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分子改造软化类芽孢杆菌环糊精糖基转移酶生产2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-15页
   ·AA-2G 概述第8-11页
     ·AA-2G 的理化性质第8页
     ·AA-2G 的优点及用途第8-9页
     ·AA-2G 的国内外的研究进展及市场需求第9页
     ·AA-2G 的合成方法第9-11页
   ·CGT 酶概述第11-13页
     ·CGT 酶的立体结构第11页
     ·CGT 酶的底物结合第11-12页
     ·CGT 酶催化合成 AA-2G 的机理第12-13页
     ·CGT 酶的国内外研究现状及存在问题第13页
   ·立题依据及意义第13-14页
   ·本论文的主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-25页
   ·材料第15-16页
     ·菌株和质粒第15页
     ·主要试剂第15页
     ·主要仪器第15页
     ·培养基第15-16页
   ·亚位点-3 处定点饱和突变提高 CGT 酶的底物麦芽糊精特异性第16-21页
     ·质粒 DNA 的提取第16页
     ·突变质粒的构建与转化第16-17页
     ·突变体的生产第17-18页
     ·突变体的纯化第18页
     ·SDS-PAGE 电泳第18页
     ·蛋白质浓度测定第18页
     ·AA-2G 的合成第18-19页
     ·AA-2G 的测定第19页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第19页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第19页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第19-20页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数测定第20页
     ·酶活测定第20页
     ·突变体的晶体结构模拟第20-21页
   ·亚位点+1 处定点突变提高 CGT 酶的底物麦芽糊精特异性第21-23页
     ·突变质粒的构建与转化第21-22页
     ·突变体的生产第22页
     ·突变体的纯化第22页
     ·SDS-PAGE 电泳第22页
     ·蛋白质浓度测定第22页
     ·AA-2G 的合成第22页
     ·AA-2G 的测定第22页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第22页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第22页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第22页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数测定第22页
     ·酶活测定第22-23页
     ·突变体的晶体结构模拟第23页
   ·亚位点-3 处与亚位点+1 处复合突变提高 CGT 酶的底物麦芽糊精特异性第23-25页
     ·突变质粒的构建与转化第23页
     ·突变体的生产第23页
     ·突变体的纯化第23页
     ·SDS-PAGE 电泳第23-24页
     ·蛋白质浓度测定第24页
     ·AA-2G 的合成第24页
     ·AA-2G 的测定第24页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第24页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第24页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第24页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数测定第24页
     ·酶活测定第24-25页
第三章 结果与讨论第25-44页
   ·亚位点-3 处定点饱和突变提高 CGT 酶的底物麦芽糊精特异性第25-34页
     ·突变质粒的构建与转化第25页
     ·突变体的生产与纯化第25-26页
     ·突变体的 AA-2G 合成第26-27页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第27页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第27-29页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第29-30页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数对比第30-31页
     ·野生型(突变型)CGT 酶的酶活对比第31-32页
     ·亚位点-3 处优势突变体的突变位点的分析第32-34页
   ·亚位点+1 处定点饱和突变提高 CGT 酶的底物麦芽糊精特异性第34-40页
     ·突变质粒的构建与转化第34页
     ·突变体的生产与纯化第34-35页
     ·突变体的 AA-2G 合成第35页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第35-36页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第36-37页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第37页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数对比第37-39页
     ·野生型(突变型)CGT 酶的酶活对比第39页
     ·亚位点+1 处优势突变体的突变位点分析第39-40页
   ·亚位点-3 处与亚位点+1 处复合突变提高 CGT 酶底物麦芽糊精特异性第40-44页
     ·突变体的构建与生产第40页
     ·突变体的 AA-2G 合成第40-41页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适温度及热稳定性第41页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的最适 pH 及 pH 稳定性第41-42页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的时间产量研究第42页
     ·突变体酶法合成 AA-2G 的动力学参数对比第42-43页
     ·野生型(突变型)CGT 酶的酶活对比第43-44页
主要结论与展望第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-50页
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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