提要 | 第1-9页 |
英文缩写 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-31页 |
1 镉的理化性质 | 第10页 |
2 镉的生物效应 | 第10-11页 |
3 镉的心脏毒性 | 第11-13页 |
4 镉与DNA 损伤 | 第13-15页 |
5 镉与钙及钙调蛋白 | 第15-16页 |
6 镉与金属硫蛋白 | 第16-17页 |
7 镉与细胞凋亡 | 第17-31页 |
·凋亡的特征 | 第17-18页 |
·细胞凋亡的检测方法 | 第18-20页 |
·凋亡调控基因 | 第20-29页 |
·镉与心肌细胞凋亡 | 第29-31页 |
第二章 材料和方法 | 第31-45页 |
1 主要试剂及器材 | 第31-32页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·主要器材 | 第32页 |
2 主要仪器 | 第32-33页 |
3 细胞培养 | 第33-35页 |
·细胞株 | 第33页 |
·培养液配制 | 第33-34页 |
·血清保存 | 第34页 |
·D-Hank’s 液的配制 | 第34页 |
·胰酶的配制 | 第34页 |
·培养方法 | 第34-35页 |
·细胞冻存 | 第35页 |
4 细胞生物学方法 | 第35-37页 |
·MTT 法检测细胞存活率 | 第35页 |
·AO/EB 染色法检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
·FCM 检测细胞凋亡 | 第36页 |
·单细胞凝胶电泳法检测DNA 损伤 | 第36-37页 |
5 免疫细胞化学法检测蛋白表达 | 第37-38页 |
6 分子生物学方法 | 第38-44页 |
·细胞总蛋白的提取及定量 | 第38-40页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第40-41页 |
·Western 印迹 | 第41-42页 |
·封闭 | 第42页 |
·抗体孵育 | 第42页 |
·DAB 显色 | 第42页 |
·细胞总RNA 提取 | 第42-43页 |
·RNA 的定量 | 第43页 |
·引物设计及合成 | 第43页 |
·RT-PCR 检测基因mRNA 水平表达 | 第43-44页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
7 统计学方法 | 第44-45页 |
第三章 结果 | 第45-62页 |
1 细胞存活率检测 | 第45-47页 |
2 细胞DNA 损伤情况 | 第47-51页 |
3 AO/EB 染色法检测细胞凋亡 | 第51-53页 |
4 FCM 检测细胞凋亡 | 第53-55页 |
5 PARP 活性的检测 | 第55页 |
6 凋亡相关基因蛋白表达变化 | 第55-60页 |
·Bcl-2、Bax 蛋白表达变化 | 第55-57页 |
·Cyt c 蛋白表达变化 | 第57-58页 |
·caspase - 9 蛋白表达变化 | 第58-59页 |
·AIF 蛋白表达变化 | 第59-60页 |
7 Bcl-2 基因mRNA 水平表达变化 | 第60-62页 |
第四章 讨论 | 第62-69页 |
1 CdCl_2 对大鼠心肌细胞H9c2 的毒性作用 | 第62-63页 |
2 CdCl_2 引起大鼠心肌细胞H9c2 DNA 损伤 | 第63-64页 |
3 CdCl_2 导致大鼠心肌细胞H9c2 细胞凋亡 | 第64-65页 |
4 CdCl_2 引起凋亡相关基因蛋白表达变化 | 第65-66页 |
5 CdCl_2 引起H9c2 细胞凋亡的分子机制探讨 | 第66-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-87页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第87-88页 |
中文摘要 | 第88-92页 |
Abstract | 第92-97页 |
致谢 | 第97页 |