| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·禾谷镰刀菌(FUSARIUM GRAMINEARUM)研究概况 | 第11-17页 |
| ·小麦赤霉病概述 | 第11-12页 |
| ·小麦赤霉病菌的种类、分布、危害及防治 | 第12-16页 |
| ·小麦赤霉病菌的遗传学研究 | 第16页 |
| ·禾谷镰刀菌的次生代谢物——真菌毒素 | 第16-17页 |
| ·禾谷镰刀菌(F.GRAMINEARUM)的功能基因组学研究进展 | 第17-22页 |
| ·功能基因组学研究的目的和方法 | 第17-18页 |
| ·禾谷镰刀菌中已研究的基因及其功能 | 第18-19页 |
| ·PTC1 基因相关背景 | 第19-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 FGPTC1 基因敲除质粒构建 | 第23-39页 |
| ·试验材料 | 第23-25页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂、酶及载体 | 第23-25页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-34页 |
| ·PH-1 菌株基因组提取 | 第25-26页 |
| ·5’、3’同源臂的扩增与克隆 | 第26-27页 |
| ·菌落PCR 鉴定 | 第27-28页 |
| ·大量提取同源臂质粒 | 第28-29页 |
| ·酶切小量质粒进行辅助性验证pMD3-7 和pMD5-1 | 第29页 |
| ·5’、3’同源臂与分离标记质粒的重组—亚克隆 | 第29-33页 |
| ·敲除盒质粒的线性化 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-39页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 FGPTC1 基因敲除和转化子基因型鉴定及平板表型 | 第39-46页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·实验菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂、酶及载体 | 第39页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·PH-1 菌株原生质体的制备和真菌转化 | 第39-40页 |
| ·转化子基因型鉴定——PCR 法 | 第40页 |
| ·FgPTC1-t1 平板表型实验 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·转化子基因型鉴定 | 第45页 |
| ·FgPTC1-t1 平板表型实验 | 第45-46页 |
| 第四章 FGPTC10RF 与酿酒酵母SCPTC1 基因缺失株的互补实验 | 第46-53页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·试验菌株 | 第46页 |
| ·主要试剂、酶及载体 | 第46页 |
| ·主要仪器、设备和耗材 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-50页 |
| ·PH-1 总RNA 的提取——Trizol 试剂法 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR 获得PH-1 cDNA——BioRT 逆转录扩增(RT-PCR) 一步法试剂盒方法 | 第47-48页 |
| ·以cDNA 为模板，扩增无Intron 的ORF | 第48页 |
| ·互补质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·酵母感受态的制备及质粒转化 | 第49页 |
| ·互补实验验证FgPTC1 功能 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简历 | 第61页 |
