| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1. 引言 | 第14-28页 |
| ·人偏肺病毒的研究进展 | 第14-17页 |
| ·HMPV 的病原学和分子生物学特点 | 第14-15页 |
| ·HMPV 的流行病学 | 第15页 |
| ·HMPV 感染的临床表现 | 第15-16页 |
| ·HMPV 感染的实验室诊断 | 第16页 |
| ·HMPV 感染的治疗 | 第16-17页 |
| ·禽偏肺病毒的研究进展 | 第17-27页 |
| ·AMPV 的病原学 | 第17-19页 |
| ·AMPV 的病原分类 | 第17-18页 |
| ·AMPV 的形态学 | 第18页 |
| ·AMPV 的理化特性 | 第18页 |
| ·AMPV 的基因组成 | 第18-19页 |
| ·AMPV 的复制 | 第19页 |
| ·AMPV 的流行病学 | 第19-20页 |
| ·AMPV 的自然宿主及易感动物 | 第19页 |
| ·AMPV 的传播途径 | 第19-20页 |
| ·AMPV 的分布 | 第20页 |
| ·AMPV 的致病性 | 第20-21页 |
| ·AMPV 感染的临床症状 | 第21页 |
| ·AMPV 感染的病理学研究 | 第21-22页 |
| ·AMPV 感染的免疫学研究 | 第22-23页 |
| ·AMPV 感染的诊断 | 第23-26页 |
| ·AMPV 感染的预防 | 第26页 |
| ·AMPV 感染的治疗 | 第26-27页 |
| ·本课题研究的内容、目的和意义 | 第27-28页 |
| 2. 材料和方法 | 第28-45页 |
| ·材料 | 第28-31页 |
| ·病毒和菌种 | 第28页 |
| ·仪器和设备 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要溶液的配制 | 第29-31页 |
| ·斑点杂交试剂 | 第29页 |
| ·培养基及IPTG | 第29-30页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）试剂 | 第30页 |
| ·蛋白纯化试剂 | 第30页 |
| ·WESTERN BLOT 试剂 | 第30-31页 |
| ·间接ELISA 主要试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-45页 |
| ·禽偏肺病毒RT-PCR 检测方法的建立及应用 | 第31-34页 |
| ·引物的设计合成 | 第31页 |
| ·组织中RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·目的基因的获得 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第32页 |
| ·目的基因的回收 | 第32-33页 |
| ·目的基因的克隆测序 | 第33页 |
| ·特异性试验 | 第33-34页 |
| ·敏感性试验 | 第34页 |
| ·RT-PCR 检测方法的应用 | 第34页 |
| ·F 基因的序列分析 | 第34页 |
| ·禽偏肺病毒核酸探针检测方法的建立与应用 | 第34-36页 |
| ·核酸的定量 | 第34页 |
| ·探针的标记 | 第34页 |
| ·敏感性试验 | 第34-35页 |
| ·特异性试验 | 第35页 |
| ·核酸探针的应用 | 第35-36页 |
| ·禽偏肺病毒间接ELISA 检测方法的建立及应用 | 第36-45页 |
| ·G 蛋白的原核表达及纯化 | 第36-42页 |
| ·引物设计合成 | 第36页 |
| ·疫苗毒RNA 的提取 | 第36页 |
| ·目的基因的获得 | 第36-37页 |
| ·目的基因的酶切与回收 | 第37-38页 |
| ·质粒载体的酶切与回收 | 第38-39页 |
| ·重组质粒PET-32A(+)-ATTACHMENT( G)的获得 | 第39页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE 样品的制备 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE | 第40-41页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第41页 |
| ·融合蛋白的可溶性鉴定 | 第41页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第41页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
| ·WESTERN BLOT 检测 | 第42页 |
| ·间接ELISA 条件的优化 | 第42-44页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第42-43页 |
| ·包被液的选择 | 第43页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第43页 |
| ·封闭液的选择 | 第43页 |
| ·最佳封闭时间的选择 | 第43页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第43页 |
| ·酶标二抗稀释度的选择 | 第43页 |
| ·酶标二抗作用时间的选择 | 第43-44页 |
| ·底物最佳反应时间的确定 | 第44页 |
| ·间接ELISA 操作程序及结果的判定 | 第44页 |
| ·间接ELISA 操作程序 | 第44页 |
| ·CUT-OFF值的确定 | 第44页 |
| ·特异性试验 | 第44页 |
| ·重复性试验 | 第44-45页 |
| ·间接ELISA 的初步应用 | 第45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-61页 |
| ·禽偏肺病毒RT-PCR 检测方法的建立与应用 | 第45-49页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第45页 |
| ·RT-PCR 产物的克隆和序列测定 | 第45-46页 |
| ·特异性试验 | 第46页 |
| ·敏感性试验 | 第46页 |
| ·RT-PCR 方法的初步应用 | 第46-47页 |
| ·F 基因的序列分析 | 第47-49页 |
| ·禽偏肺病毒核酸探针检测方法的建立及应用 | 第49-51页 |
| ·灵敏性试验 | 第49页 |
| ·特异性试验 | 第49页 |
| ·核酸探针的初步应用 | 第49-51页 |
| ·RT-PCR 方法与核酸探针方法的对比 | 第51页 |
| ·禽偏肺病毒间接ELISA 检测方法的建立及应用 | 第51-61页 |
| ·G 基因的PCR 结果 | 第51页 |
| ·目的基因的克隆鉴定及分析 | 第51-52页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第52页 |
| ·蛋白原核表达条件的优化 | 第52-53页 |
| ·蛋白的可溶性分析 | 第53页 |
| ·蛋白的纯化及浓度测定 | 第53页 |
| ·WESTERN BLOT 鉴定 | 第53-54页 |
| ·间接ELISA 条件的优化 | 第54-58页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第54页 |
| ·包被液的选择 | 第54-55页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第55页 |
| ·封闭液的选择 | 第55页 |
| ·最佳封闭时间的选择 | 第55-56页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第56页 |
| ·酶标二抗稀释度的选择 | 第56-57页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间的选择 | 第57页 |
| ·底物最佳反应时间的确定 | 第57-58页 |
| ·间接ELISA 临界值的确定及结果的判定 | 第58页 |
| ·间接ELISA 的重复性试验 | 第58-59页 |
| ·板内重复性试验 | 第58页 |
| ·板间重复性试验 | 第58-59页 |
| ·间接ELISA 的特异性试验 | 第59页 |
| ·比较试验 | 第59-60页 |
| ·间接ELISA 的初步应用 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-65页 |
| ·禽偏肺病毒RT-PCR 检测方法的建立及应用 | 第61页 |
| ·禽偏肺病毒核酸探针检测方法的建立及应用 | 第61-62页 |
| ·禽偏肺病毒间接ELISA 检测方法的建立及应用 | 第62-65页 |
| ·禽偏肺病毒ATTACHMENT (G)蛋白的原核表达 | 第62-63页 |
| ·禽偏肺病毒间接ELISA 检测方法的建立及应用 | 第63-65页 |
| 5. 结论 | 第65-66页 |
| 6. 参考文献 | 第66-75页 |
| 7. 致谢 | 第75-76页 |
| 8. 硕士期间发表论文情况 | 第76-77页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第77页 |