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拟南芥AtRabGAP基因功能分析

缩写词第1-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-10页
1 前言第10-20页
   ·脱落酸的作用及基因表达调控第10-12页
     ·ABA 对植物生长发育的作用第10页
     ·脱落酸响应基因第10-11页
     ·脱落酸响应基因的结构第11页
     ·编码含GRAM 结构域的脱落酸响应基因家族第11-12页
   ·脱落酸与G-蛋白的关系第12-13页
   ·小G 蛋白第13-18页
     ·Rab GTPase第14-15页
     ·RabGAP第15-18页
   ·立题依据第18-20页
2 材料与方法第20-28页
   ·实验材料第20-21页
     ·植物、菌株及载体第20页
     ·实验试剂第20页
     ·实验常用溶液第20-21页
     ·拟南芥叶肉原生质体瞬时表达所用溶液第21页
     ·植物总蛋白提取所需溶液第21页
   ·实验方法第21-28页
     ·拟南芥的培养第21-22页
     ·叶片失水率的测定第22页
     ·基因组DNA 的提取第22页
     ·RNA 的提取第22页
     ·反转录制备拟南芥cDNA第22-23页
     ·实验所用引物第23-24页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第24页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第24-25页
     ·蛋白原核表达与小量提取第25页
     ·原核蛋白表达的大量提取方法第25-26页
     ·农杆菌介导的转化(Floral dip)第26页
     ·转基因植株的筛选方法第26页
     ·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学鉴定第26页
     ·PEG 介导拟南芥叶片原生质体瞬时表达第26-27页
     ·共聚焦显微镜观察GFP 荧光定位第27页
     ·植物总蛋白的提取第27页
     ·实验数据处理及作图第27-28页
3 结果分析第28-40页
   ·纯合缺失突变体的鉴定第28-29页
   ·缺失突变体gap 的表型分析第29-31页
     ·ABA 对突变体萌发的影响第29-30页
     ·突变体失水率分析第30-31页
   ·GAP 超表达载体的构建第31-32页
   ·GAP 对ABA 相关基因转录的调节第32-33页
   ·GAP 的组织表达分析第33-34页
     ·拟南芥 GAP 启动子克隆及pCMBIA1381-GUS 融合表达载体的构建与鉴定第33页
     ·GAP 组织定位第33-34页
   ·GAP 的亚细胞定位第34-36页
     ·pEGAD- GAP 重组质粒的构建和鉴定第34-35页
     ·pHBT-GFP- GAP 重组质粒的构建第35-36页
     ·pHBT-GAP 转原生质体及GAP 的亚细胞定位第36页
   ·pET-28a(+)-TBC 载体构建、TBC -His 融合蛋白诱导表达第36-37页
   ·植物体内GAP 活性检测分析第37-40页
4 讨论第40-42页
   ·对GAP 基因的初步分析第40-42页
5 结论第42-44页
参考文献第44-49页
致谢第49-50页

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