| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| ·癌症研究概论 | 第12-15页 |
| ·非编码小分子microRNA | 第15-18页 |
| ·miRNA与肿瘤的研究进展 | 第18-21页 |
| ·论文的主要工作和结构安排 | 第21-24页 |
| 第2章 let-7g是乳腺癌诊断和预后的新指标 | 第24-38页 |
| ·引言 | 第24-29页 |
| ·肿瘤转移的基本理论 | 第24-25页 |
| ·肿瘤转移相关的miRNA | 第25-27页 |
| ·Lin28和let-7家族 | 第27-28页 |
| ·选题的依据和意义 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-33页 |
| ·组织芯片和原位杂交技术检测miRNA的表达 | 第29-31页 |
| ·临床冷冻样本组织中microRNA的抽提 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR与quantitive Real-time PCR(qRT-PCR) | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 低表达let-7g促进乳腺癌的侵袭和转移能力 | 第38-56页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·肿瘤转移的常用实验模型 | 第38-39页 |
| ·材料与方法 | 第39-46页 |
| ·细胞培养 | 第39页 |
| ·细胞中microRNA的抽提 | 第39-40页 |
| ·miRNA RT-PCR与quantitive Real-time PCR(qRT-PCR) | 第40-41页 |
| ·microRNA mimics和ASO的转染 | 第41-42页 |
| ·细胞划痕实验(Wound healing assay) | 第42页 |
| ·Transwell迁移和侵袭实验 | 第42-43页 |
| ·慢病毒载体的构建和稳定细胞系的筛选 | 第43-45页 |
| ·裸鼠体内荷瘤实验和远端转移实验 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-54页 |
| ·低表达let-7g在体外明显促进乳腺癌细胞的侵袭和转移 | 第46-50页 |
| ·低表达let-7g在体内启动乳腺癌细胞的远端转移 | 第50-54页 |
| ·本章小结 | 第54-56页 |
| 第4章 let-7g-下游作用靶点和信号通路机制研究 | 第56-76页 |
| ·引言 | 第56-58页 |
| ·GAB2和FN1在肿瘤转移中的作用 | 第56-57页 |
| ·间质金属蛋白酶在肿瘤转移中的作用 | 第57-58页 |
| ·材料与方法 | 第58-67页 |
| ·细胞中总RNA的抽提 | 第58页 |
| ·RT-PCR与quantitive Real-time PCR(qRT-PCR) | 第58-60页 |
| ·microRNA和siRNA的转染 | 第60页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第60-63页 |
| ·荧光报告基因检测 | 第63-66页 |
| ·明胶酶谱实验检测MMP-2,MMP-9(Zymography Assay) | 第66-67页 |
| ·实验结果 | 第67-75页 |
| ·let-7g通过GAB2和FN1来调节乳腺癌细胞的转移和侵袭能力 | 第67-72页 |
| ·let-7g ASO促进乳腺癌细胞的转移和侵袭能力的机制 | 第72-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 第5章 GAB2和FN1是let-7g的特异性靶点 | 第76-80页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·材料与方法 | 第76页 |
| ·实验结果 | 第76-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 第6章 E2和EGF特异性抑制let-7g的表达 | 第80-92页 |
| ·引言 | 第80-82页 |
| ·雌激素E_2在乳腺癌中的作用 | 第80-81页 |
| ·表皮生长因子EGF在乳腺癌中的作用 | 第81-82页 |
| ·材料与方法 | 第82-83页 |
| ·实验试剂 | 第82-83页 |
| ·实验仪器 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83页 |
| ·实验结果 | 第83-90页 |
| ·E_2和EGF调控let-7g和GAB2和FN1的表达 | 第83-88页 |
| ·E_2和EGF调控let-7g的特异性 | 第88-89页 |
| ·E_2和EGF调控let-7g和GAB2的机制 | 第89-90页 |
| ·本章小结 | 第90-92页 |
| 第7章 总结和讨论 | 第92-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 附表1 癌症样本和正常组织中let-7的表达量及统计分析 | 第104-106页 |
| 附表2 let-7的表达量和病人的病理指标的统计学分析 | 第106-116页 |
| 附表3 let-7的表达量和病人的预后指标的统计学分析 | 第116-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第122页 |
