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禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对氰烯菌酯的抗药性机制研究

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-16页
符号及缩略说明表第16-17页
第一部分 文献综述第17-51页
 第一章 小麦赤霉病研究现状第17-27页
  1 赤霉病的病原第17-19页
  2 赤霉病的发病症状第19-21页
   ·苗腐第19-20页
   ·茎基腐第20页
   ·秆腐第20页
   ·穗腐第20-21页
  3 赤霉病的侵染循环第21-22页
   ·病害的初侵染及其传播第21页
   ·侵染过程第21页
   ·再侵染第21-22页
   ·潜伏侵染第22页
   ·病菌致病机制第22页
  4 赤霉病的发病因素第22-24页
   ·品种的抗病性及易感病的生育期第22-23页
   ·菌源量第23页
   ·气象因素第23-24页
   ·其他因素第24页
  5 小麦赤霉病菌病菌毒素第24-25页
  参考文献第25-27页
 第二章 小麦赤霉病的防治第27-35页
  1 农业防治第27-28页
  2 化学防治第28-29页
   ·无机类杀菌剂第28页
   ·简单有机物第28页
   ·苯并咪唑类第28-29页
   ·三唑类第29页
   ·甲氧基丙烯酸酯类第29页
  3 生物防治第29-30页
  4 抗病育种第30页
  5 展望第30-32页
  参考文献第32-35页
 第三章 氰烯菌酯(JS399-19)的研究现状第35-47页
  1 理化性质第35-36页
  2 毒性第36-38页
   ·原药急性五项第36页
   ·原药致突变第36页
   ·制剂25%悬浮剂急性五项第36-37页
   ·制剂10%乳油急性五项第37页
   ·10%乳油和25%悬浮剂的环境安全性评价试验结论第37-38页
  3 生物学活性第38-42页
   ·抗菌谱第38页
   ·氰烯菌酯对禾谷镰孢菌分生孢子萌发的影响第38-39页
   ·氰烯菌酯对禾谷镰孢菌野生敏感菌株和多菌灵抗性菌株的毒力比较第39页
   ·氰烯菌酯对禾谷镰孢菌菌体呼吸作用的影响第39-40页
   ·禾谷镰孢菌对氰烯菌酯敏感基线的建立第40页
   ·禾谷镰孢菌对氰烯菌酯的室内抗药性风险初步评估第40-42页
  4 氰烯菌酯防治小麦赤霉病的内吸性输导性研究第42-43页
   ·根系对药剂的吸收和输导性第42页
   ·叶片对药剂的吸收和输导方向第42页
   ·叶片跨层输导性第42页
   ·小麦穗颈部的输导性第42页
   ·氰烯菌酯的保护性测定第42页
   ·氰烯菌酯的治疗性测定第42-43页
   ·氰烯菌酯的耐雨水冲刷性研究第43页
   ·氰烯菌酯在小麦叶片上的穿透性研究第43页
   ·小结第43页
  5 氰烯菌酯防治小麦赤霉病及治理抗药性研究第43-45页
   ·田间药效第43-44页
   ·对多菌灵抗性群体发展的影响第44-45页
  参考文献第45-47页
 第四章 禾谷镰孢菌对氰烯菌酯抗药性遗传研究进展第47-51页
  1 抗氰烯菌酯的禾谷镰孢菌nit突变体的诱导及其生物学特性第47-48页
  2 禾谷镰孢菌对氰烯菌酯的抗药性在菌丝融合过程中的遗传学研究第48页
  3 单个基因控制的禾谷镰孢菌对氰烯菌酯的抗药性第48-50页
  参考文献第50-51页
第二部分 研究内容第51-149页
 第一章 经济高效的禾谷镰孢菌原生质体遗传转化系统的建立第51-65页
  1 材料与方法第52-55页
   ·供试菌株第52页
   ·转化片段第52-53页
   ·培养基第53页
   ·试剂第53页
   ·原生质体制备第53-54页
   ·原生质体遗传转化第54页
   ·转化子的筛选第54-55页
   ·转化子的验证第55页
  2 结果与分析第55-59页
   ·酶解材料对原生质体产量的影响第55-56页
   ·酶组合对原生质体产量的影响第56页
   ·酶浓度对原生质体产量的影响第56-57页
   ·酶解时间对原生质体产量的影响第57页
   ·酶解温度对原生质体产量的影响第57-58页
   ·幼殖体的量对原生质体产量的影响第58页
   ·转化子的筛选第58-59页
   ·转化子的验证第59页
  3 讨论第59-61页
  参考文献第61-65页
 第二章 随机插入突变体文库的构建及氰烯菌酯敏感性突变体的筛选第65-77页
  1 材料与方法第66-69页
   ·供试菌株第66页
   ·转化片段第66-67页
   ·培养基第67页
   ·试剂第67页
   ·原生质体遗传转化方法第67-68页
   ·氰烯菌酯敏感性突变体的筛选第68-69页
  2 结果与分析第69-72页
   ·随机插入突变体文库的构建第69-70页
   ·氰烯菌酯敏感性突变体的筛选第70-72页
  3 讨论第72-73页
  参考文献第73-77页
 第三章 禾谷镰孢菌对氰烯菌酯抗药性相关基因的研究第77-109页
  1 材料与方法第78-94页
   ·供试菌株第78页
   ·试剂第78-79页
   ·禾谷镰孢菌分子生物学操作方法第79-85页
   ·hph-hsv单拷贝插入突变体的筛选第85页
   ·Tail-PCR扩增敏感性突变体中hph-hsv的侧翼序列第85-87页
   ·Tail-PCR产物的纯化,克隆,测序及比对第87-88页
   ·敏感性突变体中hph-hsv插入位置的验证第88-89页
   ·敏感性突变体中抗药性相关基因(R基因)的检测第89-90页
   ·禾谷镰孢菌敏感和抗性菌株R基因的比对第90-91页
   ·禾谷镰孢菌敏感和抗性菌株R基因的敲除/回复第91-93页
   ·敏感性突变体和R基因敲除/回复体对氰烯菌酯敏感性测定第93页
   ·敏感性突变体和R基因敲除/回复体生物学性状研究第93-94页
  2 结果第94-103页
   ·hph-hsv单拷贝插入敏感性突变体的获得第94页
   ·敏感性突变体中hph-hsv的侧翼序列第94-95页
   ·敏感性突变体中hph-hsv的插入位置第95-97页
   ·敏感性突变体中hph-hsv插入位置验证第97-99页
   ·敏感性突变体中β_2-tub的检测第99-100页
   ·禾谷镰孢菌敏感和抗性菌株β_2-tub的差异第100页
   ·禾谷镰孢菌抗性菌株β_2-tub的敲除/回复第100-102页
   ·敏感性突变体和β_2敲除/回复体对氰烯菌酯的敏感性第102-103页
   ·敏感性突变体和β_2敲除/回复体的生物学性状第103页
  3 讨论第103-106页
  参考文献第106-109页
 第四章 氰烯菌酯对禾谷镰孢菌蛋白质组的影响第109-149页
  1 材料与方法第111-121页
   ·供试菌株第111页
   ·供试药剂第111页
   ·培养基第111页
   ·生化试剂第111页
   ·仪器第111页
   ·溶液的配制第111-114页
   ·蛋白质样品的制备第114-116页
   ·第一向等电聚焦第116-117页
   ·第二向SDS-PAGE电泳第117-118页
   ·凝胶染色第118-119页
   ·胶图像采集与分析第119页
   ·质谱分析第119-120页
   ·生物信息学分析第120-121页
  2 结果第121-139页
   ·敏感菌株2021总蛋白双向电泳图谱第121-122页
   ·抗性菌株Y2021A总蛋白双向电泳图谱第122-124页
   ·双向电泳图谱差异分析第124-127页
   ·差异蛋白点的鉴定和功能分析第127-139页
  3 讨论第139-141页
  参考文献第141-149页
全文小结第149-151页
攻读博士学位期间发表的学术论文第151-153页
致谢第153-154页

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