中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-9页 |
引言 | 第9-24页 |
1.植物根围促生细菌 | 第9-14页 |
·植物根围促生细菌的概述 | 第9页 |
·植物根围促生细菌的作用机制 | 第9-12页 |
·PGPR制剂的应用现状 | 第12页 |
·解淀粉芽胞杆菌 | 第12-14页 |
2.脂肽类抗菌物质的结构、功能及生物合成 | 第14-19页 |
·脂肽类抗菌物质的分类 | 第14页 |
·表面活性素(Surfactin)的结构与生物合成 | 第14-17页 |
·伊枯草菌素(Iturin)的结构与功能 | 第17-18页 |
·芬荠素(Fengycin)的结构与功能 | 第18-19页 |
3.透明颤菌血红蛋白基因及其功能 | 第19-21页 |
·透明颤菌血红蛋白的性质 | 第19页 |
·透明颤菌血红蛋白的结构及机理 | 第19-20页 |
·透明颤菌血红蛋白基因在工程菌构建中的应用 | 第20-21页 |
4. PGPR的基因工程改造策略 | 第21-23页 |
·转入外源抗真菌蛋白基因 | 第21-22页 |
·提高抗菌脂肽的产量 | 第22页 |
·杀虫防病双效工程菌的构建 | 第22-23页 |
5.立题依据和意义 | 第23-24页 |
材料与方法 | 第24-39页 |
1.材料 | 第24-29页 |
·菌株与质粒 | 第24-25页 |
·培养基和抗生素 | 第25页 |
·试剂和引物 | 第25-28页 |
·仪器与设备 | 第28-29页 |
2.方法 | 第29-39页 |
·vgb基因及P43启动子的克隆和拼接 | 第29-31页 |
·透明颤菌血红蛋白基因在BL21(DE3)中的克隆表达 | 第31-35页 |
·重组整合载体pDG-P43vgb转化解淀粉芽胞杆菌FZB42 | 第35-36页 |
·透明颤菌血红蛋白在解淀粉芽胞杆菌中的表达 | 第36-38页 |
·透明颤菌血红蛋白在解淀粉芽胞杆菌中表达对菌体生长及代谢产物产生的分析 | 第38-39页 |
结果与分析 | 第39-54页 |
1.重组整合表达载体的构建 | 第39-43页 |
·枯草芽胞杆菌168总DNA的提取 | 第39页 |
·P43启动子与vgb基因的克隆与拼接 | 第39-40页 |
·重组整合质粒pDG-P43vgb的构建 | 第40-43页 |
2.透明颤菌血红蛋白抗体的制备 | 第43-45页 |
·pET-vgb表达体系的构建 | 第43页 |
·透明颤菌血红蛋白基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第43-44页 |
·透明颤菌血红蛋白的纯化 | 第44页 |
·透明颤菌血红蛋白抗体的点杂交检验 | 第44-45页 |
3.透明颤菌血红蛋白基因在解淀粉芽胞杆菌FZB42中的表达 | 第45-48页 |
·表达载体pDG-P43vgb转化FZB42、鉴定及vgb基因的稳定性 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE和Western-Bloting检测重组菌FZB42-VHb中血红蛋白的表达 | 第46-47页 |
·CO差光谱法检测重组菌FZB42-VHb中血红蛋白的表达 | 第47-48页 |
4.透明颤菌血红蛋白在重组工程菌FZB42-VHb中的功能…… | 第48-54页 |
·VHb的表达对重组菌株FZB42-VHb生长发酵特征的影响 | 第53页 |
·VHb的表达对工程菌的抗菌脂肽产量及抗真菌活性的影响 | 第53页 |
·VHb的表达对工程菌的抗菌脂肽抗真菌活性的影响 | 第53-54页 |
讨论 | 第54-58页 |
1.工程菌目标基因的选择 | 第54-55页 |
2.透明颤菌血红蛋白基因的定点整合 | 第55页 |
3.枯草芽胞杆菌强启动子P43在解淀粉芽胞杆菌中的转录效果 | 第55-56页 |
4.透明颤菌血红蛋白对次生代谢产物产生的影响 | 第56页 |
5.本研究的特色 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-73页 |
硕士期间撰写和发表的与本课题相关的学术论文 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-77页 |