHA表达量的检测 | 第46页 |
| ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞后1NHA表达量的探讨 | 第46-47页 |
| ·沉默1NHA的瞬时载体转染颗粒细胞后孕酮分泌量的分析 | 第47-48页 |
| ·沉默INHA的转基因载体转染颗粒细胞后孕酮分泌量的探讨 | 第48-49页 |
| ·转基因阳性细胞的筛选与初步鉴定 | 第49-53页 |
| ·利用pHi5构建的转基因载体的阳性水牛颗粒细胞的筛选 | 第49页 |
| ·利用pHi5构建的转基因载体的转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的筛选 | 第49-51页 |
| ·利用pH1构建的转基因载体的转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的筛选 | 第51-52页 |
| ·转基因阳性水牛胎儿成纤维细胞的初步鉴定 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·PB转座子应用于水牛转基因研究的优势 | 第53-54页 |
| ·转基因阳性细胞的筛选与鉴定 | 第54-55页 |
| ·siRNA片段干扰效果的讨论 | 第55页 |
| 5 进一步研究的内容 | 第55-56页 |
| 6. 小论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 硕士期间发表的文章或申请专利 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
