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养殖牙鲆肿瘤抑制基因p53的克隆及与淋巴囊肿病关系的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-12页
第一章 文献综述第12-28页
 1. 关于致癌基因和抑癌基因第12-13页
 2 p53 基因研究概况第13-25页
   ·p53 的结构第14-15页
   ·p53 的功能第15-16页
     ·p53与细胞周期调控第15页
     ·p53 与细胞凋亡第15-16页
   ·p53基因在几种肿瘤中的表达与意义第16-17页
     ·喉鳞状细胞癌(LSCC)第16页
     ·肺癌第16页
     ·肝细胞癌(HCC)第16-17页
     ·大肠癌第17页
   ·p53 的失活机理第17-19页
     ·p53 与蛋白质的相互作用第17页
     ·p53 基因突变第17-18页
     ·p53 突变与肿瘤第18-19页
   ·p53基因多态性与肿瘤第19-23页
     ·基因多态性概念第19-20页
     ·p53多态性类型第20页
     ·关于第72位密码子多态性的研究第20-21页
     ·第三内含子与第六内含子的多态性第21-23页
   ·基因多态性检测方法第23-25页
     ·建立在PCR 基础上的检测方法第23页
     ·基于构象变化的检测方法第23页
     ·基于多态性对核酸分子杂交影响的检测方法第23-24页
     ·基于测序技术的检测技术第24-25页
 3. 鱼类p53基因研究概述第25-26页
 4. 牙鲆淋巴囊肿病研究概述第26-27页
 5. 本研究的内容和意义第27-28页
第二章 牙鲆p53 基因cDNA 克隆与组织表达第28-46页
 前言第28页
 1. 材料与方法第28-37页
   ·材料第28-29页
   ·RNA 的提取第29页
   ·cDNA 的合成第29-30页
   ·牙鲆p53 基因核心区域的克隆第30-32页
   ·3’RACE第32-33页
   ·5’RACE第33-35页
     ·RNA 的提取第33页
     ·cDNA 第一链的合成第33-34页
     ·PCR扩增第34-35页
   ·序列分析第35-36页
   ·组织表达研究第36-37页
 2. 结果第37-44页
   ·牙鲆RNA的提取结果第37页
   ·牙鲆p53基因的克隆结果第37-40页
   ·牙鲆p53 基因编码蛋白质疏水性分析第40-41页
   ·牙鲆p53 基因编码蛋白质的结构分析第41-43页
   ·几种p53 氨基酸序列的进化分析第43页
   ·p53 基因组织表达检测结果第43-44页
 3. 讨论第44-46页
第三章 牙鲆p53 基因的克隆与结构分析第46-60页
 前言第46页
 1. 材料与方法第46-49页
   ·材料第46-47页
   ·牙鲆肌肉组织基因组提取第47页
   ·基因克隆第47-49页
     ·引物设计第47-48页
     ·PCR扩增第48-49页
 2. 结果第49-58页
   ·牙鲆肌肉组织DNA的电泳结果第49页
   ·牙鲆p53基因组扩增结果第49-50页
   ·牙鲆p53基因组序列第50-56页
   ·牙鲆p53基因结构分析第56-58页
   ·牙鲆p53 蛋白5 个高度保守区域在基因组上的位置分析第58页
 3. 讨论第58-60页
第四章 牙鲆p53 基因多态性及与淋巴囊肿病关系的研究第60-71页
 前言第60-61页
 1. 材料与方法第61-64页
   ·材料第61页
   ·DNA 提取第61页
   ·淋巴囊肿病毒的检测第61-62页
   ·牙鲆p53 基因限制性酶切位点多态性检测第62-64页
     ·健康鱼与病鱼的BglⅡ酶切位点多态性检测第62-63页
     ·样品多态性序列测定第63-64页
   ·序列分析第64页
   ·统计学处理第64页
 2. 结果第64-69页
   ·淋巴囊肿病毒检测结果第64页
   ·扩增获得的健康牙鲆p53 基因组部分序列第64-65页
   ·BglⅡ酶切位点多态性类型第65-66页
   ·A和a型等位基因在患病和健康牙鲆中的基因频率分布第66页
   ·A和a型等位基因在患病牙鲆肌肉和瘤组织中中的基因频率分布第66-67页
   ·A和a型等位基因外显子序列分析第67-68页
   ·A和a型等位基因的内含子序列分析第68-69页
 3. 讨论第69-71页
参考文献第71-77页
发表文章第77-78页
致谢第78页

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