摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一部分 前言 | 第13-45页 |
1 香蕉枯萎病研究综述 | 第13-23页 |
·香蕉种植业在我国热区具有重要的经济地位 | 第13页 |
·香蕉枯萎病症状、病原菌及生理小种 | 第13-14页 |
·香蕉枯萎病的传播方式、分布及危害 | 第14-16页 |
·香蕉枯萎病菌遗传多态性研究 | 第16-17页 |
·香蕉枯萎病防治的研究 | 第17-23页 |
2 尖孢镰刀菌的遗传多态性研究 | 第23-31页 |
·尖孢镰刀菌的专化型、小种和营养体亲和群 | 第23-27页 |
·DNA 多态性与尖孢镰刀菌专化型中的 VCG、小种 | 第27-31页 |
3 丝状真菌的遗传转化系统 | 第31-43页 |
·研究概况 | 第31页 |
·选择标记和转化载体 | 第31-32页 |
·用于转化的DNA | 第32-33页 |
·原生质体的制备 | 第33页 |
·转化方法 | 第33-35页 |
·转化 DNA 在受体中的整合方式 | 第35-36页 |
·绿色荧光蛋白(GFP)在真菌研究中的应用 | 第36-43页 |
4 香蕉枯萎病研究中存在的问题,研究目的、意义、内容 | 第43-45页 |
第二部分 香蕉枯萎病菌遗传多态性研究 | 第45-65页 |
1 材料和方法 | 第45-54页 |
·香蕉枯萎病菌的生物学特性 | 第45-47页 |
·材料 | 第45页 |
·培养性状观察 | 第45页 |
·温度对病菌菌丝体生长的影响 | 第45页 |
·pH值对病菌菌丝体生长的影响 | 第45-46页 |
·碳源对病菌菌丝体生长的影响 | 第46页 |
·温度对分生孢子萌发的影响 | 第46页 |
·pH 值对分生孢子萌发的影响 | 第46-47页 |
·香蕉枯萎病菌的致病性及其 RAPD 分析 | 第47-51页 |
·材料 | 第47-48页 |
·致病性测定 | 第48-49页 |
·菌丝的培养 | 第49页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第49-50页 |
·扩增条件及产物分析 | 第50-51页 |
·海南香蕉枯萎病菌的营养亲和群 | 第51-54页 |
·材料 | 第51-52页 |
·培养基 | 第52页 |
·Nit 突变体(硝酸盐的营养突变体)的筛选 | 第52页 |
·Nit 突变体类型的鉴定 | 第52-53页 |
·亲和性测定 | 第53-54页 |
2 结果与分析 | 第54-65页 |
·香蕉枯萎病菌的生物学特性 | 第54-59页 |
·培养性状 | 第54-55页 |
·温度对病菌菌丝体生长的影响 | 第55页 |
·pH 值对病菌菌丝体生长的影响 | 第55-56页 |
·碳源对病菌菌丝体生长的影响 | 第56-57页 |
·温度对分生孢子萌发的影响 | 第57-58页 |
·pH 值对分生孢子萌发的影响 | 第58-59页 |
·香蕉枯萎病菌的致病性及其 RAPD 分析 | 第59-63页 |
·致病性测定 | 第59-60页 |
·随机引物PCR扩增结果 | 第60-61页 |
·聚类分析结果 | 第61-62页 |
·PCR 用于鉴定生理小种 | 第62页 |
·RAPD 分析结果与菌株所属的生理小种、菌株的地理来源、菌株的致病性之间的关系 | 第62-63页 |
·海南香蕉枯萎病菌的营养亲和群 | 第63-65页 |
·Nit 突变体的筛选和鉴定 | 第63页 |
·营养亲和性测定结果 | 第63-65页 |
第三部分 绿色荧光蛋白基因转化香蕉枯萎病菌的研究 | 第65-88页 |
1 材料和方法 | 第65-73页 |
·香蕉枯萎病菌原生质体形成与再生条件 | 第65-67页 |
·材料 | 第65页 |
·主要试剂 | 第65页 |
·培养基 | 第65页 |
·原生质的制备 | 第65-66页 |
·原生质体形成各条件试验的设计 | 第66页 |
·原生质体再生 | 第66-67页 |
·绿色荧光蛋白基因转化香蕉枯萎病菌 | 第67-73页 |
·菌株与质粒 | 第67页 |
·质粒pCT74 转化入大肠杆菌 | 第67-71页 |
·原生质体形成与再生 | 第71-72页 |
·菌株对潮霉素 B(Hm B)的敏感性测定 | 第72页 |
·DNA 操作与真菌转化 | 第72页 |
·转化子对潮霉素 B 的抗性水平分析 | 第72-73页 |
·转化子的荧光稳定性、菌落形态与菌丝生长速度 | 第73页 |
·转化子的PCR鉴定 | 第73页 |
·致病性测定 | 第73页 |
2 结果与分析 | 第73-88页 |
·香蕉枯萎病菌原生质体形成与再生条件 | 第73-80页 |
·菌丝菌龄对原生质体产量的影响 | 第73-74页 |
·酶浓度对原生质体产量的影响 | 第74-75页 |
·酶解时间对原生质体产量的影响 | 第75页 |
·酶解温度对原生质体产量的影响 | 第75-76页 |
·渗透压稳定剂种类对原生质体产量的影响 | 第76页 |
·不同浓度的 NaCl 渗稳剂对原生质体产量的影响 | 第76-77页 |
·原生质体形成方式的观察 | 第77-78页 |
·渗透压稳定剂对原生质体再生率的影响 | 第78-79页 |
·酶解时间对原生质体再生率的影响 | 第79页 |
·原生质体的再生观察 | 第79-80页 |
·绿色荧光蛋白基因转化香蕉枯萎病菌 | 第80-88页 |
·质粒pCT74 转化入大肠杆菌 | 第80-81页 |
·受体菌株对潮霉素的敏感性 | 第81-82页 |
·DNA转化 | 第82页 |
·转化子对潮霉素 B 的抗性水平 | 第82-84页 |
·转化子的荧光稳定性、菌落形态与菌丝生长速度 | 第84-86页 |
·转化子的 PCR 鉴定 | 第86-87页 |
·致病性测定 | 第87-88页 |
第四部分 结论与讨论 | 第88-96页 |
1 结论 | 第88-90页 |
2 讨论 | 第90-96页 |
·香蕉枯萎病菌的生物学特性 | 第90-91页 |
·香蕉枯萎病菌的生理小种、致病性及其 RAPD 分析 | 第91-92页 |
·海南香蕉枯萎病菌的营养亲和群 | 第92-94页 |
·香蕉枯萎病菌 PEG 介导转化系统 | 第94页 |
·绿色荧光蛋白基因转化香蕉枯萎病菌 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-112页 |
致谢 | 第112页 |