| 缩写词 | 第1-12页 |
| 摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-22页 |
| 第一章 引言 | 第22-36页 |
| 1 植物 SOD 研究 | 第22-27页 |
| ·SOD 的分类 | 第22-23页 |
| ·SOD 的生理作用 | 第23-24页 |
| ·植物 SOD 基因的在不同生理状态下的表达 | 第24-27页 |
| ·植物 SOD 在逆境条件下的表达 | 第24-26页 |
| ·植物 SOD 在离体保存过程中的表达 | 第26-27页 |
| 2 植物 SOD 启动子研究 | 第27-33页 |
| ·植物启动子的基本结构和分类 | 第27-29页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第27页 |
| ·植物启动子的分类 | 第27-29页 |
| ·植物 SOD 启动子的研究概况 | 第29-30页 |
| ·植物 SOD 启动子的功能鉴定研究 | 第30-33页 |
| ·植物启动子功能的研究方法 | 第30-32页 |
| ·植物SOD启动子功能的研究进展 | 第32-33页 |
| 3 龙眼 SOD 研究进展 | 第33-34页 |
| 4 本试验研究的意义与内容 | 第34-36页 |
| ·本试验研究的意义 | 第34-35页 |
| ·本试验研究的内容 | 第35-36页 |
| 第二章 龙眼 EC 的诱导及其限制生长保存条件的优化 | 第36-40页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·外植体的处理 | 第36页 |
| ·龙眼 EC 的诱导 | 第36-37页 |
| ·初代 EC 的继代保存 | 第37页 |
| ·限制生长保存 EC | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-38页 |
| ·不同龙眼品种的 EC 的诱导 | 第37页 |
| ·不同龙眼品种在限制生长培养基上的生长状况 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| ·龙眼幼胚诱导 EC 的影响因素 | 第38-39页 |
| ·影响龙眼 EC 限制生长保存的可能因素 | 第39-40页 |
| 第三章 龙眼EC SOD在不同生理条件下的酶活性变化分析 | 第40-60页 |
| 第一节 离体保存过程中的 EC 的 SOD 活性检测 | 第40-44页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41页 |
| ·限制生长保存过程中的 EC 的 SOD 活性检测 | 第41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| ·常规继代保存过程中不同龙眼品种 EC 的 SOD 活性差异比较 | 第41-42页 |
| ·限制生长保存过程中不同龙眼品种 EC 的 SOD 活性差异比较 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| ·甘露醇和肌醇结合使用可以明显提高龙眼 EC 细胞活力，从而延缓细胞衰老 | 第43-44页 |
| ·影响龙眼 EC 离体保存过程中生长差异的可能因素 | 第44页 |
| 第二节 不同非生物胁迫及激素处理下龙眼EC的SOD活性变化 | 第44-60页 |
| 1 材料与方法 | 第45页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45页 |
| ·龙眼 EC 的不同胁迫处理 | 第45页 |
| ·龙眼 EC 的不同光质处理 | 第45页 |
| ·龙眼 EC 的 SOD 活性检测 | 第45页 |
| ·数据处理 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-55页 |
| ·不同非生物胁迫对龙眼 EC SOD 活性的影响 | 第45-50页 |
| ·不同 PEG 胁迫对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第45-46页 |
| ·不同甘露醇胁迫对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第46-47页 |
| ·不同蔗糖胁迫对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第47-48页 |
| ·不同光质处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第48-49页 |
| ·不同盐胁迫对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第49-50页 |
| ·不同激素处理对龙眼 EC SOD 活性的影响 | 第50-55页 |
| ·不同水杨酸处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第50-51页 |
| ·不同乙烯利处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第51-52页 |
| ·不同 IAA 处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第52-53页 |
| ·不同赤霉素处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第53-54页 |
| ·不同茉莉酸甲酯处理对龙眼 EC 的 SOD 活性的影响 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-60页 |
| ·一定范围内高浓度蔗糖、甘露醇有利于提高龙眼EC细胞活力，从而延缓细胞衰老 | 第55-56页 |
| ·渗透胁迫下龙眼 EC SOD 的可能响应机制 | 第56-57页 |
| ·蓝绿光比白红光更适宜龙眼 EC 生长 | 第57-58页 |
| ·水杨酸、乙烯、IAA 和赤霉素可能通过增强龙眼EC的SOD活性提高抗逆性 | 第58-60页 |
| 第四章 龙眼EC SOD在不同生理条件下表达的定量PCR分析 | 第60-77页 |
| 第一节 龙眼EC在离体保存过程中SOD表达的定量PCR分析 | 第60-64页 |
| 1 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第61页 |
| ·cDNA的合成 | 第61页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-63页 |
| ·龙眼 EC 继代保存过程中 DlCSD1a 基因表达的定量 PCR 分析 | 第62页 |
| ·龙眼 EC 继代保存过程中 DlFSD1a 基因表达的定量 PCR 分析 | 第62页 |
| ·龙眼 EC 继代保存过程中 DlMSD 基因表达的定量 PCR 分析 | 第62页 |
| ·龙眼EC继代保存过程中DlCSD1a、DlFSD1a和DlMSD基因表达的定量PCR比较分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| ·离体保存过程中龙眼EC SOD基因表达和SOD酶活性的表达模式相似 | 第63页 |
| ·DlCSD1a 和 DlMSD 基因可能在龙眼 EC 常规保存过程中起主要调控作用 | 第63-64页 |
| 第二节 龙眼 EC 在非生物胁迫及激素处理中SOD基因表达的定量PCR分析 | 第64-77页 |
| 1 材料与方法 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第64页 |
| ·cDNA的合成 | 第64页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第64-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-72页 |
| ·不同非生物胁迫下龙眼EC中DlCSD1a、DlFSD1a和DlMSD基因表达的定量PCR分析 | 第65-68页 |
| ·不同浓度蔗糖处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的 定量 PCR 分析 | 第65页 |
| ·不同光质处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR 分析 | 第65-67页 |
| ·不同盐胁迫下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR 分析 | 第67-68页 |
| ·不同激素处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR 分析 | 第68-72页 |
| ·不同浓度水杨酸处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR分析 | 第68-69页 |
| ·不同浓度乙烯利处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR分析 | 第69-70页 |
| ·不同浓度 IAA 处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR分析 | 第70页 |
| ·不同浓度赤霉素处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量 PCR分析 | 第70-71页 |
| ·不同浓度茉莉酸甲酯处理下龙眼 EC 中 DlCSD1a、DlFSD1a 和 DlMSD 基因表达的定量PCR 分析 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-77页 |
| ·不同非生物胁迫及激素处理下龙眼 ECSOD 基因表达和 SOD 酶活性的表达模式不完全一致 | 第72-73页 |
| ·DlCSD1a 基因可能在参与响应干旱、盐胁迫、水杨酸及赤霉素中起主要作用 | 第73-74页 |
| ·DlCSD1a 基因可能在参与响应短期光质胁迫中起主要作用，DlFSD1a 基因可能在参与响应长期光质胁迫中起主要作用 | 第74页 |
| ·DlCSD1a 和 DlMSD 基因可能在参与响应乙烯利和茉莉酸甲酯中起主要作用 | 第74-75页 |
| ·DlCSD1a 和 DlFSD1a 基因可能在参与响应 IAA 中起主要作用 | 第75-77页 |
| 第五章 龙眼 EC 不同 SOD 启动子转化烟草的功能鉴定研究 | 第77-107页 |
| 第一节 农杆菌注射渗透法转化烟草叶片的体系优化 | 第77-91页 |
| 1 材料与方法 | 第78-83页 |
| ·材料 | 第78-79页 |
| ·试剂、根癌农杆菌菌株及载体 | 第78-79页 |
| ·受体材料 | 第79页 |
| ·方法 | 第79-83页 |
| ·烟草组培苗的移栽 | 第79页 |
| ·根癌农杆菌的继代保存 | 第79页 |
| ·农杆菌注射渗透法转化烟草叶片 | 第79-80页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第80-81页 |
| ·GUS 活性检测 | 第81-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-89页 |
| ·不同移栽时间的烟草叶片 GUS 瞬时表达比较 | 第83-84页 |
| ·不同烟草叶片侵染部位的选择 | 第84-85页 |
| ·不同 MgCl2重悬液浓度对烟草叶片 GUS 瞬时表达的影响 | 第85-86页 |
| ·不同乙酰丁香酮浓度对烟草叶片 GUS 瞬时表达的影响 | 第86页 |
| ·不同农杆菌重悬液菌液浓度对烟草叶片 GUS 瞬时表达的影响 | 第86-87页 |
| ·共培养时间对烟草叶片GUS瞬时表达的影响 | 第87-88页 |
| ·最优条件下农杆菌注射渗透法转化烟草的最适宜农杆菌菌液浓度验证 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-91页 |
| ·农杆菌注射渗透法转化烟草叶片的各参数优化的必要性 | 第89-90页 |
| ·受体材料的生长状态是保证烟草叶片瞬时表达试验成功与否的重要前提 | 第90页 |
| ·菌液浓度和注射部位是影响烟草注射法成败的关键 | 第90页 |
| ·共培养时间的确定是提高烟草叶片瞬时表达率的关键环节之一 | 第90-91页 |
| ·MgCl_2重悬液和乙酰丁香酮对提高瞬时表达率有很大作用 | 第91页 |
| 第二节 14 个 3’/5’端序列缺失片段 SOD 启动子转化烟草叶片及其瞬时表达分析 | 第91-107页 |
| 1 材料与方法 | 第92-94页 |
| ·材料 | 第92页 |
| ·试剂、根癌农杆菌菌株及载体 | 第92页 |
| ·受体材料 | 第92页 |
| ·方法 | 第92-94页 |
| ·烟草组培苗的移栽 | 第92页 |
| ·根癌农杆菌的继代保存 | 第92页 |
| ·农杆菌注射渗透法转化烟草叶片 | 第92页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第92-93页 |
| ·GUS 活性检测 | 第93页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第93页 |
| ·cDNA的合成 | 第93页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第93-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-101页 |
| ·DlMSD 启动子不同 3’/5’端缺失片段调控下的 GUS 瞬时表达活性与 GUS 基因表达的定量PCR 的比较分析 | 第94-96页 |
| ·DlFSD1a 启动子不同 3’/5’端缺失片段调控下的 GUS 瞬时表达活性与 GUS 基因表达的定 PCR 的比较分析 | 第96-98页 |
| ·DlCSD1a 启动子不同 3’/5’端缺失片段调控下的 GUS 瞬时表达活性与 GUS 基因表达的定 PCR 的比较分析 | 第98-100页 |
| ·启动 GUS 基因能力较强的不同类型 SOD 启动子的 GUS 瞬时表达活性与 GUS 基因表达的定量 PCR 的比较分析 | 第100-101页 |
| 3 讨论 | 第101-107页 |
| ·DlMSD 启动子不同 3’/5’端缺失片段中 3’缺失片段启动能力可能最强 | 第101-103页 |
| ·DlFSD1a 启动子不同 3’/5’端缺失片段中 3’缺失片段启动能力可能最强 | 第103-104页 |
| ·DlCSD1a 启动子不同 3’/5’端缺失片段中 5’缺失片段 CSD-pro5 启动能力可能最强 | 第104-107页 |
| 第六章 农杆菌介导转化龙眼 EC 的体系的优化 | 第107-119页 |
| 1 材料与方法 | 第107-110页 |
| ·材料 | 第107-108页 |
| ·受体材料 | 第107-108页 |
| ·试剂、根癌农杆菌菌株及载体 | 第108页 |
| ·方法 | 第108-110页 |
| ·龙眼 EC 对潮霉素的耐受性 | 第108页 |
| ·农杆菌侵染受体材料 | 第108页 |
| ·共培养 | 第108页 |
| ·除菌 | 第108-109页 |
| ·抗性筛选 | 第109页 |
| ·转化体系的主要影响因子研究 | 第109页 |
| ·DNA 的提取和 PCR 检测 | 第109-110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-116页 |
| ·龙眼 EC 对潮霉素的耐受性 | 第110页 |
| ·不同 2,4-D 处理的龙眼 EC 对 GUS 瞬时表达的影响 | 第110-111页 |
| ·浸染时间对 GUS 瞬时表达的影响 | 第111-112页 |
| ·洗菌方式对侵染后龙眼状态的影响 | 第112-113页 |
| ·不同农杆菌活化物对 GUS 瞬时表达的影响 | 第113-114页 |
| ·共培养时间对 GUS 瞬时表达的影响 | 第114-115页 |
| ·龙眼抗性 EC 的抗性筛选及其 PCR 检测 | 第115-116页 |
| 3 讨论 | 第116-119页 |
| ·龙眼遗传转化中抗生素的选择 | 第116页 |
| ·较高浓度的 2,4-D 处理的龙眼 EC 不适合作为受体材料 | 第116页 |
| ·侵染时间和共培养时间是影响龙眼转化成败的关键 | 第116-117页 |
| ·乙酰丁香酮能有效提高龙眼遗传转化效果 | 第117页 |
| ·除菌时间长短对转化后的龙眼生长状态有明显影响 | 第117页 |
| ·根癌农杆菌介导龙眼 EC 遗传转化存在的问题及展望 | 第117-119页 |
| 第七章 小结 | 第119-126页 |
| 1 龙眼 EC 的诱导及其限制生长保存条件下的生长状况比较 | 第119-120页 |
| 2 龙眼 EC SOD 在不同生理条件下的酶活性变化分析 | 第120-121页 |
| ·限制生长保存和普通保存过程中的 EC 的 SOD 活性变化比较 | 第120页 |
| ·不同非生物胁迫及激素处理下龙眼 EC 的 SOD 活性变化 | 第120-121页 |
| ·龙眼 EC 在非生物胁迫中 SOD 酶活性变化 | 第120-121页 |
| ·龙眼 EC 在多种激素处理中 SOD 酶活性变化 | 第121页 |
| 3 龙眼 EC SOD 在不同生理条件下表达的定量 PCR 分析 | 第121-122页 |
| ·龙眼 EC 在离体保存过程中 SOD 表达的定量 PCR 分析 | 第121页 |
| ·龙眼 EC 在非生物胁迫及激素处理中 SOD 表达的定量 PCR 分析 | 第121-122页 |
| ·龙眼 EC 在非生物胁迫中 SOD 表达的定量 PCR 分析 | 第121-122页 |
| ·龙眼 EC 在激素处理中 SOD 表达的定量 PCR 分析 | 第122页 |
| 4 龙眼 EC 不同 SOD 启动子转化烟草的功能鉴定研究 | 第122-124页 |
| ·农杆菌注射渗透法转化烟草叶片的体系优化 | 第122-123页 |
| ·14 个 3’/5’端序列缺失片段 SOD 启动子转化烟草叶片及其瞬时表达检测 | 第123页 |
| ·SOD 启动子转化烟草叶片的 GUS 基因表达的定量 PCR 分析 | 第123-124页 |
| 5 农杆菌介导转化龙眼 EC 的体系的优化 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-140页 |
| 附录 1 图版及图版说明 | 第140-151页 |
| 附录 2 龙眼 EC SOD 基因等 qPCR 分析相关曲线图版 | 第151-152页 |
| 附录 3 烟草 GUS 基因等 qPCR 分析相关曲线图版 | 第152-153页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况与参加学术会议情况 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154页 |
