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交链孢菌激活蛋白激发水稻的应答基因与抗病性分析

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-15页
第一章 文献综述第15-41页
   ·激发子概述第15-20页
     ·激发子的定义第15页
     ·激发子分类第15-19页
     ·激发子诱导的系统性获得抗性第19-20页
   ·激发子在系统性获得抗性中诱导发生的早期事件第20-28页
     ·GTP结合蛋白的激活第21-22页
     ·离子流和Ca~(2+)信号传导第22-23页
     ·胞外碱化和胞质酸化第23页
     ·活性氧猝发第23-24页
     ·蛋白质磷酸化和去磷酸化第24页
     ·1,4,5-三磷酸肌醇和环核苷酸及NO的快速产生第24-25页
     ·防御基因的表达第25-26页
     ·病程相关蛋白和次生代谢物积累第26-28页
   ·激发子诱导的系统性获得抗性中的信号转导途径第28-36页
     ·SA信号转导第28-30页
     ·JA信号转导第30-31页
     ·乙烯信号转导第31-33页
     ·抗病信号转导途径间的交叉作用第33-34页
     ·多条信号途径经转录因子的整合第34-35页
     ·信号组分通过蛋白质磷酸化和去磷酸化连结第35-36页
   ·抗病防御和信号转导相关基因在抗病基因工程中应用第36-38页
     ·干扰治病机理的策略第36-37页
     ·利用抗病基因和过敏反应的策略第37-38页
     ·利用信号转导途径的基因工程第38页
   ·研究背景和意义第38-39页
   ·试验设计第39-41页
第二章 交链孢菌激活蛋白诱发水稻幼苗对稻瘟菌的抗性第41-52页
   ·材料与方法第41-44页
     ·材料第41页
     ·化学试剂与药品第41页
     ·交链孢菌激活蛋白的制备与纯化第41-42页
     ·稻瘟菌孢子悬浮液的制备第42页
     ·水稻处理第42页
     ·H_2O_2和O_2~-含量的测定第42页
     ·PAL、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶活性测定第42-43页
     ·基因表达水平的检测第43-44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·交链孢菌激活蛋白对H_2O_2含量的影响第44-45页
     ·交链孢菌激活蛋白对O_2~-含量的影响第45页
     ·交链孢菌激活蛋白对PAL酶活性的影响第45-46页
     ·交链孢菌激活蛋白对β-1,3-葡聚糖酶活性的影响第46页
     ·交链孢菌激活蛋白对几丁质酶活性的影响第46-47页
     ·交链孢菌激活蛋白对水稻幼苗抗稻瘟病的影响第47页
     ·交链孢菌激活蛋白对抗病信号转导途径关键组分转录水平的影响第47-48页
   ·讨论第48-51页
     ·交链孢菌激活蛋白对水稻幼苗活性氧含量的影响第48-49页
     ·交链孢菌激活蛋白对水稻幼苗抗病防御相关酶活性的影响第49页
     ·交链孢菌激活蛋白对水稻抗病信号转导途径相关组分转录水平的影响第49-51页
 小结第51-52页
章三章 交链孢菌激活蛋白激发的水稻差异表达基因第52-71页
   ·材料与方法第52-55页
     ·材料第52页
     ·主要试剂和药品第52页
     ·交链孢菌激活蛋白的制备与纯化第52-53页
     ·蛋白激发子处理水稻叶片第53页
     ·总RNA的提取第53页
     ·水稻cDNA文库的构建和cDNA芯片分析第53页
     ·序列分析第53页
     ·半定量RT-PCR分析第53-54页
     ·Northern印迹杂交第54-55页
   ·结果与分析第55-66页
     ·cDNA芯片鉴定交链孢菌激活蛋白激发的水稻差异表达基因第55-56页
     ·差异表达基因的鉴定与功能分类第56-63页
     ·10个信号转导和防御相关基因的序列分析第63-64页
     ·10个信号转导和防御相关基因的半定量RT-PCR分析第64-66页
     ·差异表达基因OsAiDG3和OsAiDG4基因的Northern杂交分析第66页
   ·讨论第66-70页
     ·cDNA芯片鉴定交链孢菌激活蛋白激发的水稻差异表达基因第66-67页
     ·抗病防御相关基因的差异表达第67-68页
     ·半定量PCR和Northern杂交验证cDNA芯片结果第68-70页
 小结第70-71页
第四章 差异表达基因OsAiDG3和OsAiDG4的克隆与原核表达第71-88页
   ·材料与方法第71-75页
     ·材料与培养第72页
     ·化学试剂与药品第72页
     ·总RNA提取和cDNA合成第72页
     ·全长基因的获得第72-73页
     ·目的基因的原核表达第73-74页
     ·表达蛋白的SDS-PAGE检测第74-75页
   ·结果与分析第75-85页
     ·OsAiDG3和OsAiDG4基因全长cDNA的克隆和序列分析第75-82页
     ·pGEX-6P-1-OsAiDG3和pGEX-6P-1-OsAiDG4表达载体的构建第82-83页
     ·OsAiDG3蛋白的表达第83-84页
     ·OsAiDG4蛋白的表达第84-85页
   ·讨论第85-87页
     ·OsAiDG3和OsAiDG4的序列分析第85-86页
     ·OsAiDG3和OsAiDG4的表达第86-87页
 小结第87-88页
第五章 差异表达基因OsAiDG3和OsAiDG4在抗病性中的作用第88-103页
   ·材料与方法第88-92页
     ·材料第88页
     ·化学试剂与药品第88-89页
     ·培养基成分第89页
     ·植物总RNA提取和Northern杂交第89页
     ·目的基因的获得第89页
     ·植物表达载体pBI121-OsAiDG3和pBI121-OsAiDG4的构建第89-90页
     ·农杆菌介导OsAiDG3和OsAiDG4基因对烟草的转化第90-91页
     ·转基因植株的检测第91-92页
   ·结果与分析第92-98页
     ·OsAiDG3和OsAiDG4基因在抗病性不同的水稻品种中的表达第92页
     ·pBI121-OsAiDG3和pBI121-OsAiDG4植物表达载体的构建第92-94页
     ·转基因植株的筛选第94-96页
     ·Northern点杂交分析转基因的表达第96-97页
     ·转基因植株中CHI基因的表达第97页
     ·转基因植株抗TMV测定第97-98页
   ·讨论第98-102页
     ·差异表达基因OsAiDG3和OsAiDG4基因在不同抗性水稻品种中的表达第98-100页
     ·转OsAiDG3和OsAiDG4基因的烟草植株抗病性分析第100-102页
 小结第102-103页
第六章 结论第103-104页
参考文献第104-121页
致谢第121-122页
作者简历第122页

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