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转淀粉相关基因水稻的稻米品质研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
符号说明第9-10页
第一部分 文献综述第10-23页
   ·稻米胚乳淀粉及稻米品质的评价第10-12页
     ·胚乳淀粉的组成第10页
     ·胚乳淀粉的结构第10-11页
     ·稻米品质的主要评价指标第11-12页
   ·水稻淀粉合成关键酶第12-16页
     ·ADPG 焦磷酸化酶(ADPGlc pyrophosphorylase,AGP)第13-14页
     ·淀粉合成酶(Starch synthase,SS)第14-15页
     ·淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)第15页
     ·淀粉去分支酶(Starch debranching enzyme,DBE)第15-16页
     ·其他影响水稻淀粉合成的突变体第16页
   ·转基因技术改良稻米淀粉品质的研究进展第16-21页
     ·反义RNA 技术第16-17页
     ·RNAi 的原理及应用第17-19页
     ·转基因技术研究水稻淀粉合成基因功能及改良稻米品质第19-21页
       ·转反义AGP 基因第19页
       ·转反义Wx 基因第19-20页
       ·转其他反义基因第20-21页
   ·本研究的目的及研究内容第21-23页
     ·本研究的背景及意义第21-22页
     ·主要研究内容第22-23页
第二部分 农杆菌介导法将与淀粉合成有关的基因导入水稻第23-44页
   ·前言第23-24页
   ·材料与方法第24-30页
     ·实验材料第24页
     ·转化水稻所用的菌株及载体第24页
     ·培养基第24-26页
       ·细菌用YEP 培养基第24-25页
       ·水稻转化培养基第25-26页
         ·水稻愈伤组织培养基第25页
         ·农杆菌侵染水稻愈伤组织AAM 培养基第25页
         ·水稻外植体共培养基第25页
         ·选择分化培养基第25-26页
     ·水稻愈伤组织的诱导及培养第26页
       ·转化受体的准备第26页
       ·愈伤组织的诱导及继代培养第26页
     ·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻遗传转化第26-27页
       ·根癌农杆菌的培养第26-27页
       ·水稻受体材料的侵染及其与根癌农杆菌的共培养第27页
       ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生第27页
     ·转基因植株PCR 分子检测第27-29页
       ·水稻植株叶片总DNA 的提取第27页
       ·PCR 扩增第27-28页
       ·电泳检测第28-29页
     ·转基因植株后代的遗传分析及纯系筛选第29-30页
       ·转基因植株T1代的遗传分析第29-30页
       ·纯系筛选第30页
   ·结果与分析第30-42页
     ·水稻的转化第30-31页
       ·愈伤组织的诱导与继代第30页
       ·转基因植株的获得第30-31页
       ·转化效率分析第31页
     ·转基因植株T0代的PCR 检测第31-40页
     ·转基因植株T1代的遗传分析第40-42页
     ·转基因T2代种子发芽并筛选纯合株系第42页
   ·小结与讨论第42-44页
     ·农杆菌介导的遗传转化第42-43页
     ·转基因植株及其后代的检测分析第43页
     ·纯合株系的筛选第43-44页
第三部分 纯合转基因水稻株系的品质分析第44-54页
   ·前言第44页
   ·材料与方法第44-45页
     ·水稻成熟种子中直链淀粉含量(AC)的测定第44-45页
     ·糊化温度的测定第45页
     ·胶稠度的测定第45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·转反义SBE 基因植株后代成熟种子(T代)的品质分析第45-47页
     ·转SSII 干扰结构基因植株后代成熟种子(T2代)的品质分析第47-48页
     ·转Wx 干扰结构基因植株后代成熟种子(T2代)的品质分析第48-50页
     ·转SSI 干扰结构基因植株后代成熟种子(T2代)的品质分析第50页
     ·转Pull 干扰结构基因植株后代成熟种子(T2代)的品质分析第50-51页
   ·小结与讨论第51-54页
     ·外源目的基因在受体植株内的表达第51-52页
     ·转基因植株后代的直链淀粉含量分析第52页
     ·直链淀粉含量改变后对其他稻米特性的影响第52-54页
下一步工作第54-55页
参考文献第55-60页
附录1 本试验所用的双元载体(示T-DNA 区的结构)第60-62页
附录2 水稻叶片总DNA 小量提取法第62-63页
附录3 DNA 提取缓冲液的配制第63-64页
附录4 本试验中使用缓冲液的配制第64-65页
附录5 TAQ 酶的制备第65-66页
致谢第66页

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