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牛红细胞表面受体糖蛋白和东方巴贝斯虫球状体蛋白3基因的克隆表达及分析

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
缩略语表第11-13页
第一章 巴贝斯虫入侵机制的研究进展第13-22页
   ·巴贝斯虫入侵红细胞的过程第13-14页
   ·巴贝斯虫入侵红细胞后对红细胞的改变第14-16页
     ·红细胞机械性能的改变第14页
     ·红细胞粘附性能的改变第14-15页
     ·红细胞表面“脊”的形成第15-16页
   ·巴贝斯虫的红细胞受体第16-17页
     ·唾液酸残基第16页
     ·胰岛素或α-糜蛋白酶敏感型蛋白第16-17页
     ·肝素和硫酸化的粘多糖第17页
   ·巴贝斯虫入侵及修饰红细胞相关基因的研究进展第17-18页
   ·巴贝斯虫主要的抗原分子第18-22页
     ·裂殖子表面抗原分子第18-19页
     ·棒状体蛋白和微线体蛋白第19-21页
     ·球状体蛋白第21-22页
第二章 牛红细胞表面受体糖蛋白基因的克隆与表达第22-67页
   ·研究目的与意义第22页
   ·材料与方法第22-32页
     ·质粒和菌株第22-25页
     ·试剂和仪器第25页
     ·主要培养基和溶液第25-27页
     ·生物信息学分析网站及软件第27-28页
     ·牛全血基因组DNA的提取第28页
     ·引物设计第28-30页
     ·黄牛、奶牛和水牛GYPA、GYPC和DARC基因的扩增第30页
     ·PCR产物的回收纯化及测序第30-32页
   ·黄牛红细胞表面受体GYPA基因的真核表达第32-34页
     ·材料与方法第32页
     ·真核表达质粒的构建第32-33页
     ·质粒的大量提取第33页
     ·转染第33-34页
   ·结果与分析第34-66页
     ·牛红细胞表面受体GYPC基因的克隆第34-36页
     ·牛红细胞表面受体GYPC基因序列分析第36-42页
     ·黄牛、奶牛和水牛红细胞表面受体GYPC序列的比较分析第42-43页
     ·牛红细胞表面受体DARC基因的克隆第43页
     ·牛红细胞表面受体DARC基因序列分析第43-51页
     ·黄牛、奶牛和水牛红细胞表面受体DARC序列的比较第51-52页
     ·牛红细胞表面受体GYPA基因的克隆第52-55页
     ·牛红细胞表面受体GYPA基因序列分析第55-60页
     ·黄牛、奶牛和水牛红细胞表面受体GYPA序列的比较第60-61页
     ·黄牛红细胞表面受体GYPA基因的真核表达与分析第61-65页
     ·黄牛红细胞表面受体GYPA基因真核表达分析第65-66页
   ·讨论第66-67页
第三章 东方巴贝斯虫SBP3克隆与表达第67-83页
   ·研究目的与意义第67页
   ·实验方法第67-71页
     ·引物设计第68页
     ·东方巴贝斯虫基因组的提取第68页
     ·东方巴贝斯虫SBP3基因的扩增第68-69页
     ·PCR产物纯化及测序第69页
     ·重组表达质粒的构建第69-70页
     ·诱导表达第70页
     ·SDS-PAGE电泳第70页
     ·表达产物存在形式的检测第70-71页
     ·Western-blot试验第71页
   ·结果与分析第71-82页
     ·东方巴贝斯虫SBP3基因的扩增第71-72页
     ·东方巴贝斯虫SBP3基因序列分析第72-78页
     ·东方巴贝斯虫SBP3基因的原核表达第78-81页
     ·Western-blot结果第81-82页
   ·讨论第82-83页
第四章 结论第83-84页
参考文献第84-94页
致谢第94-95页
附录第95页

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