| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·马立克氏病病毒研究进展 | 第9-13页 |
| ·马立克氏病病毒特性 | 第9页 |
| ·马立克氏病病毒分子生物学研究进展 | 第9-11页 |
| ·马立克氏病的疫苗研究进展 | 第11-13页 |
| ·细菌人工染色体技术及其在马立克氏病病毒研究中的应用 | 第13-17页 |
| ·细菌人工染色体技术简介 | 第13-14页 |
| ·细菌人工染色体修饰的主要技术 | 第14-15页 |
| ·Red/ET重组系统 | 第14-15页 |
| ·Cre/Lox P重组系统 | 第15页 |
| ·细菌人工染色体技术在马立克氏病病毒研究中的应用 | 第15-17页 |
| ·马立克氏病病毒作为禽用疫苗活载体的研究进展 | 第17-19页 |
| ·重组病毒活载体疫苗 | 第17页 |
| ·马立克氏病病毒载体疫苗的研究进展 | 第17-19页 |
| ·禽流感和传染性法氏囊病研究进展概述 | 第19-21页 |
| ·禽流感疫苗研究进展 | 第19-20页 |
| ·传染性法氏囊病疫苗研究进展 | 第20-21页 |
| 第二章 表达AIV HA和IBDV VP2基因的真核表达载体的构建 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·AIV H9N2 HA、IBDV VP2片段的扩增与纯化回收 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·PCR反应体系扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第22页 |
| ·HA、VP2基因克隆到pMD18-T | 第22-24页 |
| ·目的片段与T载体的连接 | 第23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的筛选鉴定 | 第23-24页 |
| ·HA、VP2基因克隆到pEP-BGH-end | 第24-25页 |
| ·pT-HA、pT-VP2和载体pEP-BGH-end的酶切及回收 | 第24页 |
| ·目的片段和载体的连接及转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的PCR及酶切鉴定 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-27页 |
| ·HA、VP2基因PCR扩增结果 | 第25页 |
| ·重组质粒pT-HA、pT-VP2的鉴定结果 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pBGH-HA、pBGH-VP2酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 CVI988 BAC转化E.coli GS1783 | 第29-36页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·工程菌和鸡胚 | 第29页 |
| ·主要试剂及配方 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·CVI988 BAC的提取 | 第29-30页 |
| ·制备E.coli GS1783电转化感受态细胞 | 第30页 |
| ·CVI988 BAC电转化GS1783感受态细胞 | 第30-31页 |
| ·酶切筛选阳性克隆 | 第31页 |
| ·转染鸡胚成纤维细胞验证 | 第31-32页 |
| ·制备鸡胚成纤维细胞 | 第31-32页 |
| ·磷酸钙法转染鸡胚成纤维细胞 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·CVI988 BAC转染鸡胚成纤维细胞的结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 附录 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41页 |
