| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| ·前列腺癌发生发展过程以及研究现状 | 第12-14页 |
| ·前列腺癌的发生发展过程及特点 | 第12-13页 |
| ·我国前列腺癌现状 | 第13-14页 |
| ·前列腺癌动物模型的研究现状 | 第14-16页 |
| ·前列腺癌动物模型的特点 | 第14页 |
| ·前列腺癌动物模型的类型 | 第14-16页 |
| ·转录因子 Yin Yang 1（YY1）与肿瘤的发生发展与侵袭转移关系密切 | 第16-18页 |
| ·yy1 基因与 YY1 蛋白 | 第16-17页 |
| ·YY1 与肿瘤之间的关联性 | 第17-18页 |
| ·YY1 与前列腺癌的关系 | 第18页 |
| ·条件性表达系统 | 第18-20页 |
| ·Cre-LoxP 重组酶系统 | 第18-20页 |
| ·Tet-on/ Off 系统 | 第20页 |
| ·研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| ·实验技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·实验主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验主要材料 | 第24页 |
| ·实验试剂 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·目的片段的扩增 | 第26-28页 |
| ·质粒与目的片段的酶切 | 第28页 |
| ·目的片段 PCR 产物与质粒酶切产物的纯化 | 第28-29页 |
| ·目的片段与质粒载体酶切后的连接 | 第29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29-30页 |
| ·菌落 PCR 的验证 | 第30页 |
| ·质粒提取 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·hela 细胞培养 | 第31-32页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第32页 |
| ·Western Blot | 第32-33页 |
| ·Fluc 荧光素酶活性检测 | 第33页 |
| ·EGFP 的荧光观察 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-47页 |
| ·pSL4-Linker7 的构建和酶切鉴定 | 第34-36页 |
| ·工具质粒 pSL4-Puro 的 NsiI/ClaI 的双酶切结果 | 第34-35页 |
| ·pSL4-Linker7 单酶切（SphⅠ）鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·pSL4 –P2A 的构建与酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·p2a 的扩增结果 | 第36-37页 |
| ·pSL4-P2A 的酶切鉴定图 | 第37页 |
| ·pSL4-Fluc 的构建与酶切鉴定 | 第37-39页 |
| ·fluc 的扩增 | 第38页 |
| ·pSL4-Fluc 的酶切鉴定图 | 第38-39页 |
| ·重组质粒 pSL4-Fluc-EGFP 构建与鉴定 | 第39-40页 |
| ·egfp 的扩增 | 第39-40页 |
| ·pSL4-Fluc-EGFP 的酶切鉴定图 | 第40页 |
| ·pSL4-LoxP-Fluc-EGFP 的酶切与鉴定 | 第40-42页 |
| ·Loxp + 3stop + SV40 Poly A 的扩增 | 第41页 |
| ·pSL4-LoxP-Fluc-EGFP 的酶切鉴定图 | 第41-42页 |
| ·pSL4-Loxp-YY1-Fluc-EGFP 的构建与鉴定 | 第42-43页 |
| ·yy1 的扩增 | 第42-43页 |
| ·pSL4-Loxp-YY1-Fluc-EGFP 的酶切鉴定图 | 第43页 |
| ·pcDNA3-Cre 的构建与鉴定 | 第43-45页 |
| ·Cre 的扩增 | 第44页 |
| ·pcDNA3-Cre 的酶切鉴定图 | 第44-45页 |
| ·表达检测 | 第45-47页 |
| ·pSL4-Loxp-YY1-Fluc-EGFP 与 pcDNA3-Cre 共转染后 YY1 表达的 Western Blot 检测 | 第45页 |
| ·Fluc 荧光素酶活性检测 | 第45-46页 |
| ·EGFP 荧光观察 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 缩略语简表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
