摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-10页 |
第一章 引言 | 第10-17页 |
·疱疹病毒 | 第10-12页 |
·单纯疱疹病毒简介 | 第10-11页 |
·巨细胞病毒简介 | 第11页 |
·EB病毒简介 | 第11-12页 |
·组蛋白简介 | 第12-14页 |
·组蛋白H1简介 | 第12-13页 |
·组蛋白H1.2简介 | 第13-14页 |
·疱疹病毒抗凋亡研究进展 | 第14-16页 |
·LATs | 第14-15页 |
·Us3 | 第15页 |
·ICP27 | 第15页 |
·gJ | 第15页 |
·ICP22 | 第15页 |
·gD | 第15-16页 |
·ICP4 | 第16页 |
·本实验的研究意义及内容 | 第16-17页 |
·课题研究内容 | 第16页 |
·课题研究意义 | 第16-17页 |
第二章 疱疹疹病毒感染之后组蛋白H1.2的表达 | 第17-29页 |
引言 | 第17页 |
·实验材料 | 第17-20页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·主要试剂和耗材 | 第17-18页 |
·试剂配制 | 第18-20页 |
·实验方法 | 第20-26页 |
·细胞复苏 | 第20-21页 |
·细胞的培养 | 第21页 |
·疱疹病毒扩增 | 第21页 |
·病毒滴度的测定 | 第21-22页 |
·疱疹病毒感染BJ、MRC-5实验 | 第22页 |
·QIAGEN试剂盒提取RNA提取RNA | 第22-23页 |
·RNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
·RNA的反转录 | 第23-24页 |
·引物设计和合成 | 第24页 |
·SYBR Green Q-PCR反应 | 第24-25页 |
·组蛋白H1.2提取 | 第25页 |
·组蛋白H1.2 Western blot实验 | 第25-26页 |
·数据分析 | 第26页 |
·结果 | 第26-28页 |
·疱疹病毒感染细胞之后提取RNA的凝胶电泳 | 第26页 |
·疱疹病毒感染之后RT-qpcr定量分析 | 第26-27页 |
·蛋白印记 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
第三章 疱疹病毒感染对组蛋白H1.2定位的影响 | 第29-34页 |
引言 | 第29页 |
·材料 | 第29-30页 |
·主要仪器及设备 | 第29页 |
·所用的主要试剂和主要耗材 | 第29页 |
·细胞及药物 | 第29页 |
·试剂的配制 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-31页 |
·细胞复苏 | 第30页 |
·细胞培养 | 第30页 |
·疱疹病毒扩增 | 第30页 |
·病毒滴度的测定 | 第30页 |
·单纯疱疹病毒感染Hela细胞实验 | 第30页 |
·Etoposide处理细胞 | 第30页 |
·免疫荧光实验 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-32页 |
·单纯疱疹病毒感染Hela细胞 | 第31-32页 |
·Etoposide处Hela细胞 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第四章 疱疹病毒抗凋亡蛋白对H1.2表达量影响 | 第34-40页 |
引言 | 第34页 |
·材料 | 第34页 |
·主要仪器及设备 | 第34页 |
·试剂及耗材 | 第34页 |
·细胞及药物 | 第34页 |
·转染试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·细胞复苏 | 第34页 |
·细胞培养 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态制备 | 第34-35页 |
·单纯疱疹病毒抗凋亡基因质粒扩增 | 第35-37页 |
·Lipofectamine 2000单纯疱疹病毒抗凋亡基因质粒 | 第37页 |
·TRIzol试剂提取RNA | 第37页 |
·RNA反转录 | 第37页 |
·引物设计和合成 | 第37页 |
·SYBR Green Q-PCR反应 | 第37页 |
·组蛋白H1.2提取 | 第37-38页 |
·组蛋白H1.2 Western blot实验 | 第38页 |
·结果 | 第38-39页 |
·转染m-cherry质粒 | 第38页 |
·单纯疱疹病毒抗凋亡蛋白转染Hela细胞之后RT-qpcr定量分析 | 第38-39页 |
·单纯疱疹病毒抗凋亡蛋白转染Hela细胞蛋白印记实验 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
第五章 组蛋白H1.2的启动子的构建 | 第40-47页 |
引言 | 第40-41页 |
·材料 | 第41页 |
·主要仪器及设备 | 第41页 |
·试剂及耗材 | 第41页 |
·试剂的配制 | 第41页 |
·方法 | 第41-45页 |
·引物设计和合成 | 第41-42页 |
·BJ细胞基因组DNA提取 | 第42-43页 |
·1#序列基因pcr扩增 | 第43页 |
·2#和3#序列基因pcr扩增 | 第43-44页 |
·PCR产物胶回收 | 第44页 |
·质粒及胶回收产物双酶切 | 第44-45页 |
·双酶切质粒和片段的连接 | 第45页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化及质粒的提取 | 第45页 |
·结果 | 第45-46页 |
·1#、2#、3#序列的扩增 | 第45-46页 |
·质粒及胶回收产物双酶切 | 第46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第六章 总结 | 第47-48页 |
主要参考文献 | 第48-54页 |
附录:缩略词表 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |