摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 生物地球化学说 | 第11-12页 |
1.2 真菌毒素中毒说 | 第12-17页 |
1.2.1 T-2毒素 | 第13-14页 |
1.2.2 丁烯酸内酯 | 第14页 |
1.2.3 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 | 第14-15页 |
1.2.4 蛇形菌素 | 第15-16页 |
1.2.5 链格孢霉毒素 | 第16-17页 |
1.3 水中有机物中毒说 | 第17-18页 |
1.4 植物内生真菌 | 第18页 |
1.5 本课题的研究目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 硒对相关毒素产生菌发酵产物中T-2毒素、DAS和AME产量的影响 | 第20-30页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验菌株 | 第20页 |
2.1.2 实验仪器 | 第20页 |
2.1.3 实验试剂及配制方法 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-22页 |
2.2.1 梯度硒条件下实验菌株的发酵与发酵液处理 | 第21页 |
2.2.2 待测样品的制备 | 第21页 |
2.2.3 HPLC鉴定比较 | 第21-22页 |
2.3 实验结果 | 第22-28页 |
2.3.1 硒对T-2毒素产量的影响 | 第22-24页 |
2.3.2 硒对DAS产量的影响 | 第24-26页 |
2.3.3 硒对AME产量的影响 | 第26-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 梨孢镰刀菌发酵产物的分级提取纯化 | 第30-36页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第30-31页 |
3.1.1 实验材料 | 第30页 |
3.1.2 实验试剂及材料制备方法 | 第30-31页 |
3.1.3 实验仪器 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-32页 |
3.2.1 菌株的发酵 | 第31页 |
3.2.2 发酵产物的分级提取 | 第31页 |
3.2.3 产物的进一步纯化 | 第31-32页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第32-36页 |
3.3.1 石油醚萃取物柱层析分离的TLC分析结果 | 第32页 |
3.3.2 F样品的HPLC分析结果 | 第32-33页 |
3.3.3 F1的气相色谱-质谱联用分析结果 | 第33-34页 |
3.3.4 F13的液相色谱-质谱联用分析结果 | 第34-36页 |
第四章 不同真菌毒素组合对软骨细胞的影响 | 第36-55页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第36-38页 |
4.1.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.2 实验试剂及其配制方法 | 第36-38页 |
4.1.3 实验仪器 | 第38页 |
4.2 实验方法 | 第38-47页 |
4.2.1 实验分组 | 第38-39页 |
4.2.2 兔膝软骨细胞的培养 | 第39页 |
4.2.3 MTT法检测细胞存活率 | 第39-40页 |
4.2.4 免疫印迹法测定二型胶原蛋白的表达量 | 第40-42页 |
4.2.5 免疫组织化学法检测二型胶原蛋白的表达量 | 第42页 |
4.2.6 甲苯胺蓝染色法检测蛋白聚糖的表达量 | 第42-43页 |
4.2.7 酶联免疫吸附法法检测蛋白聚糖的表达量 | 第43页 |
4.2.8 实时定量PCR法测定二型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA的表达量 | 第43-46页 |
4.2.9 半定量RT-PCR法检测二型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA的表达量 | 第46-47页 |
4.3 实验结果 | 第47-54页 |
4.3.1 毒素组合对软骨细胞存活率的影响 | 第47-48页 |
4.3.2 毒素组合对软骨细胞二型胶原蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
4.3.3 毒素组合对软骨细胞蛋白聚糖表达的影响 | 第50-51页 |
4.3.4 毒素组合对软骨细胞二型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA表达量的影响 | 第51-54页 |
4.4 讨论 | 第54-55页 |
第五章 蛇形菌素与硒对软骨细胞的影响 | 第55-64页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第55页 |
5.2 实验方法 | 第55页 |
5.2.1 实验分组 | 第55页 |
5.2.2 相关指标检测同第四章4.2部分 | 第55页 |
5.3 实验结果 | 第55-62页 |
5.3.1 DAS和Se对软骨细胞存活率的影响 | 第55-57页 |
5.3.2 DAS和Se对软骨细胞二型胶原蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
5.3.3 DAS和Se对软骨细胞蛋白聚糖表达的影响 | 第58-60页 |
5.3.4 DAS和Se对软骨细胞二型胶原蛋白和蛋白聚糖mRNA表达量的影响 | 第60-62页 |
5.4 讨论 | 第62-64页 |
小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第73-75页 |
致谢 | 第75页 |