第一章 综述 | 第1-18页 |
1. 异柠檬酸裂合酶的研究背景及现状 | 第9-14页 |
2. 高通量药物筛选 | 第14-15页 |
3. 抗结核菌药物的高通量筛选研究进展 | 第15-18页 |
第二章 前言 | 第18-19页 |
第三章 实验材料和方法 | 第19-24页 |
1. 试剂和材料 | 第19-20页 |
2. 方法 | 第20-24页 |
2.1 pICL-pQE30表达质粒的构建 | 第20页 |
2.2 重组菌的生长曲线 | 第20-21页 |
2.3 重组 ICL的表达及其条件优化 | 第21-22页 |
2.4 重组蛋白的纯化 | 第22页 |
2.5 重组ICL的鉴定 | 第22页 |
2.6 酶活力检测 | 第22-23页 |
2.7 中药提取物的制备 | 第23页 |
2.8 适用于高通量药物筛选的酶活力检测的优化 | 第23页 |
2.9 Itaconic anhydride对 ICL的抑制作用分析 | 第23页 |
2.10 重组ICL中药抑制剂高通量筛选 | 第23页 |
2.11 数据分析 | 第23-24页 |
第四章 实验结果 | 第24-37页 |
1. 用巢式 PCR方法获得 ICL编码序列 | 第24-25页 |
2. 重组质粒的构建及鉴定 | 第25页 |
3. 重组质粒序列测定结果 | 第25-27页 |
4. 重组质粒对宿主菌的影响 | 第27页 |
5. 重组蛋白的表达及其表达形式鉴定 | 第27-28页 |
6. 可溶性重组蛋白表达条件的优化 | 第28-32页 |
7. 重组蛋白纯化 | 第32页 |
8. 重组 ICL的鉴定 | 第32-33页 |
9. 酶活力检测及其优化 | 第33-34页 |
10. 筛选模型的评估 | 第34-35页 |
11. DMSO对 ICL活性的影响 | 第35页 |
12. 重组 ICL中药抑制剂高通量筛选 | 第35-37页 |
第五章 讨论 | 第37-41页 |
第六章 结论及展望 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
致谢 | 第46页 |