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脂肪干细胞增殖特性及向心肌细胞分化的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
引言第13-15页
1 文献综述第15-32页
   ·种子细胞第15-23页
     ·ADSC的来源第16-17页
     ·ADSC表面标记的鉴定第17-18页
     ·ADSC的多系分化潜能第18-19页
     ·ADSC作为基因治疗的载体第19-20页
     ·ADSC的旁分泌功能第20页
     ·ADSC的免疫调节作用第20-21页
     ·ADSC治疗缺血性心脏病第21-22页
     ·ADSC的应用及存在的问题第22-23页
   ·生物支架材料第23-26页
     ·天然生物材料第23-26页
     ·合成高分子材料第26页
   ·生物微环境第26-30页
     ·生物反应器第26-29页
     ·生物化学因子第29-30页
     ·机械刺激第30页
   ·本文的选题依据和研究内容第30-32页
2 脂肪干细胞生物学特性的研究第32-50页
   ·引言第32页
   ·实验仪器与材料第32-34页
     ·实验仪器与设备第32-33页
     ·药品与试剂第33-34页
     ·实验组织来源第34页
   ·实验方法第34-38页
     ·脂肪干细胞的分离培养第34-35页
     ·细胞形态学观察第35页
     ·细胞增殖动力学分析第35页
     ·累计群体倍增时间第35页
     ·干细胞相关表面标记测定第35-36页
     ·干细胞相关转录因子测定第36-37页
     ·多向分化潜能检测第37-38页
     ·统计学分析第38页
   ·结果第38-46页
     ·细胞形态学改变第38-39页
     ·细胞增殖动力学第39-41页
     ·干细胞表面标记的检测第41-42页
     ·胚胎干细胞特异性转录因子的表达第42-44页
     ·多向分化潜能第44-46页
   ·讨论第46-49页
   ·小结第49-50页
3 胶原/壳聚糖复合支架的制备第50-59页
   ·引言第50页
   ·实验仪器和材料第50-51页
     ·实验仪器与设备第50-51页
     ·药品与试剂第51页
   ·实验方法第51-52页
     ·胶原/壳聚糖复合支架的制备第51页
     ·支架表面结构观察第51页
     ·支架孔隙率的测定第51-52页
     ·支架吸水率的检测第52页
     ·支架体外降解率的测定第52页
     ·支架与ADSC亲和性的检测第52页
     ·统计学分析第52页
   ·结果第52-56页
     ·支架的微观结构第52-54页
     ·支架的吸水性和孔隙率第54-55页
     ·支架的体外生物可降解性第55页
     ·支架的生物相容性第55-56页
   ·讨论第56-58页
   ·小结第58-59页
4 脂肪干细胞的体外扩增第59-73页
   ·引言第59-60页
   ·实验仪器与材料第60页
     ·实验仪器与设备第60页
     ·药品与试剂第60页
   ·实验方法第60-63页
     ·脂肪干细胞的分离培养第60页
     ·胶原/壳聚糖支架的制备第60-61页
     ·细胞支架复合体的构建第61页
     ·增殖动力学分析第61页
     ·代谢分析第61-62页
     ·扫描电镜第62页
     ·干细胞表面标记的检测第62页
     ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)第62页
     ·免疫组织化学分析第62页
     ·多向分化潜能的检测第62页
     ·统计学分析第62-63页
   ·结果第63-70页
     ·细胞增殖动力学第63页
     ·支架内细胞的代谢第63-64页
     ·支架内细胞的形态学观察第64-65页
     ·细胞表面蛋白的表达第65-67页
     ·转录因子的表达第67-68页
     ·多向分化潜能的检测第68-70页
   ·讨论第70-72页
   ·小结第72-73页
5 ADSC在心肌样微环境下向心肌细胞分化的研究第73-91页
   ·引言第73页
   ·实验仪器与材料第73-74页
     ·实验仪器与设备第73-74页
     ·药品与试剂第74页
   ·实验方法第74-77页
     ·脂肪干细胞的分离培养第74页
     ·心肌细胞的分离培养第74-75页
     ·脂肪干细胞与心肌细胞共培养第75页
     ·分化细胞超微结构观察第75页
     ·免疫细胞化学第75页
     ·流式细胞仪分析第75-76页
     ·Western blot分析第76页
     ·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第76-77页
     ·细胞融合分析第77页
     ·统计学分析第77页
   ·结果第77-87页
     ·细胞形态学观察第77-79页
     ·细胞超微结构观察第79-81页
     ·免疫细胞化学第81-83页
     ·流式细胞仪分析第83-84页
     ·Western blot分析第84-85页
     ·RT-PCR分析第85-86页
     ·细胞融合的观察第86-87页
   ·讨论第87-89页
   ·小结第89-91页
6 IGF-1和动态微环境对脂肪干细胞向心肌细胞分化作用的研究第91-108页
   ·引言第91-92页
   ·实验仪器与材料第92-93页
     ·实验仪器与设备第92页
     ·药品与试剂第92-93页
   ·实验方法第93-96页
     ·胶原-壳聚糖多孔支架的制备第93页
     ·质粒DNA的制备及整合到胶原-壳聚糖支架第93-94页
     ·脂肪干细胞和心肌细胞的分离培养第94页
     ·脂肪干细胞接种到支架复合物上第94页
     ·扫描电镜观察支架-质粒复合物第94页
     ·质粒DNA释放分析第94页
     ·IGF-1基因的表达第94-95页
     ·支架内细胞活性的检测第95页
     ·细胞总蛋白含量的检测第95页
     ·免疫细胞化学分析第95页
     ·Western blot分析第95页
     ·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第95页
     ·统计学分析第95-96页
   ·结果第96-104页
     ·胶原-壳聚糖-质粒复合物超微结构的观察第96页
     ·质粒释放动力学第96页
     ·细胞内IGF-1蛋白表达量分析第96-98页
     ·多光子显微镜下细胞内IGF-1蛋白表达的观察第98-99页
     ·支架内细胞活性观察第99-100页
     ·细胞内总蛋白含量的检测第100页
     ·心肌特异性蛋白的表达第100-102页
     ·心肌特异性转录因子的表达第102-104页
   ·讨论第104-106页
   ·小结第106-108页
结论第108-110页
工作展望第110-111页
创新点摘要第111-112页
参考文献第112-126页
附录A 英文缩略词第126-128页
攻读博士学位期间发表学术论文情况第128-130页
致谢第130-132页
作者简介第132-133页

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