摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-25页 |
1 鸭疫里氏杆菌病的研究进展 | 第10-19页 |
·病原学研究进展 | 第10-14页 |
·RA的分类与形态结构 | 第10-11页 |
·RA的生长及生化特征 | 第11-12页 |
·RA的血清型 | 第12-13页 |
·RA的分子生物学研究概况 | 第13-14页 |
·临床病理学 | 第14-16页 |
·临床剖检症状 | 第14-15页 |
·组织病理学 | 第15-16页 |
·实验室诊断研究进展 | 第16-17页 |
·细菌的分离与鉴定 | 第16页 |
·凝集试验与琼脂凝胶免疫扩散试验 | 第16页 |
·荧光抗体法 | 第16页 |
·间接ELISA检测 | 第16-17页 |
·PCR检测 | 第17页 |
·间接血凝试验 | 第17页 |
·间接免疫酶组织化学法 | 第17页 |
·预防与治疗 | 第17-19页 |
·药物防治 | 第18页 |
·疫苗防治 | 第18-19页 |
2 差异表达基因克隆研究进展 | 第19-25页 |
·差异表达基因克隆现状 | 第19页 |
·抑制行消减杂交技术的原理与方法 | 第19-22页 |
·抑制行消减杂交技术的优点 | 第22-25页 |
第二章 鸭感染鸭疫里氏杆菌肝脏差异基因的筛选与鉴定 | 第25-56页 |
1 研究的目的与意义 | 第25页 |
2 试验材料 | 第25-29页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要溶液的配制 | 第26-27页 |
·抗生素类 | 第26页 |
·细菌培养基 | 第26页 |
·质粒抽提相关溶液 | 第26-27页 |
·感染菌株与试验动物 | 第27页 |
·引物 | 第27-29页 |
3 试验方法 | 第29-42页 |
·试验鸭人工感染RA与病料的采集 | 第29页 |
·组织总RNA的提取 | 第29-30页 |
·mRNA的分离 | 第30页 |
·差减cDNA文库的构建 | 第30-37页 |
·Driver和Tester cDNA的制备 | 第31-34页 |
·差减杂交 | 第34页 |
·PCR扩增 | 第34-35页 |
·Tester cDNA的接头连接效率的检测 | 第35-36页 |
·差减文库的差减效率的检测 | 第36页 |
·差减cDNA质粒文库的构建 | 第36-37页 |
·差减cDNA克隆的筛选 | 第37-42页 |
·PCR筛选 | 第37-38页 |
·斑点杂交筛选 | 第38-40页 |
·阳性克隆cDNA片段测序及序列分析 | 第40页 |
·Real-time RT-PCR检验差异表达基因 | 第40-42页 |
4 结果与分析 | 第42-50页 |
·鸭肝脏总RNA提取 | 第42页 |
·鸭肝脏mRNA的分离 | 第42-43页 |
·Driver cDNA和Tester cDNA的制备 | 第43-44页 |
·差减cDNA文库接头效率检测 | 第44-45页 |
·鸭感染RA肝脏差异表达基因差减cDNA文库的构建 | 第45-46页 |
·差减cDNA文库的差减效率检测 | 第46-47页 |
·差减cDNA克隆的筛选 | 第47-50页 |
·PCR筛选 | 第47页 |
·斑点杂交筛选 | 第47-48页 |
·阳性克隆cDNA片段测序及序列分析 | 第48-50页 |
·通过Real-time PCR对鸭感染RA肝脏差异表达基因的验证 | 第50页 |
5 讨论 | 第50-55页 |
·急性期反应 | 第51-52页 |
·炎症和免疫反应 | 第52-53页 |
·损伤修复 | 第53-55页 |
6 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61页 |