疫霉菌诱导的南瓜SSH文库构建及表达序列标签分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·研究目的和意义 | 第10-11页 |
| ·病原及发病特点 | 第10-11页 |
| ·疫霉菌的侵染过程及致病机理 | 第11页 |
| ·植物抗病的分子机制 | 第11-15页 |
| ·过敏性反应研究 | 第12页 |
| ·系统获得性抗性 | 第12-13页 |
| ·诱导系统抗性 | 第13-14页 |
| ·植物抗病基因介导的信号途径 | 第14-15页 |
| ·差减杂交技术及其应用 | 第15-24页 |
| ·差减杂交技术 | 第15-20页 |
| ·表达序列标签(ESTs)技术及其应用 | 第20-23页 |
| ·生物信息学的应用 | 第23-24页 |
| ·试验研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-39页 |
| ·试验材料 | 第26-27页 |
| ·南瓜品种 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·化学试剂 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·试验方法 | 第27-39页 |
| ·抗病材料筛选 | 第27-28页 |
| ·抑制差减cDNA 文库构建 | 第28-37页 |
| ·反向Northern 杂交初步筛选差异表达 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| ·抗源筛选 | 第39页 |
| ·总RNA 提取结果 | 第39-40页 |
| ·总RNA 浓度及纯度检测 | 第40-41页 |
| ·MRNA 质量检测结果 | 第41页 |
| ·抑制差减杂交检测结果 | 第41-45页 |
| ·双链cDNA 合成 | 第41-42页 |
| ·RsaI 酶切 | 第42页 |
| ·接头连接效率检测 | 第42-43页 |
| ·差减杂交后产物的两次PCR 扩增结果 | 第43-45页 |
| ·差减效率检测 | 第45页 |
| ·SSHCDNA 文库质量评价 | 第45-47页 |
| ·蓝白斑筛选结果 | 第45-46页 |
| ·文库插入片段大小鉴定 | 第46-47页 |
| ·反向NORTHERN 杂交筛选结果 | 第47页 |
| ·序列测定结果与分析 | 第47-58页 |
| ·抗病反应信号传导 | 第48-49页 |
| ·抗病基因介导的信号途径 | 第49-50页 |
| ·防卫反应基因的表达调控 | 第50-53页 |
| ·蛋白降解及水解酶类 | 第53-54页 |
| ·抗病基因类似物 | 第54-55页 |
| ·植物抗逆相关基因 | 第55页 |
| ·其他相关基因 | 第55-57页 |
| ·未知功能基因 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·RNA 提取及文库质量 | 第58页 |
| ·SSH 技术用于抗病相关基因研究的优越性 | 第58-59页 |
| ·南瓜接种疫霉菌初期参与抗病过程的相关基因 | 第59-60页 |
| ·抗病基因类似物 | 第59页 |
| ·抗病信号传导 | 第59-60页 |
| ·防卫反应转录调控 | 第60页 |
| ·其它相关基因 | 第60页 |
| ·今后研究方向 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |
