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彩叶草(Solenostemon scutellarioides)叶色形成相关的花色素苷生物合成途径的分子调控研究

摘要第1-13页
Abstract第13-18页
第一部分 绪论第18-45页
 第一章 文献综述第18-43页
   ·彩叶植物研究进展第18-27页
     ·组织结构方面的研究第18-19页
     ·彩叶的生理生化研究第19页
     ·彩叶植物呈色机理的研究第19-21页
     ·环境因素对叶片呈色的影响第21-22页
     ·彩叶植物光合特性的研究第22-23页
     ·彩叶植物的遗传稳定性第23-24页
     ·其它相关因子的研究第24页
     ·彩叶草研究进展第24-27页
     ·今后研究方向展望第27页
   ·花色素苷研究进展第27-43页
     ·花色素苷的结构与理化性质第28页
     ·花色素苷在叶片中的产生与分布第28-29页
     ·花色素苷的诱导及其在叶片中的功能第29-32页
     ·花色苷生物合成的基本途径第32-41页
     ·叶色的基因工程改良研究展望第41-43页
 第二章 引言第43-45页
第二部分 彩叶草花色素苷生物合成途径关键基因和MYB R2R3家族转录调控因子的克隆及功能的初步鉴定第45-147页
 第一章 彩叶草查尔酮合成酶基因(SsCHS)的克隆及其在烟草中的表达第45-75页
   ·材料与试剂第45-47页
     ·植物材料第45页
     ·菌株与载体第45页
     ·主要仪器和设备第45-46页
     ·试剂盒及购买的试剂第46页
     ·常用标准试剂配方第46-47页
     ·自配的其它试剂第47页
     ·烟草转化基本培养基第47页
   ·方法第47-57页
     ·各材料总RNA的提取第47-48页
     ·各材料总DNA的提取第48-49页
     ·彩叶草叶片的RACE反转录第49-50页
     ·DNA片段的回收、连接、克隆和测序第50页
     ·基因的生物信息学分析第50页
     ·SsCHS基因保守片断扩增第50-51页
     ·SsCHS基因cDNA 5’末端和3’末端扩增第51页
     ·SsCHS基因全长cDNA及对应的基因组的扩增第51页
     ·SsCHS基因的Southern blot分析第51-53页
     ·SsCHS基因的表达分析第53-54页
     ·SsCHS基因植物表达载体构建与对烟草的转化第54-56页
     ·SsCHS基因功能的初步验证第56-57页
   ·结果与分析第57-71页
     ·SsCHS基因的克隆第57-58页
     ·SsCHS基因的核酸序列和编码的蛋白分析第58-64页
     ·SsCHS基因数的Southern-blot鉴定第64页
     ·SsCHS基因转录的表达特性第64-66页
     ·SsCHS基因正义、反义和RNAi植物表达载体构建第66-68页
     ·SsCHS基因导入烟草及转化植株的获得第68-69页
     ·转SsCHS基因烟草总黄酮、叶绿素、类胡罗卜素和花色素苷的测定第69-71页
   ·讨论第71-73页
   ·小结第73-75页
 第二章 彩叶草黄烷酮-3-羟化酶基因家族(SsF3H)的克隆及表达分析第75-90页
   ·材料与试剂第75页
   ·方法第75-76页
     ·材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录第75页
     ·SsF3H基因保守片断扩增第75页
     ·SsF3H基因cDNA 5’末端和3’末端扩增第75页
     ·SsF3H基因全长cDNA及对应的基因组的扩增第75-76页
     ·SsF3H基因的Southern blot分析第76页
     ·SsF3H基因的表达分析第76页
     ·SsF3H2基因植物表达载体构建与对烟草的转化第76页
   ·结果与分析第76-87页
     ·SsF3H基因家族的克隆第76-77页
     ·SsF3H1和SsF3H2基因的核酸序列和编码的蛋白特征分析第77-83页
     ·SsF3H基因的Southern blot鉴定第83页
     ·SsF3H基因家族转录的表达特性第83-85页
     ·SsF3H2基因正义和反义植物表达载体构建第85-86页
     ·转化SsF3H2基因的烟草获得第86-87页
   ·讨论第87-88页
   ·小结第88-90页
 第三章 彩叶草二氢黄酮醇-4-还原酶基因(SsDFR)的克隆及其在烟草中的表达第90-105页
   ·材料与试剂第90页
   ·方法第90-91页
     ·材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录第90页
     ·SsDFR基因保守片断扩增第90页
     ·SsDFR基因cDNA 5’末端和3’末端扩增第90页
     ·SsDFR基因全长cDNA及对应的基因组的扩增第90-91页
     ·SsDFR基因的Southern blot分析第91页
     ·SsDFR基因的表达分析第91页
     ·SsDFR基因植物表达载体构建与对烟草的转化第91页
     ·SsDFR基因功能的初步验证第91页
   ·结果与分析第91-101页
     ·SsDFR基因的克隆第91-92页
     ·SsDFR基因的核酸序列和编码的蛋白特征分析第92-97页
     ·SsDFR基因的Southern blot鉴定第97页
     ·SsDFR基因转录的表达特性第97-99页
     ·SsDFR基因正义和反义植物表达载体构建第99页
     ·转SsDFR基因烟草的获得及转基因烟草总黄酮和花色素苷的测定第99-101页
   ·讨论第101-104页
   ·小结第104-105页
 第四章 彩叶草花色素合成酶基因家族(SsANS)的克隆及其在烟草中的表达第105-123页
   ·材料与试剂第105页
   ·方法第105-106页
     ·材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录第105页
     ·SsANS基因保守片断扩增第105页
     ·SsANS基因cDNA 5’末端和3’末端扩增第105页
     ·SsANS基因全长cDNA及对应的基因组的扩增第105-106页
     ·SsANS基因的Southern blot分析第106页
     ·SsANS基因的表达分析第106页
     ·SsANS基因植物表达载体构建与对烟草的转化第106页
     ·SsANS1基因功能的初步验证第106页
   ·结果与分析第106-119页
     ·SsANS基因家族的克隆第106-107页
     ·SsANS1和SsANS2基因的核酸序列和编码的蛋白特征第107-114页
     ·SsANS基因的Southern blot鉴定第114页
     ·SsANS基因转录的表达特性第114-116页
     ·SsANS1基因正义和反义植物表达载体构建第116页
     ·转SsANS1基因烟草的获得及转基因烟草总黄酮和花色素苷的测定第116-118页
     ·彩叶草可能的花色素苷生物合成途径第118-119页
   ·讨论第119-121页
   ·小结第121-123页
 第五章 彩叶草MYB R2R3家族转录调控因子(SsMYB2和SsMYB3)的克隆及其在烟草中的表达第123-145页
   ·材料与试剂第123页
   ·方法第123-125页
     ·材料的准备、各个材料RNA和DNA的抽提和反转录第123页
     ·SsMYB基因保守片断扩增、测序与分析第123页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因cDNA 5’末端和3’末端扩增第123-124页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因全长cDNA及对应的基因组的扩增第124页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因的表达分析第124页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因的植物表达载体构建与对烟草的转化第124页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因的功能的初步验证第124-125页
   ·结果与分析第125-140页
     ·SsMYB基因保守区扩增与序列分析第125页
     ·SsMYB2基因和SsMYB3基因的克隆第125-127页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因的核酸序列和编码的蛋白分析第127-136页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因在红色彩叶草中的表达第136-138页
     ·SsMYB2和SsMYB3基因植物表达载体构建第138-139页
     ·转SsMYB2和SsMYB3基因烟草的获得与转基因烟草叶片总黄酮的测定第139-140页
   ·讨论第140-143页
   ·小结第143-145页
 第六章 总结第145-147页
   ·主要结论第145-146页
   ·主要创新点第146-147页
参考文献第147-160页
附录1 缩略词第160-161页
附录2 学习期间发表的论文和参加的科研项目第161-162页
致谢第162-163页

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