摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 前言 | 第10-19页 |
1 鼠李糖的研究 | 第10-13页 |
·鼠李糖的物理性质 | 第10页 |
·鼠李糖的来源 | 第10-11页 |
·鼠李糖生产的研究现状 | 第11-12页 |
·鼠李糖的作用 | 第12-13页 |
2 鼠李糖合成酶的研究 | 第13-14页 |
3 糖信号感应和信号传导 | 第14-15页 |
·糖信号分子 | 第14-15页 |
·糖相关调控元件 | 第15页 |
4 RHM1 基因的研究现状及意义 | 第15-18页 |
5 实验设计 | 第18-19页 |
第二章 RHM1 基因启动子的研究 | 第19-42页 |
1 实验材料 | 第19页 |
·实验样品 | 第19页 |
·菌种 | 第19页 |
·载体 | 第19页 |
·工具酶 | 第19页 |
·测序及引物合成 | 第19页 |
·试剂盒 | 第19页 |
·分子量标准 | 第19页 |
·化学试剂 | 第19页 |
2 方法 | 第19-33页 |
·拟南芥的栽培 | 第19-20页 |
·CTAB 法提取基因组DNA | 第20页 |
·拟南芥RNA 提取 | 第20-22页 |
·反转录 | 第22页 |
·转录水平鉴定 | 第22-23页 |
·植物表达载体的构建 | 第23-27页 |
·拟南芥转化(FLORAL DIPPING 法) | 第27-28页 |
·转基因植株的筛选和鉴定 | 第28-29页 |
·纯系转基因种子的获得 | 第29页 |
·转化子的GUS 染色 | 第29-30页 |
·转化子Β-葡萄糖苷酸酶(GUS)的荧光定量分析 | 第30-32页 |
·对拟南芥的胁迫处理 | 第32-33页 |
·对拟南芥的激素处理 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-42页 |
·启动子缺失分析 | 第33-34页 |
·植物转化表达载体构建 | 第34-35页 |
·抗性筛选阳性幼苗 | 第35页 |
·阳性转基因植株的PCR 鉴定 | 第35页 |
·基因表达模式 | 第35-38页 |
·启动子区顺式作用元件的鉴定 | 第38-42页 |
第三章 RHM1 基因初步研究 | 第42-50页 |
1 实验材料 | 第42页 |
·实验样品 | 第42页 |
·菌种 | 第42页 |
·载体 | 第42页 |
·工具酶 | 第42页 |
·测序及引物合成 | 第42页 |
·试剂盒 | 第42页 |
·分子量标准 | 第42页 |
·化学试剂 | 第42页 |
2 实验方法 | 第42-46页 |
·简易拟南芥基因组DNA 提取 | 第42-43页 |
·拟南芥RNA 的提取 | 第43页 |
·拟南芥突变体的鉴定 | 第43-44页 |
·RNAi、过表达载体构建(Gateway)及纯系转化植物的获得 | 第44-45页 |
·病原菌接种 | 第45-46页 |
·RT-PCR 检测RHM1 基因对某些基因的影响 | 第46页 |
3 结果与分析 | 第46-50页 |
·突变体鉴定 | 第46-48页 |
·RHM1 RNAi、过表达突变体与野生型无表型区别 | 第48页 |
·电导率检测 | 第48-49页 |
·RHM1 对细胞壁形成相关基因的表达无影响 | 第49-50页 |
第四章 结果与讨论 | 第50-53页 |
1 RHM1 基因的表达模式 | 第50页 |
2 RHM1 基因启动子区顺式调控元件的鉴定 | 第50-51页 |
3 RHM1 基因沉默或过表达对植株表型无影响 | 第51-52页 |
4 未来工作安排 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |