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玉米NPR类基因的克隆及功能初步分析

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-7页
1 文献综述第7-16页
   ·植物抗病途径研究进展第7-8页
   ·基因工程技术在培育植物抗病新品种中的应用第8页
   ·植物的免疫系统——植物系统性抗病性研究进展第8-10页
     ·系统获得性抗性第9页
     ·PR蛋白在SAR中的地位及研究进展第9-10页
     ·SAR的信号转导途径的信号分子及其研究进展第10页
   ·病程相关基因非表达子第10-13页
     ·NPR1研究进展第10-11页
     ·NPR1基因的结构特点及研究进展第11页
     ·NPR1在植物抗病系统中的地位第11-12页
     ·NPR1在SAR系统中的地位第12-13页
   ·各种生物学技术的应用第13-16页
     ·生物信息学(Bioinformatics)技术第13-14页
     ·基因枪介导的基因瞬时表达技术第14页
     ·半定量PCR技术第14-15页
     ·高效液相色谱法第15-16页
2 引言第16-17页
3 材料和方法第17-28页
   ·实验材料第17页
     ·植株材料第17页
     ·原始载体第17页
     ·菌种第17页
     ·酶类第17页
     ·试剂盒第17页
     ·主要试剂第17页
     ·主要仪器第17页
   ·玉米候选NPR基因的获得第17-20页
     ·候选基因序列的获得第17-18页
     ·引物设计第18页
     ·玉米叶片总RNA提取第18-19页
     ·反转录获得cDNA第19页
     ·PCR获得候选基因第19-20页
     ·测序第20页
   ·ZmNPR1序列的生物信息学分析第20-21页
   ·ZmNPR1的核定位研究第21页
     ·构建融合表达载体第21页
     ·利用基因枪轰击洋葱表皮细胞第21页
     ·观察结果第21页
   ·利用半定量PCR技术分析ZmNPR1诱导表达谱第21-23页
     ·材料的获得和处理第22页
     ·总RNA的提取及cDNA的获得第22页
     ·内参的确定第22页
     ·ZmNPR1表达谱分析第22-23页
     ·PAL表达谱分析第23页
   ·载体构建第23-25页
     ·过量表达载体的构建第23-25页
     ·RNAi干涉载体的构建第25页
   ·转基因植株的获得及检测第25-27页
     ·农杆菌感受态的制备第25页
     ·冻融法将构建的载体导入农杆菌感受态细胞中第25-26页
     ·农杆菌介导对玉米的转化第26页
     ·转基因玉米叶片基因组DNA的提取第26页
     ·PCR检测第26-27页
   ·转基因植株SA含量检测第27-28页
     ·转基因玉米叶片SA的提取第27页
     ·高效液相色谱法检测SA含量第27-28页
4 结果分析第28-37页
   ·玉米NPR类候选基因的扩增第28-29页
     ·玉米叶片总RNA提取第28页
     ·ZmNPR1的获得第28-29页
   ·ZmNPR1生物信息学分析第29-31页
     ·系统进化树分析第29-31页
     ·ZmNPR1基因保守motif分析第31页
   ·ZmNPR1基因在洋葱表皮细胞核中表达第31-32页
   ·不同条件诱导下ZmNPR1和PAL基因的表达量的变化第32-33页
   ·载体构建酶切验证第33页
   ·转基因植株的获得第33-34页
     ·转基因玉米的获得第33页
     ·转基因植株的分子检测第33-34页
   ·转基因植株SA含量检测第34-37页
5 讨论第37-39页
6 结论第39-40页
参考文献第40-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页
硕士期间发表的论文(专利)情况第46页

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