蛋白质谷氨酰胺酶的发酵纯化及其应用的初步研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-22页 |
| ·脱酰胺作用的研究概况 | 第16-17页 |
| ·物理法脱酰胺 | 第16-17页 |
| ·化学法脱酰胺 | 第17页 |
| ·酶法脱酰胺 | 第17页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的研究情况 | 第17-19页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的发现 | 第18页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的结构和作用机理 | 第18-19页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的安全性 | 第19页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的应用 | 第19-20页 |
| ·米谷蛋白 | 第19-20页 |
| ·大豆蛋白 | 第20页 |
| ·小麦蛋白 | 第20页 |
| ·本文主要研究背景、意义及研究内容 | 第20-22页 |
| ·研究背景与意义 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 蛋白质谷氨酰胺酶生产菌株的筛选及发酵 | 第22-36页 |
| ·前言 | 第22-23页 |
| ·材料与方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·种子培养及生长曲线的测定 | 第24页 |
| ·NH_4Cl标准曲线 | 第24-25页 |
| ·酶活力的测定 | 第25-26页 |
| ·发酵培养 | 第26页 |
| ·高产蛋白质谷氨酰胺酶菌株的摇瓶筛选 | 第26页 |
| ·数据统计分析 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-34页 |
| ·种子生长曲线 | 第27-28页 |
| ·氨标准曲线 | 第28-30页 |
| ·试管 | 第28-29页 |
| ·96孔板 | 第29页 |
| ·两种方法的比较 | 第29-30页 |
| ·酶活-A630曲线 | 第30-32页 |
| ·试管 | 第30-31页 |
| ·96孔板 | 第31页 |
| ·两种方法的比较 | 第31-32页 |
| ·发酵生长曲线 | 第32-34页 |
| ·摇瓶发酵 | 第32-33页 |
| ·发酵罐发酵 | 第33-34页 |
| ·高产菌株的筛选 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 产蛋白质谷氨酰胺酶菌株发酵条件的影响 | 第36-46页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·摇瓶发酵条件对于菌株产酶的影响 | 第37-38页 |
| ·培养基成分对于菌株产酶的影响 | 第38页 |
| ·数据统计分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·发酵条件对于菌株产酶的影响 | 第39-42页 |
| ·温度 | 第39-40页 |
| ·摇床转速 | 第40-41页 |
| ·摇瓶装液量 | 第41-42页 |
| ·碳源和氮源对菌株产酶的影响 | 第42-44页 |
| ·碳源 | 第42-43页 |
| ·氮源 | 第43-44页 |
| ·最优条件下的发酵生长曲线 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 蛋白质谷氨酰胺酶的纯化 | 第46-63页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·超滤浓缩 | 第47页 |
| ·乙醇沉淀 | 第47-48页 |
| ·离子交换层析 | 第48页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第48页 |
| ·脱盐 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE | 第48-49页 |
| ·酶活力及蛋白含量的测定 | 第49页 |
| ·数据统计分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-60页 |
| ·超滤浓缩 | 第49-51页 |
| ·不同截留分子量的比较 | 第49-50页 |
| ·不同浓缩倍数的比较 | 第50-51页 |
| ·乙醇沉淀 | 第51-52页 |
| ·不同乙醇倍数的比较 | 第51-52页 |
| ·不同沉淀时间的比较 | 第52页 |
| ·酶的分离总结 | 第52-53页 |
| ·离子交换层析 | 第53-56页 |
| ·层析图谱 | 第53-54页 |
| ·SDS-PAGE | 第54-55页 |
| ·酶活力和蛋白含量测定 | 第55-56页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第56-58页 |
| ·层析图谱 | 第56-57页 |
| ·SDS-PAGE | 第57-58页 |
| ·酶活力和蛋白含量测定 | 第58页 |
| ·纯化总结 | 第58-60页 |
| ·纯化步骤总结 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第五章 蛋白质谷氨酰胺的性质及应用 | 第63-79页 |
| ·前言 | 第63页 |
| ·材料与方法 | 第63-67页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-67页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的性质 | 第64-65页 |
| ·蛋白质谷氨酰胺酶的应用 | 第65-66页 |
| ·数据统计分析 | 第66-67页 |
| ·结果分析 | 第67-77页 |
| ·pH对蛋白质谷氨酰胺酶的影响 | 第67-69页 |
| ·不同pH下酶的活性 | 第67-68页 |
| ·不同pH下酶的稳定性 | 第68-69页 |
| ·温度对蛋白质谷氨酰胺酶的影响 | 第69-71页 |
| ·不同温度下酶的活性 | 第69-70页 |
| ·不同温度下酶的稳定性 | 第70-71页 |
| ·金属离子和抑制剂对蛋白质谷氨酰胺酶的影响 | 第71-72页 |
| ·酶的动力学参数 | 第72-73页 |
| ·酶的底物特异性 | 第73-74页 |
| ·大豆分离蛋白应用实验 | 第74-77页 |
| ·脱酰胺度和水解度 | 第74-75页 |
| ·脱酰胺现象 | 第75-76页 |
| ·SDS-PAGE | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-79页 |
| 全文总结与展望 | 第79-82页 |
| 附录一 | 第82-83页 |
| 附录二 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
