| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略语表 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-41页 |
| ·虹彩病毒的特性和分类 | 第14-17页 |
| ·虹彩病毒形态特征 | 第14页 |
| ·虹彩病毒的理化性质 | 第14-16页 |
| ·虹彩病毒分类 | 第16页 |
| ·虹彩病毒的核酸 | 第16-17页 |
| ·虹彩病毒的复制周期 | 第17-27页 |
| ·病毒的吸附和进入 | 第17-18页 |
| ·病毒DNA 的复制 | 第18-19页 |
| ·病毒的转录 | 第19-23页 |
| ·转录时序及转录量控制 | 第19-20页 |
| ·病毒mRNA 的甲基化 | 第20-21页 |
| ·病毒蛋白在转录中的作用 | 第21-22页 |
| ·转录调控序列 | 第22-23页 |
| ·病毒的蛋白合成 | 第23-26页 |
| ·表达时序及调控 | 第23-25页 |
| ·病毒蛋白在宿主细胞的定位 | 第25-26页 |
| ·病毒的装配与释放 | 第26-27页 |
| ·虹彩病毒与宿主细胞的相互作用 | 第27-36页 |
| ·病毒感染对宿主细胞大分子合成的抑制 | 第27-28页 |
| ·病毒感染对宿主细胞结构的影响 | 第28-29页 |
| ·病毒感染与细胞凋亡 | 第29-36页 |
| ·细胞凋亡 | 第29-30页 |
| ·病毒感染诱导细胞凋亡 | 第30-32页 |
| ·病毒感染抑制细胞凋亡 | 第32-33页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第33-36页 |
| ·虹彩病毒功能基因研究 | 第36-39页 |
| ·核酸代谢相关基因 | 第37-38页 |
| ·转录及翻译调控基因 | 第38页 |
| ·病毒与宿主相互作用基因 | 第38-39页 |
| ·结构蛋白基因及其它基因 | 第39页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
| 第二章 RGV 3β-HSD 基因的克隆及特征分析 | 第41-72页 |
| ·前言 | 第41-42页 |
| ·材料与方法 | 第42-55页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·病毒扩增及提纯 | 第42-43页 |
| ·负染电镜检测 | 第43页 |
| ·病毒DNA 的提取 | 第43-44页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·基因克隆 | 第44-45页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA 的回收 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒转化 | 第46页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第46-47页 |
| ·逆转录反应 | 第47页 |
| ·5’-RACE | 第47-50页 |
| ·计算机辅助分析 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的构建 | 第51页 |
| ·原核表达 | 第51-52页 |
| ·真核转染 | 第52-53页 |
| ·亚细胞定位 | 第53页 |
| ·转录时序分析 | 第53-54页 |
| ·药物抑制实验 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-69页 |
| ·提纯病毒的电镜观察 | 第55页 |
| ·RGV 3β-HSD 基因序列的确定 | 第55-56页 |
| ·RGV 3β-HSD 基因的转录起始位点 | 第56页 |
| ·氨基酸序列比对及系统进化分析 | 第56-57页 |
| ·不同原核表达载体对RGV 3β-HSD 的表达 | 第57-62页 |
| ·RGV 3β-HSD 基因属于立即早期病毒基因 | 第62-64页 |
| ·RGV 3β-HSD 定位于线粒体 | 第64-66页 |
| ·LCDV-C 3β-HSD 基因的克隆及原核表达 | 第66-68页 |
| ·LCDV-C 3β-HSD 的亚细胞定位 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| 第三章 过量表达 RGV 3β-HSD 的功能分析 | 第72-91页 |
| ·前言 | 第72-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-77页 |
| ·病毒与细胞培养 | 第74页 |
| ·重组质粒的构建 | 第74页 |
| ·稳定转染细胞的筛选 | 第74-75页 |
| ·细胞生长曲线 | 第75页 |
| ·病毒空斑实验 | 第75页 |
| ·病毒生长曲线 | 第75-76页 |
| ·MTT 实验 | 第76页 |
| ·流式细胞术检测凋亡 | 第76-77页 |
| ·细胞DNA 的提取 | 第77页 |
| ·统计分析 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-88页 |
| ·稳定转染细胞的筛选及鉴定 | 第77-78页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 对宿主细胞的作用 | 第78-79页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 对病毒复制的影响 | 第79页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 抑制RGV 引起的CPE | 第79-80页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 抑制RGV 引起的细胞死亡 | 第80-82页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 抑制SMRV 引起的细胞死亡 | 第82-83页 |
| ·过量表达RGV 3β-HSD 抑制SMRV 诱导的细胞凋亡 | 第83-86页 |
| ·流式细胞术分析SMRV 诱导的细胞凋亡 | 第86-88页 |
| ·讨论 | 第88-91页 |
| 第四章 RGV PCNA 基因的克隆及特征分析 | 第91-115页 |
| ·前言 | 第91-93页 |
| ·材料与方法 | 第93-100页 |
| ·细胞培养 | 第93页 |
| ·病毒扩增提纯及DNA 的制备 | 第93页 |
| ·引物设计 | 第93-94页 |
| ·基因克隆 | 第94-95页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA 的回收 | 第95页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒转化 | 第95页 |
| ·细胞总RNA 的提取及逆转录反应 | 第95页 |
| ·计算机辅助分析 | 第95页 |
| ·重组质粒的构建 | 第95-96页 |
| ·原核表达 | 第96页 |
| ·融合蛋白的亲和纯化 | 第96-97页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第97-98页 |
| ·真核转染 | 第98页 |
| ·亚细胞定位 | 第98页 |
| ·转录及翻译时序分析 | 第98-99页 |
| ·药物抑制实验 | 第99-100页 |
| ·Western blotting | 第100页 |
| ·结果与分析 | 第100-112页 |
| ·RGV PCNA 基因序列的确定 | 第100-102页 |
| ·氨基酸序列比对及系统进化分析 | 第102-105页 |
| ·原核表达 | 第105页 |
| ·转录及翻译时序分析 | 第105-107页 |
| ·RGV PCNA 属于晚期病毒基因 | 第107-109页 |
| ·亚细胞定位研究 | 第109-112页 |
| ·讨论 | 第112-115页 |
| 总结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-137页 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138页 |
