中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
第一章 前言 | 第17-37页 |
·肿瘤的发展及治疗现状 | 第17-18页 |
·肿瘤疫苗 | 第18-23页 |
·肿瘤疫苗的作用机制 | 第18-19页 |
·肿瘤疫苗的研究进展 | 第19-21页 |
·肿瘤疫苗的分类 | 第21-22页 |
·肿瘤疫苗其他肿瘤治疗手段的联合应用 | 第22-23页 |
·影响肿瘤蛋白疫苗的因素 | 第23-26页 |
·免疫佐剂 | 第23-24页 |
·prime-boost免疫策略 | 第24-26页 |
·肿瘤靶点的选择 | 第26-34页 |
·survivin的分子结构和生物学功能 | 第26-29页 |
·MUC1的分子结构和生物学功能 | 第29-30页 |
·survivin和MUC1在肿瘤中的表达 | 第30-31页 |
·survivin和MUC1疫苗的研究进展 | 第31-34页 |
·论文的立题依据及设计 | 第34-37页 |
·立题依据 | 第34-35页 |
·本论文要解决的问题 | 第35页 |
·实验设计 | 第35-37页 |
第二章 实验材料与方法 | 第37-49页 |
·实验材料 | 第37-40页 |
·菌株,细胞株,病毒,质粒,动物 | 第37-38页 |
·抗体 | 第38页 |
·肽合成 | 第38页 |
·引物合成 | 第38-39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·常规试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-49页 |
·质粒构建与制备 | 第40-41页 |
·pRSET B-S8的构建 | 第40-41页 |
·pET26B-9M的构建 | 第41页 |
·蛋白表达纯化 | 第41-42页 |
·S8蛋白原核表达纯化与鉴定 | 第41页 |
·9M蛋白原核表达纯化与鉴定 | 第41-42页 |
·蛋白定量 | 第42页 |
·ELISA法测定肿瘤患者血清中抗体 | 第42页 |
·细胞培养基本操作 | 第42-43页 |
·细胞复苏 | 第42页 |
·细胞冻存 | 第42页 |
·细胞培养 | 第42-43页 |
·免疫效果评价 | 第43-46页 |
·脾细胞处理方案 | 第43页 |
·ELISpot实验检测分泌IFN-γ的淋巴细胞数目 | 第43-44页 |
·CTL杀伤功能的检测 | 第44-45页 |
·细胞因子检测 | 第45页 |
·抗体分型检测 | 第45-46页 |
·T细胞激活检测 | 第46页 |
·淋巴细胞增殖检测 | 第46页 |
·小鼠肿瘤细胞抑制实验和生存期实验 | 第46-48页 |
·实验动物的准备 | 第46-47页 |
·肿瘤细胞的准备 | 第47页 |
·肿瘤细胞的接种 | 第47页 |
·给药方式 | 第47页 |
·实验分组 | 第47页 |
·肿瘤治疗实验组别设计 | 第47-48页 |
·肿瘤体积变化观察 | 第48页 |
·荷瘤小鼠体内免疫反应的检测 | 第48页 |
·小鼠生存情况观察 | 第48页 |
·统计学处理方法 | 第48-49页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第49-95页 |
·Survivin疫苗的抗肿瘤效果研究 | 第49-65页 |
·pRSET B-S8的构建及S8蛋白表达纯化 | 第49-51页 |
·pRSET B-S8的构建 | 第49-50页 |
·survivin蛋白表达纯化 | 第50-51页 |
·S8蛋白疫苗的免疫原性研究 | 第51-59页 |
·蛋白疫苗免疫佐剂的选择 | 第51-55页 |
·小鼠免疫实验设计 | 第51-52页 |
·佐剂对蛋白疫苗免疫反应的增强作用 | 第52-55页 |
·prime-boost免疫策略的优化 | 第55-59页 |
·疫苗抗肿瘤活性检测及抗肿瘤机制研究 | 第59-62页 |
·疫苗的抗肿瘤活性检测 | 第59-61页 |
·疫苗抗肿瘤效应机制研究 | 第61-62页 |
·疫苗与化药联用后的抗肿瘤效应 | 第62-65页 |
·实验设计 | 第62-64页 |
·疫苗与化药联用的免疫学机制及疫苗安全性研究 | 第64-65页 |
·小结 | 第65页 |
·以 MUC1为靶点的肿瘤疫苗活性研究 | 第65-72页 |
·pET26B-9M的构建及MUC1蛋白表达纯化 | 第66-67页 |
·pET26B-9M的构建 | 第66页 |
·MUC1蛋白表达纯化 | 第66-67页 |
·DDA/MPL对9M重组蛋白诱导免疫反应的增强作用 | 第67-69页 |
·AD-9M/9M pro的抗肿瘤效应研究 | 第69-70页 |
·AD-9M/9M pro疫苗抗肿瘤机制研究 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
·survivin与MUC1联合疫苗抗黑色素瘤效果评价 | 第72-75页 |
·免疫实验设计 | 第72-73页 |
·疫苗对黑色素瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用和生命延长作用 | 第73-74页 |
·疫苗抗肿瘤机制研究 | 第74-75页 |
·小结 | 第75页 |
·疫苗联合化药使用抗黑色素瘤效果评价 | 第75-79页 |
·实验设计 | 第75-76页 |
·联合使用疫苗对黑色素瘤小鼠抗肿瘤作用评价 | 第76-78页 |
·化药对疫苗的免疫增强作用机制研究 | 第78页 |
·小结 | 第78-79页 |
·survivin与MUC1联合疫苗对于其他类型小鼠的抗肿瘤作用研究 | 第79-91页 |
·不同类型肿瘤患者血清中survivin及MUC1抗体的检测 | 第79-84页 |
·肠癌患者血清中survivin及MUC1抗体的检测 | 第79-82页 |
·乳腺癌患者血清中survivin及MUC1抗体检测 | 第82-83页 |
·其他的4种肿瘤患者血清中survivin及MUC1抗体检测 | 第83-84页 |
·疫苗联合化药使用抗结肠癌效果评价 | 第84-88页 |
·实验设计 | 第84-85页 |
·联合使用疫苗对结肠癌小鼠肿瘤抗肿瘤作用评价 | 第85-87页 |
·疫苗的抗肿瘤机制研究 | 第87-88页 |
·疫苗联合化药使用抗乳腺癌效果评价 | 第88-91页 |
·实验设计 | 第88页 |
·联合使用疫苗对乳腺癌小鼠抗肿瘤作用评价 | 第88-90页 |
·联合使用疫苗对乳腺癌小鼠抗肿瘤作用机制研究 | 第90-91页 |
·小结 | 第91页 |
·讨论 | 第91-95页 |
结论 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-107页 |
作者简历及攻读博士学位期间发表论文 | 第107-109页 |
致谢 | 第109页 |