| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 绪论 | 第8-22页 |
| ·MGLUR5 简介 | 第8-11页 |
| ·mGluR5 的结构特征 | 第9-10页 |
| ·mGluR5 的分布和功能 | 第10-11页 |
| ·GRKS 简介 | 第11-13页 |
| ·GPCRS 失敏机制 | 第13-18页 |
| ·典型的GPCRs 失敏模型 | 第13-15页 |
| ·GRKs 介导的非磷酸化依赖的GPCRs 失敏 | 第15页 |
| ·GRK2 介导m GluR1 非磷酸化依赖的失敏 | 第15-17页 |
| ·mGluR1 的内吞 | 第17-18页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第18-22页 |
| 2 主要实验技术原理 | 第22-28页 |
| ·定点突变 | 第22-23页 |
| ·细胞转染 | 第23-24页 |
| ·ELISA | 第24-25页 |
| ·WESTERN BLOT | 第25-26页 |
| ·IP_3 检测 | 第26-27页 |
| ·数据处理 | 第27-28页 |
| 3 实验方法及材料 | 第28-46页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验流程 | 第29-46页 |
| ·突变体GRK2-K220R 构建 | 第29页 |
| ·突变体mGluR5-de1847-T840A 构建 | 第29-30页 |
| ·全长和5 种带有HA 抗原标记，分别包含不同功能域的GRK2 剪切体的构建 | 第30-31页 |
| ·分子生物学实验试剂、工具酶及试剂盒 | 第31页 |
| ·分子生物学实验操作 | 第31-38页 |
| ·细胞的复苏、传代、电穿孔转染 | 第38-39页 |
| ·ELISA 检测膜表达量 | 第39-40页 |
| ·Westen Blot | 第40-43页 |
| ·IP_3 检测 | 第43-46页 |
| 4 实验结果 | 第46-57页 |
| ·质粒构建结果 | 第46-50页 |
| ·突变体GRK2-K220R 构建结果 | 第46-47页 |
| ·突变体mGluR5-de1847-T840A 的构建结果 | 第47-48页 |
| ·带有HA 抗原标记、包含不同功能域的GRK2 剪切体构建 | 第48-50页 |
| ·功能检测结果 | 第50-57页 |
| ·GRK2 介导m GluR5 失敏的证实 | 第50-51页 |
| ·GRK2 介导的m GluR5 失敏不能归结于受体数量变化 | 第51-52页 |
| ·GRK2 介导的m GluR5 失敏是非磷酸化依赖的 | 第52-55页 |
| ·不同功能域的GRK2 剪切体在HEK293 细胞中的表达 | 第55-57页 |
| 5 讨论和展望 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录1 硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
| 附录2 主要符号和缩略词表 | 第67页 |
