| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 目录 | 第14-20页 |
| 主要缩略语 | 第20-22页 |
| 第一部分 肿瘤标志物筛查 | 第22-66页 |
| 第一章 前言 | 第22-27页 |
| 第一节 卵巢癌肿瘤标志物的研究现状 | 第22-23页 |
| ·肿瘤标志物的特点 | 第22-23页 |
| ·几种常见的卵巢癌肿瘤标志物 | 第23页 |
| 第二节 卵巢癌肿瘤标志物筛选方法 | 第23-24页 |
| 第三节 本课题研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第四节 本部分的结构安排 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-48页 |
| 第一节 细胞系、质粒与病例标本 | 第27页 |
| ·细胞株 | 第27页 |
| ·质粒 | 第27页 |
| ·病例标本 | 第27页 |
| 第二节 主要材料及试剂 | 第27-31页 |
| ·主要实验试剂 | 第27-28页 |
| ·主要缓冲液的配制 | 第28-31页 |
| 第三节 主要仪器 | 第31-32页 |
| 第四节 蛋白样本准备及 iTRAQ 标记 | 第32-34页 |
| ·蛋白的提取及定量 | 第32-33页 |
| ·蛋白的还原及酶解 | 第33-34页 |
| ·蛋白冻干及后处理 | 第34页 |
| 第五节 细胞培养 | 第34-36页 |
| ·细胞的复苏 | 第34-35页 |
| ·细胞传代 | 第35页 |
| ·细胞计数 | 第35-36页 |
| ·细胞冻存 | 第36页 |
| 第六节 病毒质粒的构建 | 第36-38页 |
| ·过表达 legumain 的病毒载体的构建 | 第36-37页 |
| ·沉默 S100A11 的病毒载体的构建 | 第37-38页 |
| 第七节 慢病毒的制备及感染 | 第38-40页 |
| ·慢病毒的制备 | 第38-39页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第39-40页 |
| ·病毒的感染及阳性筛选 | 第40页 |
| 第八节 Real-Time PCR | 第40-42页 |
| 第九节 免疫组化 | 第42-43页 |
| 第十节 Western Blot | 第43-46页 |
| ·蛋白提取 | 第43-44页 |
| ·蛋白定量——BCA定量 | 第44页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第44-45页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45页 |
| ·转膜 | 第45页 |
| ·孵育抗体 | 第45-46页 |
| ·曝光 | 第46页 |
| 第十一节 细胞迁移及浸润 | 第46-47页 |
| ·细胞迁移 | 第46-47页 |
| ·细胞浸润 | 第47页 |
| 第十二节 统计学分析 | 第47-48页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第48-60页 |
| 第一节 卵巢癌组织及正常组织中蛋白的定量表达 | 第48-50页 |
| ·卵巢癌组织及正常卵巢组织中差异蛋白的检测 | 第48-49页 |
| ·卵巢癌组织及正常卵巢组织中差异表达蛋白的分类分析 | 第49-50页 |
| 第二节 验证差异表达的蛋白 | 第50-54页 |
| ·mRNA 水平上验证 | 第50-51页 |
| ·蛋白水平上免疫组化验证 | 第51-53页 |
| ·蛋白水平上 Western blot 验证 | 第53-54页 |
| 第三节 Legumain 与卵巢癌 | 第54-58页 |
| ·Legumain 在蛋白水平上的表达 | 第54-55页 |
| ·Legumain 与卵巢癌的进展相关 | 第55-56页 |
| ·Legumain 促进了卵巢癌细胞的迁移和浸润 | 第56-58页 |
| 第四节 S100A11 与卵巢癌 | 第58-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-64页 |
| 第五章 主要结论 | 第64-66页 |
| 第一节 本课题主要结论 | 第64页 |
| 第二节 主要创新点 | 第64-65页 |
| 第三节 研究前景展望 | 第65-66页 |
| 第二部分 靶向脂质体在肿瘤治疗中的应用 | 第66-125页 |
| 第一章 前言 | 第66-84页 |
| 第一节 肝癌的研究现状 | 第66-69页 |
| ·肝细胞肝癌的化学疗法 | 第67页 |
| ·肝细胞肝癌的基因治疗 | 第67-68页 |
| ·肝细胞肝癌的其他治疗方法 | 第68-69页 |
| 第二节 肿瘤干细胞 | 第69-72页 |
| ·肿瘤干细胞的表面分子及鉴定 | 第70页 |
| ·肿瘤干细胞的分离 | 第70-71页 |
| ·肿瘤干细胞与化疗 | 第71页 |
| ·肝癌干细胞 | 第71-72页 |
| 第三节 脂质体纳米颗粒与肿瘤治疗 | 第72-76页 |
| ·普通脂质体 | 第72-73页 |
| ·长循环脂质体 | 第73页 |
| ·免疫脂质体 | 第73-75页 |
| ·配体介导的靶向脂质体 | 第75-76页 |
| 第四节 分子影像技术的应用 | 第76-80页 |
| ·分子影像之生物发光 | 第77-79页 |
| ·分子影像之荧光 | 第79页 |
| ·分子影像在肿瘤研究中的应用 | 第79-80页 |
| 第五节 本课题研究的内容和意义 | 第80-83页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第80-81页 |
| ·本课题研究的内容 | 第81-83页 |
| 第六节 本课题的结构安排 | 第83-84页 |
| 第二章 材料与方法 | 第84-97页 |
| 第一节 脂质体纳米颗粒的制备 | 第84-88页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·实验器材 | 第84-85页 |
| ·实验方法 | 第85-88页 |
| 第二节 流式细胞术检测 CD44 的表达 | 第88页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88页 |
| 第三节 罗丹明脂质体的体外靶向分析 | 第88-89页 |
| ·实验材料 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-89页 |
| 第四节 NOD/SCID 小鼠肝癌异种移植模型的建立 | 第89-90页 |
| ·实验材料 | 第89页 |
| ·实验方法 | 第89-90页 |
| 第五节 生物发光成像 | 第90-91页 |
| ·实验仪器及材料 | 第90页 |
| ·实验方法 | 第90-91页 |
| 第六节 Dox 的体内分布分析 | 第91-92页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-92页 |
| 第七节 免疫荧光 | 第92-94页 |
| ·实验材料 | 第92页 |
| ·缓冲液及配制 | 第92-93页 |
| ·实验方法 | 第93-94页 |
| 第八节 原位末端凋亡检测 | 第94-97页 |
| ·实验材料 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-97页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第97-115页 |
| 第一节 双报告基因标记 | 第97-99页 |
| ·报告基因标记及 eGFP 鉴定 | 第97-98页 |
| ·报告基因标记及体外 Fluc 成像鉴定 | 第98-99页 |
| 第二节 HepG2 细胞表面分子 CD44 的表达 | 第99-100页 |
| 第三节 靶向脂质体的制备及特征分析 | 第100-102页 |
| 第四节 体外分析靶向质体纳米颗粒的靶向性 | 第102-103页 |
| 第五节 体内分析靶向质体纳米颗粒的靶向性 | 第103-110页 |
| ·动物实验方案及分子影像分析 | 第103-104页 |
| ·生物发光分析携带 TF 的靶向脂质体纳米颗粒的靶向性 | 第104-106页 |
| ·免疫荧光分析携带 TF 的靶向脂质体纳米颗粒的靶向性 | 第106-108页 |
| ·携带 Dox 的靶向脂质体纳米颗粒的靶向性及药物释放 | 第108-110页 |
| 第六节 靶向质体纳米颗粒对肝细胞肝癌的治疗效果 | 第110-112页 |
| 第七节 靶向脂质体纳米颗粒对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第112-115页 |
| 第四章 讨论 | 第115-122页 |
| 第五章 主要结论 | 第122-125页 |
| 第一节 本课题主要结论 | 第122页 |
| 第二节 主要创新点 | 第122-123页 |
| 第三节 研究前景展望 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 附录 | 第139-151页 |
| 个人简历 | 第151-152页 |
| 发表论文 | 第152-154页 |
