| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 一、前言 | 第9-26页 |
| (一) 我国马铃薯生产及马铃薯病毒病 | 第9-14页 |
| 1. 我国马铃薯生产现状 | 第9页 |
| 2. 马铃薯病毒病 | 第9-13页 |
| 3. 马铃薯抗病毒研究现状 | 第13-14页 |
| (二) 马铃薯淀粉与颗粒结合型淀粉合成酶 | 第14-19页 |
| 1. 马铃薯淀粉 | 第14-17页 |
| 2. 颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS) | 第17-18页 |
| 3. 马铃薯颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)研究现状 | 第18-19页 |
| (三) RNA干扰 | 第19-23页 |
| 1. RNA干扰的发现 | 第19-20页 |
| 2. RNA干扰作用机制 | 第20-21页 |
| 3. RNA干扰功能 | 第21页 |
| 4. RNA干扰技术的应用 | 第21-23页 |
| (四) 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| (五) 技术路线 | 第25-26页 |
| 二、实验材料与方法 | 第26-29页 |
| (一) 实验材料 | 第26页 |
| (二) 实验方法 | 第26-29页 |
| 三、结果与讨论 | 第29-40页 |
| (一) 结果 | 第29-37页 |
| 1. 目的片段的克隆及克隆载体的构建 | 第29-31页 |
| 2. RNAi表达载体的构建 | 第31-35页 |
| 3. 马铃薯转化 | 第35页 |
| 4. 马铃薯转化株鉴定 | 第35-36页 |
| 5. GBSS mRNA表达量分析 | 第36-37页 |
| (二) 讨论 | 第37-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附表1 实验使用引物 | 第46-48页 |
| 附录2 培养基和试剂的配方及储存 | 第48-49页 |
| 附录3 植物DNA和总RNA提取方法 | 第49-50页 |
| 附录4 反转录、PCR和酶切 | 第50-51页 |
| 附录5 大肠杆菌感受态细胞的制备、转化和质粒提取 | 第51-52页 |
| 附录6 Gateway技术介绍和实验 | 第52-55页 |
| 附录7 农杆菌转化 | 第55-56页 |
| 附录8 马铃薯转化 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61页 |