| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| ·干扰素生物学特性研究进展 | 第10-12页 |
| ·干扰素的产生与诱导 | 第10-11页 |
| ·IFN-γ的分子结构与生物学作用 | 第11-12页 |
| ·IFN抑制病毒复制的作用机理 | 第12页 |
| ·IFN的应用和发展趋势 | 第12页 |
| ·干扰素-Γ体外表达与复性 | 第12-18页 |
| ·包涵体的性质 | 第13页 |
| ·包涵体的形成 | 第13-14页 |
| ·包涵体的分离 | 第14页 |
| ·包涵体的溶解 | 第14-15页 |
| ·蛋白质的复性机理 | 第15-16页 |
| ·包涵体蛋白质体外折叠复性方法 | 第16-17页 |
| ·重组干扰素-γ复性过程的检测方法 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·犬干扰素-γ活性测定的主要材料 | 第19页 |
| ·蛋白浓度测定的主要试剂 | 第19页 |
| ·包涵体的洗涤液和溶解液 | 第19-20页 |
| ·包涵体复性主要试剂 | 第20页 |
| ·细菌培养液 | 第20页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第21-22页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第22页 |
| ·包涵体的制备 | 第22-23页 |
| ·包涵体的粗提 | 第23页 |
| ·包涵体溶解蛋白的稀释复性 | 第23-24页 |
| ·分析方法 | 第24-25页 |
| ·结果计算 | 第25页 |
| ·重组犬干扰素-γ活性测定 | 第25-27页 |
| 3 结果 | 第27-36页 |
| ·细胞超声波破碎的适合的超声次数和功率 | 第27页 |
| ·重组犬干扰素-Γ包涵体的洗涤和溶解 | 第27-28页 |
| ·重组犬干扰素-Γ包涵体的稀释复性 | 第28-33页 |
| ·折叠促进剂对犬干扰素-γ的复性影响及抗病毒活性 | 第29-30页 |
| ·脉冲加样对重组犬干扰素-γ复性的影响 | 第30-31页 |
| ·温度对重组犬干扰素-γ复性的影响 | 第31页 |
| ·pH值对重组犬干扰素-γ包涵体变性蛋白复性的影响 | 第31-32页 |
| ·NaCl浓度对重组犬干扰素-γ复性的影响 | 第32-33页 |
| ·重组犬干扰素-Γ活力测定及计算 | 第33-36页 |
| ·VSV病毒TCID_(50)测定结果 | 第33页 |
| ·BSA标准曲线的绘制 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| ·犬干扰素-Γ包涵体提取方法的优化 | 第36页 |
| ·犬干扰素-Γ活力测定方法的建立 | 第36-37页 |
| ·重组犬干扰素-Γ复性条件的探讨 | 第37-38页 |
| ·复性折叠促进剂的选择 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第45页 |