| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-22页 |
| ·白细胞介素10（IL-10）研究进展 | 第11-16页 |
| ·IL-10 分子结构和来源 | 第11-12页 |
| ·IL-10 基因调控机理 | 第12页 |
| ·IL-10 基因表达的调控 | 第12页 |
| ·IL-10 的信号传导 | 第12-13页 |
| ·IL-10 的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·IL-10 对B 淋巴细胞的作用 | 第13页 |
| ·IL-10 对T 淋巴细胞的作用 | 第13-14页 |
| ·IL-10 对调节性T 淋巴细胞作用 | 第14页 |
| ·IL-10 对单核/巨噬细胞的作用 | 第14页 |
| ·IL-10 在疾病治疗方面的研究 | 第14-15页 |
| ·IL-10 应用前景与面临问题 | 第15-16页 |
| ·乳腺生物反应器研究进展 | 第16-22页 |
| ·转基因技术 | 第16页 |
| ·乳腺生物反应器 | 第16-17页 |
| ·乳腺生物反应器的构建 | 第17-19页 |
| ·常用的基因转移技术 | 第19-20页 |
| ·显微注射法 | 第19-20页 |
| ·反转录病毒感染技术 | 第20页 |
| ·雄性生殖细胞转染技术 | 第20页 |
| ·乳腺生物反应器的应用现状 | 第20-21页 |
| ·乳腺生物反应器研究的问题与展望 | 第21-22页 |
| 2. 引言 | 第22-23页 |
| 3 人白细胞介素10 基因的克隆 | 第23-30页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和材料 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·常用试剂配制 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-27页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·PCR 反应 | 第24-25页 |
| ·PCR 产物的回收和纯化 | 第25页 |
| ·hIL-10 与pUM-T 连接 | 第25页 |
| ·重组质粒的转化 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pUM-hIL-10 的筛选与PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·pUM-hIL-10 的酶切鉴定及测序 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-29页 |
| ·hIL-10 的PCR 扩增结果 | 第27页 |
| ·重组质粒pUM-hIL-10 的筛选与鉴定 | 第27-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 4 牛β酪蛋白基因5′端调控序列的克隆 | 第30-35页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂和材料 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·常用试剂配制 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第30页 |
| ·牛血液DNA 提取 | 第30-31页 |
| ·PCR 反应 | 第31页 |
| ·PCR 产物的回收和纯化 | 第31页 |
| ·牛β-CN 与pUM-T 连接 | 第31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的筛选与PCR 鉴定 | 第31页 |
| ·pUM-bβCN 的酶切鉴定及测序 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·牛血液DNA 的提取 | 第32页 |
| ·牛β酪蛋白基因5′端调控序列的PCR 扩增 | 第32页 |
| ·重组质粒pUM-hIL-10 的筛选与鉴定 | 第32-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 5 真核表达载体的构建 | 第35-39页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·主要试剂和材料 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·常用试剂配制 | 第35页 |
| ·试验方法 | 第35-36页 |
| ·hIL-10 与pcDNA3.1(+)质粒载体连接 | 第35页 |
| ·pcDNA3.1(+)-hIL-10 连接产物的筛选及鉴定 | 第35页 |
| ·bβCN 与pcDNA3.1(+)-hIL-10 质粒载体连接 | 第35-36页 |
| ·pcDNA3.1(+)-bβCN-hIL-10 连接产物的筛选及鉴定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-38页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1(+)-hIL-10 的鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1(+)-bβCN-hIL-10 的鉴定 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 6 转基因小鼠的构建 | 第39-47页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂和材料 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·常用试剂配制 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-44页 |
| ·雄鼠的结扎 | 第40-41页 |
| ·超排小鼠和假孕小鼠的准备 | 第41页 |
| ·受精卵采集及观察 | 第41-42页 |
| ·显微注射 | 第42-44页 |
| ·显微注射准备 | 第42页 |
| ·受精卵的显微注射 | 第42-44页 |
| ·胚胎移植 | 第44页 |
| ·准备移植胚胎 | 第44页 |
| ·胚胎的子宫移植 | 第44页 |
| ·复苏 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·原核期胚胎的形态学观察与采集 | 第44-45页 |
| ·显微注射及胚胎移植结果 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 7 讨论与结果 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·目的基因的选择 | 第47页 |
| ·DNA 结构、纯度、浓度对基因转移的的影响 | 第47页 |
| ·显微注射对基因转移的的影响 | 第47-48页 |
| ·胚胎移植对基因转移的的影响 | 第48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| Abstract | 第56-57页 |
