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甜瓜乙烯信号转导途径关键因子CTR1基因的克隆及表达特性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
英文缩写及中英文对照表第10-12页
1 引言第12-21页
   ·乙烯的生物合成第12页
   ·乙烯信号转导的研究进展第12-19页
     ·乙烯的感受第13-16页
     ·乙烯的胞质内信号转导第16-18页
     ·乙烯的核内信号传导第18-19页
   ·研究目的与意义第19-21页
2 实验材料与方法第21-29页
   ·实验材料第21-23页
     ·植物材料第21页
     ·菌种质粒第21页
     ·主要试剂第21页
     ·培养基第21-22页
     ·常用试剂配制第22-23页
   ·实验方法第23-29页
     ·甜瓜果实总RNA提取第23-24页
     ·引物设计与合成第24-25页
       ·克隆引物的设计与合成第24页
       ·实时荧光定量PCR检测引物的设计与合成第24-25页
     ·Cm-CTR1基因cDNA序列的克隆第25-28页
       ·反转录反应第25页
       ·Cm-CTR1基因cDNA序列的PCR扩增第25页
       ·PCR产物纯化第25-26页
       ·连接反应第26页
       ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备第26页
       ·重组质粒的转化第26-27页
       ·重组质粒的鉴定第27-28页
       ·序列的测定第28页
     ·生物信息学分析第28页
     ·甜瓜果实内源乙烯含量的测定第28页
     ·甜瓜果实不同发育成熟阶段Cm-CTR1基因的表达特性分析第28-29页
3 结果分析第29-42页
   ·RNA的分析第29页
   ·RT-RNA产物分析第29-30页
   ·重组cDNA克隆的筛选鉴定第30-38页
     ·重组质粒的快速提取法筛选第30页
     ·重组质粒的菌体PCR检测第30-31页
     ·重组质粒的酶切鉴定第31-32页
     ·Cm-CTR1基因序列测序结果第32-35页
     ·Cm-CTR1基因序列分析第35-38页
   ·生物信息学分析第38-40页
     ·进化树分析第39页
     ·Cm-CTR1蛋白理化性质分析第39页
     ·Cm-CTR1蛋白二级结构预测第39-40页
   ·甜瓜果实内源乙烯含量的变化第40-41页
   ·甜瓜Cm-CTR1基因的表达分析第41-42页
4 讨论第42-43页
5 结论第43-44页
附录第44-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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