中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
·GABA 及其受体的概述 | 第9-13页 |
·哺乳动物 GABA 受体 | 第9-12页 |
·昆虫 GABA 受体 | 第12-13页 |
·果蝇 GABA 受体亚基的分子生物学 | 第13-18页 |
·Rdl 编码的亚基与昆虫 GABA 受体的特征药理学 | 第14-15页 |
·Rdl 基因的可变剪接 | 第15页 |
·RDL 作为天然昆虫 GABA 受体的模型 | 第15-18页 |
·GABAA 受体相关农药研究进展 | 第18页 |
·不同的表达体系 | 第18-27页 |
·原核体系 | 第19-22页 |
·酵母表达系统 | 第22-24页 |
·昆虫细胞表达系统 | 第24-25页 |
·哺乳动物细胞表达系统 | 第25-26页 |
·总结 | 第26-27页 |
·本论文研究内容目的及意义 | 第27-29页 |
·本论文的研究目的及意义 | 第27页 |
·研究内容 | 第27-29页 |
第二章 果蝇 GABA 受体 RDL 全长,截去部分胞外区的表达及鉴定 | 第29-65页 |
·实验材料及设备 | 第29-32页 |
·质粒和菌株 | 第29-30页 |
·工具酶及主要的试剂 | 第30-31页 |
·其他试剂及配制 | 第31-32页 |
·实验仪器及设备 | 第32页 |
·载体构建示意图 | 第32-34页 |
·实验方法 | 第34-42页 |
·DH5 感受态的制备 | 第34页 |
·质粒的小量抽提 | 第34-35页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第35-36页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第36页 |
·BL21(DE3)感受态的制备 | 第36页 |
·转化 | 第36页 |
·单酶切 | 第36页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
·SDS-PAGE 鉴定 | 第37-38页 |
·目的蛋白的获得(收集包涵体和上清) | 第38页 |
·镍柱纯化蛋白(上清和沉淀) | 第38-39页 |
·分离的蛋白的鉴定(SDS-PAGE 胶) | 第39页 |
·镍柱的复性 | 第39-40页 |
·蛋白的纯化(去盐) | 第40页 |
·western blot 鉴定 | 第40-41页 |
·Brandford 法测定重组蛋白浓度 | 第41-42页 |
·结果与讨论 | 第42-61页 |
·RDL 合成序列及测序 | 第42-51页 |
·抽质粒及其单,双酶切鉴定 | 第51页 |
·全长重组质粒的测序结果 | 第51-54页 |
·全长重组质粒的单,双酶切鉴定 | 第54-55页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第55-56页 |
·重组蛋白最佳诱导时间的确定 | 第56-58页 |
·重组蛋白表达方式的判定 | 第58页 |
·果蝇 RDL 全长蛋白的纯化 | 第58-59页 |
·western blot 鉴定 | 第59-60页 |
·蛋白浓度的测定 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-65页 |
第三章 鳙鱼的 GABA 受体及二化螟的亚克隆 | 第65-85页 |
·鳙鱼的亚克隆 | 第65-70页 |
·实验材料 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-70页 |
·二化螟的亚克隆 | 第70-77页 |
·实验材料 | 第70-71页 |
·实验方法 | 第71-77页 |
·结果与分析 | 第77-82页 |
·鳙鱼总 RNA 抽提的结果 | 第77-78页 |
·鳙鱼 GABAA 受体 3 的 RT—PCR 结果 | 第78页 |
·二化螟总 RNA 抽提的结果 | 第78-79页 |
·二化螟 RDL 亚基的 RT-PCR 结果 | 第79页 |
·抽质粒及双酶切结果 | 第79-80页 |
·测序结果 | 第80-82页 |
·讨论 | 第82-85页 |
第四章 工作总结及展望 | 第85-86页 |
·总结 | 第85页 |
·工作展望 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-97页 |
作者简介 | 第97页 |