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RNAi提高家蚕对BmNPV的抗性及家蚕精细胞发育相关基因Achi功能的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 文献综述第9-50页
   ·果蝇精子发生的基本过程特征第9-11页
   ·家蚕精子的形成第11-13页
   ·精子生成过程中相关基因的表达第13-17页
   ·果蝇减数分裂阻滞基因第17-26页
   ·同源异型基因第26-27页
   ·TGIF 蛋白第27-29页
   ·BmNPV 的研究进展第29-30页
   ·RNAi 研究的历史进展第30-31页
   ·RNAi 的作用机制第31页
   ·RNAi 干涉的特征第31-33页
   ·RNAi 在家蚕上的确认与应用第33-36页
   ·家蚕转基因研究进展第36-47页
   ·转基因家蚕的应用、总结与展望第47-50页
第二章 一般材料与方法第50-67页
 1 实验材料第50-56页
   ·载体与菌种第50页
   ·生物材料第50页
   ·工具酶及试剂盒第50页
   ·其它试剂第50-51页
   ·主要实验试剂与配制第51-56页
 2 常用仪器第56-57页
 3 常用的实验方法第57-67页
   ·感受态细胞的制备第57页
   ·DNA 的连接反应体系(10 μL)第57页
   ·连接产物的转化第57页
   ·重组质粒的筛选第57-58页
   ·碱裂解法少量制备质粒 DNA第58页
   ·DNA 的酶切反应体系第58-59页
   ·基因组 DNA 提取第59-60页
   ·目的片段的分离和回收第60页
   ·PCR 扩增目的片段第60-61页
   ·琼脂糖凝胶电泳第61页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第61-62页
   ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色第62页
   ·Western blotting第62-63页
   ·过柱纯化蛋白第63-64页
   ·免疫小鼠,制备多克隆抗体第64-65页
   ·总 RNA 提取第65页
   ·RNA 反转录成 cDNA第65页
   ·细胞的培养和保存第65页
   ·定量 PCR(Quantitative PCR.qPCR)第65-66页
   ·Native PAGE 电泳第66-67页
第三章 家蚕 achi 基因对精子发生过程的调控第67-101页
 摘要第67-69页
 1 材料与方法第69-76页
   ·试剂材料第69-70页
   ·实验方法第70-76页
 2 结果与分析第76-97页
   ·Bmachi 的同源性比较第76-80页
   ·BmAchi 的进化分析第80页
   ·Bmachi 的表达谱分析第80-83页
   ·Bmachi 的亚细胞定位第83-85页
   ·BmAchi-L 是转录激活因子第85-88页
   ·BmAchi 蛋白和靶 DNA 的结合第88页
   ·抑制 Bmachi 表达对家蚕精细胞发育的影响第88-94页
   ·BmAchi 蛋白与 BmAly 蛋白具有相互作用第94-97页
 3 讨论第97-101页
第四章 转基因细胞/家蚕 RNAi 对 BmNPV 增殖抑制的研究第101-116页
 摘要第101-103页
 1 材料与方法第103-107页
   ·材料第103-104页
   ·方法第104-107页
 2 结果与分析第107-113页
   ·稳定转化细胞的筛选第107页
   ·稳定转化细胞的 PCR 鉴定第107-108页
   ·稳定转化细胞对 BmNPV 的抑制作用第108页
   ·Q-PCR 检测 ie-1 的转录水平第108-109页
   ·转基因家蚕的筛选和分子生物学鉴定第109-112页
   ·G5 代 3 龄转基因家蚕对 BmNPV 的抗性第112-113页
 3 讨论第113-116页
结论与创新点第116-117页
参考文献第117-138页
资助项目第138-139页
致谢第139-140页

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