缩写词 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
1 前言 | 第10-20页 |
·脱落酸的作用及基因表达调控 | 第10-12页 |
·ABA 对植物生长发育的作用 | 第10页 |
·脱落酸响应基因 | 第10-11页 |
·脱落酸响应基因的结构 | 第11页 |
·编码含GRAM 结构域的脱落酸响应基因家族 | 第11-12页 |
·脱落酸与G-蛋白的关系 | 第12-13页 |
·小G 蛋白 | 第13-18页 |
·Rab GTPase | 第14-15页 |
·RabGAP | 第15-18页 |
·立题依据 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-28页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·植物、菌株及载体 | 第20页 |
·实验试剂 | 第20页 |
·实验常用溶液 | 第20-21页 |
·拟南芥叶肉原生质体瞬时表达所用溶液 | 第21页 |
·植物总蛋白提取所需溶液 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-28页 |
·拟南芥的培养 | 第21-22页 |
·叶片失水率的测定 | 第22页 |
·基因组DNA 的提取 | 第22页 |
·RNA 的提取 | 第22页 |
·反转录制备拟南芥cDNA | 第22-23页 |
·实验所用引物 | 第23-24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第24页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第24-25页 |
·蛋白原核表达与小量提取 | 第25页 |
·原核蛋白表达的大量提取方法 | 第25-26页 |
·农杆菌介导的转化(Floral dip) | 第26页 |
·转基因植株的筛选方法 | 第26页 |
·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学鉴定 | 第26页 |
·PEG 介导拟南芥叶片原生质体瞬时表达 | 第26-27页 |
·共聚焦显微镜观察GFP 荧光定位 | 第27页 |
·植物总蛋白的提取 | 第27页 |
·实验数据处理及作图 | 第27-28页 |
3 结果分析 | 第28-40页 |
·纯合缺失突变体的鉴定 | 第28-29页 |
·缺失突变体gap 的表型分析 | 第29-31页 |
·ABA 对突变体萌发的影响 | 第29-30页 |
·突变体失水率分析 | 第30-31页 |
·GAP 超表达载体的构建 | 第31-32页 |
·GAP 对ABA 相关基因转录的调节 | 第32-33页 |
·GAP 的组织表达分析 | 第33-34页 |
·拟南芥 GAP 启动子克隆及pCMBIA1381-GUS 融合表达载体的构建与鉴定 | 第33页 |
·GAP 组织定位 | 第33-34页 |
·GAP 的亚细胞定位 | 第34-36页 |
·pEGAD- GAP 重组质粒的构建和鉴定 | 第34-35页 |
·pHBT-GFP- GAP 重组质粒的构建 | 第35-36页 |
·pHBT-GAP 转原生质体及GAP 的亚细胞定位 | 第36页 |
·pET-28a(+)-TBC 载体构建、TBC -His 融合蛋白诱导表达 | 第36-37页 |
·植物体内GAP 活性检测分析 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
·对GAP 基因的初步分析 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49-50页 |