嗜热菌糖苷酶基因LacS牛乳腺特异性表达载体的构建、转染及鉴定
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-17页 |
| ·乳腺生物反应器的相关研究及进展 | 第7页 |
| ·乳腺生物反应器的相关研究 | 第7页 |
| ·乳腺生物反应器的研究进展 | 第7页 |
| ·乳腺特异性表达载体 | 第7-11页 |
| ·乳腺特异性表达载体的构件 | 第8-9页 |
| ·常用的乳蛋白调控序列 | 第9-10页 |
| ·外源基因的选择 | 第10-11页 |
| ·应用乳蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体 | 第11-13页 |
| ·乳腺生物反应器质粒表达载体 | 第11-12页 |
| ·乳腺生物反应器人工染色体表达载体 | 第12-13页 |
| ·乳腺生物反应器基因打靶表达载体 | 第13页 |
| ·乳腺生物反应器表达载体构建合理性和有效性的检测 | 第13-14页 |
| ·转基因小鼠表达 | 第13页 |
| ·乳腺瞬时表达 | 第13-14页 |
| ·乳腺细胞表达 | 第14页 |
| ·乳腺表达动物的选择 | 第14-15页 |
| ·乳腺生物反应器的应用 | 第15页 |
| ·生产生物医药 | 第15页 |
| ·改变乳汁成分，提高营养价值 | 第15页 |
| ·乳腺生物反应器的产业化进展 | 第15-17页 |
| ·国外产业化进展 | 第16页 |
| ·国内产业化进展 | 第16-17页 |
| ·乳腺生物反应器存在的问题 | 第17页 |
| ·乳腺生物反应的前景展望 | 第17页 |
| 2 实验一乳腺特异性表达载体的构建及酶切鉴定 | 第17-42页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·实验仪器、耗材 | 第17-18页 |
| ·实验用料 | 第18页 |
| ·酶和试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·PCR 模板的制备 | 第19-21页 |
| ·PCR 扩增及胶回收目的片段 | 第21页 |
| ·构建克隆载体及质粒的扩繁 | 第21-23页 |
| ·克隆载体酶切鉴定及胶回收 | 第23-24页 |
| ·pBL 表达载体的构建 | 第24-27页 |
| ·实验结果 | 第27-38页 |
| ·PCR 扩增产物检测及克隆载体的酶切鉴定 | 第27-35页 |
| ·重构表达载体的酶切鉴定 | 第35-38页 |
| ·实验讨论 | 第38-41页 |
| ·载体构建简图 | 第41-42页 |
| 3 实验二 pBL 转染及鉴定 | 第42-58页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·实验仪器、耗材 | 第42页 |
| ·实验用料 | 第42页 |
| ·酶和试剂 | 第42-44页 |
| ·实验方法 | 第44-50页 |
| ·pBL 转染奶牛乳腺上皮细胞及鉴定 | 第44-47页 |
| ·pBL 转染蒙古牛胎儿皮肤成纤维细胞及鉴定 | 第47-50页 |
| ·实验结果 | 第50-56页 |
| ·转基因奶牛乳腺上皮细胞的鉴定 | 第50-53页 |
| ·转基因蒙古牛胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第53-56页 |
| ·实验讨论 | 第56-58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
