摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
引言 | 第13-15页 |
1 文献综述 | 第15-32页 |
·种子细胞 | 第15-23页 |
·ADSC的来源 | 第16-17页 |
·ADSC表面标记的鉴定 | 第17-18页 |
·ADSC的多系分化潜能 | 第18-19页 |
·ADSC作为基因治疗的载体 | 第19-20页 |
·ADSC的旁分泌功能 | 第20页 |
·ADSC的免疫调节作用 | 第20-21页 |
·ADSC治疗缺血性心脏病 | 第21-22页 |
·ADSC的应用及存在的问题 | 第22-23页 |
·生物支架材料 | 第23-26页 |
·天然生物材料 | 第23-26页 |
·合成高分子材料 | 第26页 |
·生物微环境 | 第26-30页 |
·生物反应器 | 第26-29页 |
·生物化学因子 | 第29-30页 |
·机械刺激 | 第30页 |
·本文的选题依据和研究内容 | 第30-32页 |
2 脂肪干细胞生物学特性的研究 | 第32-50页 |
·引言 | 第32页 |
·实验仪器与材料 | 第32-34页 |
·实验仪器与设备 | 第32-33页 |
·药品与试剂 | 第33-34页 |
·实验组织来源 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·脂肪干细胞的分离培养 | 第34-35页 |
·细胞形态学观察 | 第35页 |
·细胞增殖动力学分析 | 第35页 |
·累计群体倍增时间 | 第35页 |
·干细胞相关表面标记测定 | 第35-36页 |
·干细胞相关转录因子测定 | 第36-37页 |
·多向分化潜能检测 | 第37-38页 |
·统计学分析 | 第38页 |
·结果 | 第38-46页 |
·细胞形态学改变 | 第38-39页 |
·细胞增殖动力学 | 第39-41页 |
·干细胞表面标记的检测 | 第41-42页 |
·胚胎干细胞特异性转录因子的表达 | 第42-44页 |
·多向分化潜能 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
3 胶原/壳聚糖复合支架的制备 | 第50-59页 |
·引言 | 第50页 |
·实验仪器和材料 | 第50-51页 |
·实验仪器与设备 | 第50-51页 |
·药品与试剂 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-52页 |
·胶原/壳聚糖复合支架的制备 | 第51页 |
·支架表面结构观察 | 第51页 |
·支架孔隙率的测定 | 第51-52页 |
·支架吸水率的检测 | 第52页 |
·支架体外降解率的测定 | 第52页 |
·支架与ADSC亲和性的检测 | 第52页 |
·统计学分析 | 第52页 |
·结果 | 第52-56页 |
·支架的微观结构 | 第52-54页 |
·支架的吸水性和孔隙率 | 第54-55页 |
·支架的体外生物可降解性 | 第55页 |
·支架的生物相容性 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·小结 | 第58-59页 |
4 脂肪干细胞的体外扩增 | 第59-73页 |
·引言 | 第59-60页 |
·实验仪器与材料 | 第60页 |
·实验仪器与设备 | 第60页 |
·药品与试剂 | 第60页 |
·实验方法 | 第60-63页 |
·脂肪干细胞的分离培养 | 第60页 |
·胶原/壳聚糖支架的制备 | 第60-61页 |
·细胞支架复合体的构建 | 第61页 |
·增殖动力学分析 | 第61页 |
·代谢分析 | 第61-62页 |
·扫描电镜 | 第62页 |
·干细胞表面标记的检测 | 第62页 |
·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第62页 |
·免疫组织化学分析 | 第62页 |
·多向分化潜能的检测 | 第62页 |
·统计学分析 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-70页 |
·细胞增殖动力学 | 第63页 |
·支架内细胞的代谢 | 第63-64页 |
·支架内细胞的形态学观察 | 第64-65页 |
·细胞表面蛋白的表达 | 第65-67页 |
·转录因子的表达 | 第67-68页 |
·多向分化潜能的检测 | 第68-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
5 ADSC在心肌样微环境下向心肌细胞分化的研究 | 第73-91页 |
·引言 | 第73页 |
·实验仪器与材料 | 第73-74页 |
·实验仪器与设备 | 第73-74页 |
·药品与试剂 | 第74页 |
·实验方法 | 第74-77页 |
·脂肪干细胞的分离培养 | 第74页 |
·心肌细胞的分离培养 | 第74-75页 |
·脂肪干细胞与心肌细胞共培养 | 第75页 |
·分化细胞超微结构观察 | 第75页 |
·免疫细胞化学 | 第75页 |
·流式细胞仪分析 | 第75-76页 |
·Western blot分析 | 第76页 |
·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第76-77页 |
·细胞融合分析 | 第77页 |
·统计学分析 | 第77页 |
·结果 | 第77-87页 |
·细胞形态学观察 | 第77-79页 |
·细胞超微结构观察 | 第79-81页 |
·免疫细胞化学 | 第81-83页 |
·流式细胞仪分析 | 第83-84页 |
·Western blot分析 | 第84-85页 |
·RT-PCR分析 | 第85-86页 |
·细胞融合的观察 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
·小结 | 第89-91页 |
6 IGF-1和动态微环境对脂肪干细胞向心肌细胞分化作用的研究 | 第91-108页 |
·引言 | 第91-92页 |
·实验仪器与材料 | 第92-93页 |
·实验仪器与设备 | 第92页 |
·药品与试剂 | 第92-93页 |
·实验方法 | 第93-96页 |
·胶原-壳聚糖多孔支架的制备 | 第93页 |
·质粒DNA的制备及整合到胶原-壳聚糖支架 | 第93-94页 |
·脂肪干细胞和心肌细胞的分离培养 | 第94页 |
·脂肪干细胞接种到支架复合物上 | 第94页 |
·扫描电镜观察支架-质粒复合物 | 第94页 |
·质粒DNA释放分析 | 第94页 |
·IGF-1基因的表达 | 第94-95页 |
·支架内细胞活性的检测 | 第95页 |
·细胞总蛋白含量的检测 | 第95页 |
·免疫细胞化学分析 | 第95页 |
·Western blot分析 | 第95页 |
·逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第95页 |
·统计学分析 | 第95-96页 |
·结果 | 第96-104页 |
·胶原-壳聚糖-质粒复合物超微结构的观察 | 第96页 |
·质粒释放动力学 | 第96页 |
·细胞内IGF-1蛋白表达量分析 | 第96-98页 |
·多光子显微镜下细胞内IGF-1蛋白表达的观察 | 第98-99页 |
·支架内细胞活性观察 | 第99-100页 |
·细胞内总蛋白含量的检测 | 第100页 |
·心肌特异性蛋白的表达 | 第100-102页 |
·心肌特异性转录因子的表达 | 第102-104页 |
·讨论 | 第104-106页 |
·小结 | 第106-108页 |
结论 | 第108-110页 |
工作展望 | 第110-111页 |
创新点摘要 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-126页 |
附录A 英文缩略词 | 第126-128页 |
攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第128-130页 |
致谢 | 第130-132页 |
作者简介 | 第132-133页 |