中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
前言 | 第10-20页 |
一、必特螺旋霉素和格尔德霉素简介 | 第10-13页 |
1. 必特螺旋霉素概述 | 第10-12页 |
2. 格尔德霉素概述 | 第12-13页 |
二、两种抗生素的生物合成机制 | 第13-16页 |
1. 大环内酯类抗生素的结构和生物合成途径 | 第13-15页 |
2. 格尔德霉素的生物合成 | 第15-16页 |
三、基因工程技术在抗生素中的应用 | 第16-17页 |
1. 基因工程改造或创造新抗生素 | 第16-17页 |
2. 运用基因工程技术提高抗生素的产量 | 第17页 |
四、变铅青链霉菌TK24作为基因工程宿主菌的优点 | 第17-18页 |
五、生物转化及其意义 | 第18-19页 |
六、本论文立题方向和研究意义 | 第19页 |
七、论文研究的内容和技术路线 | 第19-20页 |
第一部分:插入强启动子和增加基因拷贝数提高ist基因在变铅青链霉菌TK24中对螺旋霉素的异戊酰基化水平 | 第20-39页 |
一、实验材料和实验方法 | 第20-26页 |
1. 实验材料 | 第20-22页 |
2. 实验方法 | 第22-26页 |
二、实验结果与讨论 | 第26-38页 |
1. ist基因重组质粒的构建 | 第26-30页 |
2. S.lividans TK24重组转化子的筛选与鉴定 | 第30-31页 |
3. 菌浓的测定 | 第31-32页 |
4. 四种转化子对螺旋霉素的4"-异戊酰化产物检测 | 第32-37页 |
5. ist基因在S.lividans TK24中蛋白表达检测 | 第37-38页 |
三、结论 | 第38-39页 |
第二部分 :格尔德霉素聚酮体后修饰基因gdmN异源表达及体外活性测定 | 第39-47页 |
一、实验材料和方法 | 第39-40页 |
1. 实验材料 | 第39-40页 |
2. 实验方法 | 第40页 |
二、结果与讨论 | 第40-46页 |
1. gdmN(CT)全基因的克隆 | 第40-42页 |
2. 筛选阳性转化子进行PCR鉴定 | 第42-43页 |
3. 发酵产物分析的鉴定 | 第43-44页 |
4. gdmN基因在大肠杆菌中异源表达及蛋白纯化 | 第44-46页 |
5. CT蛋白的酶活测定 | 第46页 |
三、小结 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
在校期间发表的论文 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |