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玉米低磷应答转录因子ZmPHR1的克隆及功能分析

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
第一章 引言第15-29页
   ·磷在植物中的重要性及其存在形态第15页
   ·土壤磷的状况及磷肥施用存在的问题第15-16页
   ·植物对低磷的应答机制第16-19页
     ·根构型的变化第16-17页
     ·有机酸的分泌及根际pH值的变化第17页
     ·酸性磷酸酶活性的变化第17-18页
     ·核糖核酸酶活性的变化第18页
     ·磷转运蛋白的表达及分类第18-19页
     ·膜脂过氧化和保护酶系统变化第19页
   ·缺磷响应基因的研究进展第19-22页
     ·缺磷响应基因的时空表达谱研究第19-20页
     ·磷响应功能基因的研究第20-21页
     ·植物磷饥饿响应转录因子的研究第21-22页
   ·PHR1缺磷调控基因的研究进展第22-26页
     ·模式植物拟南芥AtPHR1的研究第22-25页
     ·作物中PHR1研究第25-26页
   ·本论文的立题依据和研究内容第26-29页
     ·立题依据第26页
     ·研究内容及技术路线第26-29页
第二章 玉米磷高效利用基因型的筛选第29-41页
   ·材料与方法第29-32页
     ·材料第29页
     ·低磷处理第29-30页
     ·营养液成分第30页
     ·生理生化指标测定第30-32页
     ·不同磷利用效率基因型的评价方法第32页
   ·结果与分析第32-39页
     ·低磷处理对不同自交系的生物量和磷积累量的影响第32-34页
     ·低磷处理对不同基因型玉米不同指标相对值的影响第34-35页
     ·不同磷利用效率基因型的初步筛选第35-37页
     ·低磷处理对玉米叶片MDA活性的影响第37页
     ·低磷处理对玉米叶片SOD活性的影响第37-38页
     ·低磷处理对玉米叶片POD活性的影响第38-39页
   ·结论与讨论第39-41页
     ·磷高效玉米材料筛选时期、筛选方法和筛选指标的确定第39页
     ·磷高效玉米材料的抗性生理生化特性第39-40页
     ·结论第40-41页
第三章 玉米低磷胁迫转录因子ZmPHR1的克隆及序列分析第41-53页
   ·材料与方法第41-46页
     ·材料的培养及取材第41页
     ·玉米叶片总RNA的提取和cDNA第一链的合成第41-42页
     ·基因cDNA全长的获得第42-44页
     ·克隆载体转化细菌第44-45页
     ·生物信息学分析第45-46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·ZmPHR1基因cDNA的获得及序列分析第46-49页
     ·ZmPHR1基因的系统进化树分析第49-50页
     ·ZmPHR1编码区基因结构分析第50-51页
   ·结论与讨论第51-53页
第四章 ZmPHR1基因的亚细胞定位及表达模式分析第53-63页
   ·基因的亚细胞定位第53-59页
     ·材料与方法第53-55页
     ·结果与分析第55-59页
   ·ZmPHR1基因的时空表达分析第59-61页
     ·材料与方法第59-60页
     ·结果与分析第60-61页
   ·结论和讨论第61-63页
     ·ZmPHR1基因是一个MYB-CC转录因子第61页
     ·ZmPHR1基因的表达存在正负反馈调节第61-63页
第五章 ZmPHR1的拟南芥遗传转化及过量表达株系的获得第63-73页
   ·材料与方法第63-66页
     ·ZmPHR1过量表达载体的构建第63页
     ·农杆菌转化第63-64页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第64-65页
     ·ZmPHR1转基因过量表达株系的鉴定第65-66页
   ·结果与分析第66-71页
     ·ZmPHR1植物过量表达载体的构建第66-68页
     ·抗性转基因植株纯系的获得第68-70页
     ·ZmPHR1转基因抗性株系的DNA-PCR和RT-PCR检测第70页
     ·ZmPHR1转基因株系的GFP检测第70-71页
   ·结论和讨论第71-73页
     ·活体检测GFP融合蛋白是快速鉴定植物转化子的有效方法第71-72页
     ·PHR1基因功能研究的策略第72-73页
第六章 ZmPHR1过量表达株系的表型分析及其对下游靶向基因的表达调控第73-84页
   ·材料与方法第73-77页
     ·不同磷水平营养液培养及取材第73-74页
     ·植物无机磷含量测定第74-76页
     ·全磷含量测定第76页
     ·下游磷响应基因表达的定量PCR检测第76-77页
   ·结果与分析第77-82页
     ·过量表达ZmPHR1对植株生长的影响第77-79页
     ·过量表达ZmPHR1对无机磷含量的影响第79-80页
     ·过量表达ZmPHR1对磷饥饿响应基因的影响第80-81页
     ·过量表达ZmPHR1对磷转运蛋白的影响第81-82页
   ·讨论第82-84页
     ·过量表达ZmPHR1改善了拟南芥植株的生长和提高了有效磷含量第82页
     ·过量表达ZmPHR1上调了拟南芥磷饥饿响应基因的表达第82页
     ·过量表达ZmPHR1上调了拟南芥磷转运蛋白基因的表达第82-84页
第七章 结论第84-85页
参考文献第85-100页
攻读学位期间取得的研究成果第100-101页
致谢第101-102页
个人简况第102-104页

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